葡萄球菌肠毒素A和黑色素瘤抗原A3基因重组真核共表达载体的构建及其在293T细胞的表达

目的构建葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal endotoxinA,SEA)和喉癌来源的黑色素瘤抗原A3(melanoma-associated antigenA3,MAGE-A3)基因共表达的真核表达载体,检测、鉴定其在293T细胞中的表达情况。方法分别用RT-PCR方法 及人工化学合成法获得MAGE-A3和SEA基因片段,然后依次将MAGE-A3和SEA基因克隆至含内部核糖体进入位点的真核表达载体IRES序列的上、下游,构建成重组质粒pMGEA3-IRES-SEA。经脂质体转染至293T细胞以后,用荧光定量PCR、蛋白免疫印迹分别鉴定SEA和MAGE-A3基因的表达。结果限制性内切酶酶切分析证实MAGE-A3和SEA基因均正确地克隆在pMAGEA3-IRES-SEA中,基因测序结果与GenBank公布的MAGE-A3、SEA序列完全一致,实现了双基因的正确重组。重组质粒转染293T细胞后能检测到MAGE-A3、SEA基因的高水平的有效表达。稳定表达双基因的293T细胞上清对外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)增殖有促进作用,与细胞中SEA的表达和分泌有关。结论成功地构建了pMAGEA3-IRES-SEA真核表达质粒,并能在293T细胞中有效表达MAGE-A3和SEA蛋白,由此奠定了其作为抗喉癌DNA疫苗应用的基础。     

晚期喉癌双颈淋巴结清扫术颈部大血管的处理

晚期喉癌易发生颈部淋巴结转移，最常见的部位为颈动脉三角区，且常侵犯颈部大血管，将颈内静脉、颈总动脉及其分支颈外、颈内动脉包裹，处理非常困难。近年来，我科对侵犯颈部大血管的双颈淋巴结进行了同期清扫，对受侵的颈部大血管进行了综合处理，效果满意。现报告如下。     

声信息治疗感音神经性聋主观听力变化的观察

目的　探讨声信息治疗感音神经性聋的临床应用价值。方法　用声信息治疗 68例 117耳感音神经性聋患者 ,对每次纯音听阈的变化进行动态观察 ,对疗效的可能影响因素进行逐步多元回归分析。结果　①所有频率听力提高。② 1 5kHz以下中、低频区域听力提高较多 ,1 5kHz以上中、高频区域相对较少 ,经 χ2 再分割后统计 ,前组有效率大于后组 (P <0 0 0 5 )。③根据疗效分级 ,达到实用听力为 14 5 % ,听力提高≥ 3 0dB为 11 7% ,>10dB为 17 4% ,≤ 10dB(无效 )为 5 6 3 % ,总有效率为 43 7%。④逐步回归分析显示年龄、病程影响听力提高程度。结论　我们初步认为 :①声信息通过自动组合量化的声音作用于人体听觉通路、大脑皮层 ,进行程序化调理 ,可以改善感音神经性聋患者的听觉功能 ;②声信息使所有频率听力提高 ,但 1 5kHz以下中、低频区域听力提高较多 ;③年龄大 ,疗效差 ;④病程短 ,疗效好     

顽固性鼻出血内窥镜检查及出血性质分析

我科于1996-01～2003-12对顽固性鼻出血鼻内窥镜检查236例,发现动脉性出血是主要原因之一,总结如下. 1 对象和方法 1.1 对象本组男141例,女95例,年龄23～81岁,平均58岁,40岁以上213例,单侧鼻腔230例,双侧鼻腔为6例.顽固性鼻出血诊断标准[1]:单侧或双侧鼻腔反复出血,出血部位在鼻腔后部,经凡士林纱条或高膨胀止血棉填塞2次以上无效,行鼻内窥镜及鼻腔、鼻窦CT检查排除肿瘤可能,行血液学检查排除血液病.     

