糖皮质激素受体β对糖皮质激素受体α功能的影响及其意义

目的 :通过研究糖皮质激素受体 β对糖皮质激素受体α功能的影响 ,探讨糖皮质激素受体 β可能存在的生物学意义。方法 :( 1 )用瞬时转染技术将ＧＲβ和报告基因ｃａｔ共转染ＨＯＳ - 860 3细胞 ,激素处理后 ,研究ＧＲβ对糖皮质激素诱导ＧＲα外源性靶基因ｃａｔ表达的影响 ;( 2 )ＧＲβ真核表达载体的构建及ＧＲβ在ＨＯＳ - 860 3细胞中的稳定过度表达 ;( 3)用定量ＲＴ -ＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法检测糖皮质激素对ＨＯＳ -860 3细胞ｐ2 1表达的诱导及ＧＲβ的稳定表达对ＧＲα内源性靶基因ｐ2 1表达的影响 ;( 4 )用ＭＰＴ法检测ＧＲβ…     

重组人γ干扰素对人骨肉瘤细胞糖皮质激素受体的下调作用及其生物学意义

以人骨肉瘤细胞系（ＨＯＳ－８６０３）为模型，研究重组人γ干扰素（ｒｈＩＦＮ－γ）对糖皮质激素受体（ＧＲ）的调节作用及其生物学意义。方法：ＧＲ结合活性的测定采用放射配体结合分析法；ＧＲｍＲＮＡ的测定用分子杂交法。结果：极低浓度的ｒｈＩＦＮ－γ对ＧＲ具有下调作用，但对受体亲和力无明显影响；量效关系研究表明，当ｒｈＩＦＮ－γ浓度为１０ＩＵ／ｍｌ时，ＧＲ浓度已降至最低水平；时效关系研究表明，ｒｈＩＦＮ－γ作用３６ｈ后对ＧＲ的下调作用达到最大效应。用分子杂交方法研究表明，ｒｈＩＦＮγ下调ＧＲ的同时，伴有ＧＲｍＲＮＡ水平的相应降低；ｒｈＩＦＮ－γ本身虽然对ＨＯＳ－８６０３细胞的增殖分化过程无明显影响，但却可明显削弱糖皮质激素对该细胞系的增殖抑制作用和对碱性磷酸酶活性的诱导作用。结论：ｒｈＩＦＮ－γ对ＨＯＳ－８６０３细胞ＧＲ有非常明显的下调作用，且主要由ＧＲｍＲＮＡ表达减弱引起；ｒｈＩＦＮ－γ对ＧＲ的调节作用伴有受体功能活性的相应降低，表现为细胞对糖皮质激素的反应性明显减弱。     

糖皮质激素受体β对糖皮质激素受体α转录激活功能的影响

目的:通过研究糖皮质激素受体β对糖皮质激素受体α转录激活功能的影响,探讨糖皮质激素受体β存在的生物学意义。方法:将糖皮质激素受体α的报告基因CAT和糖皮质激素受体β共转染入人骨肉瘤细胞系HOS-8603,激素处理后,用ELISA方法检测CAT活性;用定量RT-PCR方法检测糖皮质激素受体β的稳定过度表达对糖皮质激素诱导p21mRNA表达的影响。结果:糖皮质激素受体β抑制报告基因CAT的表达,随着糖皮质激素受体β转染量的增加,抑制效果越明显;糖皮质激素受体β同样可以抑制糖皮质激素对糖皮质激素受体α内源性靶基因p21mRNA的诱导。结论:糖皮质激素受体β对糖皮质激素受体α的转录激活功能有抑制作用,糖皮质激素受体β可能是糖皮质激素受体α的内源性抑制因子。