小鼠4-1BBL基因真核表达载体构建及其在COS-7细胞中的表达

目的：构建含小鼠4-1BBL编码区cDNA序列的真核表达载体，并检测其在COS-7细胞中的表达。方法：将目的基因4-1BBL克隆人pUCl9载体中并进行酶切鉴定和DNA序列测定。亚克隆入真核质粒pIRES2-EGFP，构建真核表达载体pIRES2-EGFP-m4-1BBL。用脂质体法将重组质粒转入COS-7细胞，以RT-PER和观察细胞内荧光的方法检测m4-1BBL的表达。结果：酶切鉴定和序列分析证实，重组质粒含有人4-lBBL全长cDNA编码序列，转染实验表明4-lBBL基因能在COS-7细胞中表达。结论：鼠4-1BBL全长cDNA基因真核表达载体构建及其在COS-7中的表达均获成功，为进一步研究奠定了基础。     

海带新用

海带,药名昆布。《嘉祐本草》记:“出东海水中石上。比海藻更粗,柔韧而长”。海带“功同海藻、昆布”,“去瘿行水,下气化痰”,“催生”。就我临证所见,其用日广,宜刮目相看。1 能延寿。日本人称其为长寿菜,富含多糖类成分藻胶酸和昆布素、甘露醇、无机盐、蛋白质、氨基酸,特别含丰富的碘(0.27～0.72％)和氟、钙、钴、钾。日本居民     

血缘关系者活体肝部分移植术的成分输血治疗1例

输血治疗是临床活体肝部分移植术的必要措施，但其不同于常规手术，更不同于全肝移植术，正确的输血治疗不仅可以调控患者的出凝血功能和维持合适的血液成分，提高肝移植成活率，而且还可以扩大肝部分移植适应证，避免或减轻排斥反应，减少输血性传染病和继发性病毒感染的...     

紫癜性肾炎患儿肠道菌群变化及临床意义研究

背景目前国内外关于过敏性紫癜（HSP）患儿肠道菌群变化的研究数量有限,且尚未见关于紫癜性肾炎（HSPN）患儿疾病早期肠道菌群变化的相关报道。目的 探讨HSPN患儿肠道菌群的变化及其在疾病发生、发展中的作用。方法 于2019年7—9月选取郑州大学第一附属医院儿科收治的37例HSP初治患儿作为试验组,另外同时选取12例健康志愿儿童作为对照组;并对HSPN患儿随访6个月,根据有无肾损伤进一步分为无肾损伤试验亚组13例和肾损伤试验亚组24例。收集HSP患儿与健康儿童的一般资料及粪便标本,应用高通量测序技术对所有研究对象的肠道菌群进行测序及分析,采用Alpha多样性（Shannon指数、Chao1指数、ACE指数）分析探讨样本内的微生物群落的丰度和多样性,通过主坐标分析（PCoA）来探究不同组别间群落结构的差异,利用线性判别分析及影响因子（LEfSe）分析找到组间差异显著的物种。结果 Alpha多样性分析显示,三组研究对象Shannon指数、Chao1指数、ACE指数比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。PCoA显示,三组研究对象肠道菌群群落结构均有差异（P<0.05）;Adon...     

血清胱抑素C水平与急性缺血性脑卒中后抑郁共病状态的关系

目的 探讨血清胱抑素C水平与急性缺血性脑卒中后抑郁共病状态的关系。方法 采用前瞻性研究方法,选取2019年1月—2022年6月承德医学院附属医院100例急性缺血性脑卒中患者作为研究对象,根据发病2周时的汉密尔顿抑郁量表（HAMD-17）评分分为抑郁组与非抑郁组。对比两组临床资料及实验室指标,分析血清胱抑素C水平与急性缺血性脑卒中后抑郁共病状态的关系。结果 抑郁组大动脉粥样硬化型占比低于非抑郁组,影像学病变累及占比高于非抑郁组（P <0.05）。抑郁组与非抑郁组性别、年龄、梗死部位、吸烟史、入院时HAMD评分比较,差异无统计学意义（P>0.05）。抑郁组血清胱抑素C、同型半胱氨酸水平高于非抑郁组（P <0.05）。抑郁组与非抑郁组甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇比较,差异无统计学意义（P>0.05）。小动脉闭塞型组胱抑素C、同型半胱氨酸水平高于其他TOAST分型组（P <0.05）。累及组胱抑素C、同型半胱氨酸水平高于未累及组（P <0.05）。多因素一般Logistic回归分析结果显示：高胱抑素C[O^R=26.330(95...     