豚鼠变应性鼻炎模型鼻黏膜超微结构的改变

目的:探讨豚鼠变应性鼻炎模型鼻黏膜出现的超微结构病理变化.方法:用橄榄油将甲苯-2,4-二异氰酸酯配成浓度为10%溶液作为致敏剂,滴鼻,建立豚鼠变应性鼻炎模型8例.另8例正常豚鼠作对照.致敏结束、模型成功后,取两组鼻黏膜进行透射电镜观察.结果:透射电镜见①对照组:鼻黏膜上皮细胞结构完整.表面有纤毛,排列整齐,纤毛内微管排列规则、清晰.胞质内细胞器丰富,偶见嗜酸性粒细胞.偶见表面活性物质板层体.②模型组:黏膜上皮破损.杯状细胞破损.纤毛微管结构紊乱,出现复合、短纤毛.微绒毛消失.细胞体积缩小.电子密度增加.核变形、固缩.细胞器退变、空泡化.见大量嗜酸性粒细胞,并见其胞膜破裂,伪足形成,脱颗粒及空泡形成.肥大细胞较多,可见巨噬细胞及浆细胞.血管扩张.浆液腺体旺盛增生.这种形态学的改变与变应性鼻炎的临床表现大致吻合.结论:变应性鼻炎鼻黏膜出现形态学的改变,基本病理是上皮损害,血管扩张和毛细血管内皮细胞连接扩大,组织水肿,浆液腺体增生.嗜酸性粒细胞、肥大细胞等浸润、脱颗粒.     

喉癌术后复发因素Cox模型评价

对２９５例喉癌术手术患者随访３年以上，确诊复发３１例。对造成复发的可能因素进行Ｃｏｘ模型分析，显示Ｔ分期、Ｎ分期、肿瘤溃疡、发生声门上区、发生声门下区五 引起复发的主要因素；肿瘤间质淋巴细胞浸润为防止复发的保护因素。依此结果建立复发多因素模型目标方程和危险指数方程。这些结果为临床判断喉癌术后复发倾向提供了参考。     

腮腺良性肿瘤保留腮腺主导管区域性切除的临床应用

腮腺浅叶切除是腮腺良性肿瘤手术的经典术式，该手术需结扎腮腺导管和解剖面神经，从而导致剩余腮腺组织萎缩及容易损伤面神经，保留腮腺主导管的区域性切除能较好地保留残余腮腺的功能，减少面神经的损伤，为探讨区域性切除在腮腺良性肿瘤中的作用，我们对在我科接受该术式的52例腮腺良性肿瘤患进行了分析，现报告如下。     

纤维喉镜下电离子手术治疗声带良性病变53例

总结分析在纤维喉镜引导下应用电离子治疗仪＾「１」手术治疗喉部良性病变５３例，结果治愈４５例（８４．９％），有效５２例（９８．１％），无效１例（１．９％）。该治疗方法具有痛苦小，安全可靠，操作简便，无出血等优点，为耳鼻喉科医师治疗喉部良性病变提供了一种新的有效方法。     

鼻恶性肿瘤病人血小板聚集功能的测定

对６８例鼻恶性肿瘤病人进行血小板聚集试验，并以１００例正常人和１０例鼻良性肿瘤病人作对照，结果发现（１）恶性肿瘤中，治疗前组，复发组和远隔转移组血小板最大聚集率（ＭＡＲ）均数高于正常组，良性肿瘤组和治疗后组（Ｐ〈０．０５）；（２）治疗前组中ＭＡＲ均数随肿瘤分期而增加，表明恶性肿瘤可引起血小板集增强，并就恶性肿瘤病人血小板聚集增强的机制，血小板在肿瘤生长，转移中的作用等进行讨论，还展望了血小板抑制剂     

喉淀粉样变性病的长期随访观察

报告11例喉淀粉样变性病的诊治及长期随访资料。