抗人肝癌单克隆抗体嵌合Fab在巴氏毕赤酵母中的高效分泌表达

目的:通过分步整合,用巴氏毕赤酵母表达抗人肝癌单克隆抗体(mAb)HAb18的嵌合Fab(cFab)片段。方法:将抗人肝癌mAbcFab/HAb18基因的原核表达载体pET32a/cFab中的CL和Fd段基因,分别亚克隆到酵母表达载体pPIC9K和pPICZαA中,构建重组质粒pPIC9K/CL和pPICZαA/Fd并测序鉴定。将重组质粒pPIC9K/CL和pPICZαA/Fd分步整合到酵母菌GS115的染色体上,经G418和Zeocin筛选高拷贝的转化子及鉴定Mut表型后,用含5mL/L甲醇的培养基诱导表达。结果:成功地表达抗人肝癌mAbHAb18的cFab,表达水平为26mg/L。Westernblot鉴定证实,表达产物具有良好的与HAb18结合的活性和特异性。结论:cFab/HAb18在巴氏毕赤酵母获得表达,为对其进一步大规模的生产和临床应用奠定了基础。     

G-CSF对外周血树突状细胞亚群比例的影响

目的 :了解G CSF对小鼠外周血树突状细胞 (DC)亚群比例的影响。方法 :以不同剂量 (0、5 .0、10 .0或 15 .0 μg)的G CSF ,分别皮下注射于BALB/c小鼠 ,连续 6d ,每天 1次。第 6天分离外周血DC ,用流式细胞仪检测DC1(CD11c+ CD8a-)和DC2 (CD11c+ CD8a+ )的比例并计算其绝对值。结果 :经不同剂量的G CSF刺激后 ,外周血DC1的绝对值无显著变化 ,而DC2的绝对值增加 5倍 (9.6× 10 6/Lvs 5 5 .1× 10 6/L ,P <0 .0 1) ,DC1/DC2比值降低 (4.2vs 0 .7,P <0 .0 1)。结论 :G CSF在体内可提高外周血DC2的绝对数 ,对DC1的数无明显影响 ,从而使DC1/DC2的比例倒置     

大鼠β细胞素蛋白的表达、纯化及生物学活性鉴定

目的:获得大量重组大鼠β细胞素并检测其活性。方法:用PCR法从大鼠肾组织中扩增534bp的β细胞素基因片段,并按读框克隆到原核表达载体pET28a( )中。以构建的重组质粒pET28a-rBTC转化大肠杆菌BL-21(DE3)菌株,在IPTG诱导下表达β细胞素蛋白,表达产物用SDS-PAGE和Westernblot检测。采用镍柱亲和层析法纯化目的蛋白。结果:经IPTG诱导后,在大肠杆菌中可表达相对分子质量Mr为20000的目的蛋白。目的蛋白主要以包涵体的形式表达;表达量约占菌体蛋白总量的20%～30%。表达的目的蛋白与抗His标签抗体具有良好的反应性。结论:大鼠β细胞素基因在PET表达系统中得到高效表达;蛋白复性后能有效地促进NIH3T3细胞的体外增殖。     

乙脑病毒prME蛋白编码基因表达分析及不同DNA免疫方法比较

将构建的含流行性乙型脑炎病毒(Japaneseencephalitisvirus,JEV)prME蛋白编码基因的重组质粒 (pJME)以不同浓度 (10 μg、5 μg以及 3μg)分别转染于HepG2细胞中 ,Westernblot法分析重组质粒表达特点 ,肌肉与基因枪注射方式将pJME免疫BALB/c鼠 ,二次免疫后 3周 ,腹腔注射乙脑病毒JaGAr 0 1株 ,10 5PFU/10 0 μl作为病毒攻击观察 2 1d。比较分析所产生的中和抗体效价以及保护基金项目 :日本金泽医科大学High Tech nologycenterH2 0 0 0 2项目资助作者单位 :中国医科大学附属第二医院感染科 (冯国和 ,王玉梅 ,窦晓光 ,王占英 ,乔…     

腹部推拿联合艾灸治疗脾虚型功能性便秘的临床疗效

目的：分析腹部推拿联合艾灸治疗脾虚型功能性便秘的临床疗效。方法：选取郑州人民医院2021年11月至2023年1月期间收治的78例脾虚型功能性便秘患者,其中艾灸治疗的39例患者纳入对照组,在艾灸治疗基础上联合腹部推拿治疗的39例患者纳入观察组。治疗后,比较两组患者临床疗效与相关临床指标。结果：观察组患者总有效率高于对照组,差异具有统计学意义（P <0.05）;治疗后,观察组患者排便次数、大便性状、盆底松弛程度、阻塞感、排便不尽感积分均低于对照组,差异具有统计学意义（P <0.05）;治疗后,观察组患者直肠肛管压差、力排时肛管残余压均低于对照组,差异具有统计学意义（P <0.05）;治疗后,观察组患者血清胃动素（MTL）、P物质（SP）水平均高于对照组,生长抑素（SS）水平低于对照组,差异具有统计学意义（P <0.05）。结论：腹部推拿联合艾灸治疗脾虚型功能性便秘可进一步改善患者相关临床指标。