右归饮协同骨髓干细胞移植修复液氮冷冻骨坏死的研究

目的:观察右归饮协同骨髓干细胞(MSCs)移植对液氮冷冻股骨头坏死家兔模型骨修复的影响。方法:40只兔随机分为4组:A组(模型组)、B组(右归饮组)、C组(干细胞移植组)、D组(右归饮加干细胞移植组)。分离、培养、增殖MSCs;改良液氮冷冻法造模成功1周后,B组采用右归饮灌胃治疗,C组行髓芯减压术后MSCs 1mL(细胞密度:1×105·mL-1)移植治疗,D组采用右归饮协同MSCs移植治疗,对一般形态学、4、7周后的股骨头组织病理学和RT-PCR观察VEGF表达情况进行检测。结果:各治疗组较A组的观测指标均有明显改善,其中各治疗组空骨陷窝阳性率和VEGF阳性表达与A组组间比较差异均有统计学意义(P0.01),且D组改善优于B、C两组(P0.05)。结论:右归饮协同骨髓干细胞(MSCs)移植法能够显著改善冷冻坏死股骨头的血供、增强VEGF表达,促进坏死骨修复。     

关于生药的生物活性成分研究,薄荷的利胆作用成分

薄荷油的药理研究有中枢麻痹和扩张末梢血管作用;(—)-薄荷醇和(—)-薄荷酮具有抑制肠管运动和镇痉作用等报道。木文对薄荷(Mentha arvensis)及其作用成分,以健胃效果中所观察的利胆作用为指标进行检索。结果表明,薄荷的丙酮或50%甲醇提取物与对照组比较,均可显著增加胆汁酸的分泌量。在大鼠,50%     

分光光度法测定决明子中的蒽醌类成份

采用醋酸镁一甲醇法显色测定蒽醌酿类成份,结果说明其在呈色后90min内很稳定。采用分光光度法测定决明子中游离蒽醌和结合蒽醌含量,平均回收率9895％,r＝0．9999。本法快速。     

术前3D打印骨折模型在股骨转子间骨折中的应用效果

目的:探究术前3D打印骨折模型在股骨转子间骨折中的应用效果。方法:将2015年1月~2017年1月在某院接受治疗的40例股骨转子间骨折患者作为研究对象,并给予随机分组,对照组20例给予常规非3D模型手术治疗,观察组20例借助术前3D打印骨折模型规划手术治疗,对两组患者手术治疗情况、透视次数及一次置钉成功率进行综合评价,并对观察组术前规划、术中实际应用的PFNA主钉直径、主钉长度等进行比较。结果:观察组患者手术时间、术中出血量、术后引流量等手术指标与对照组呈现明显差异(P0.05),有统计学意义;观察组透视次数、一次置钉成功率分别为(5.21±0.83)次、90.0%,与对照组差异明显(P0.05),存在统计学意义;且观察组术前计划的主钉直径、主钉长度及螺旋刀片长度等与实际手术应用差异无统计学意义(P0.05)。结论:术前3D打印骨折模型应用于股骨转子间骨折手术,能够确保骨折精确复位,降低手术创伤,促进患者术后恢复,值得推广应用。     

健骨颗粒对成骨细胞分化的影响

目的:观察健骨颗粒对成骨细胞分化过程的影响。方法:取第3代SD大鼠颅骨成骨细胞,生理盐水血清组加入生理盐水血清;含药血清组加入最佳浓度的健骨颗粒颗粒含药血清;MTT法检测最佳含药血清浓度;运用采用ELISA法检测成骨细胞OCN的表达,采用比色法测羟脯氨酸(HYP)、碱性磷酸酶(AKP),实时荧光定量PCR-SYBR GREEN法检测核心结合因子(Cbfα1)、I型胶原(Col I)、成骨转录因子(OSX)mRNA的表达。取第4代细胞采用茜素红染色法染色矿化结节。结果:MTT法检测显示含药血清最佳浓度为20%;钙化结节观察显示含药20%组最先出现矿化结节,结节数量增多;含药血清组细胞液内OCN、AKP和HYP含量高于生理盐水血清组(P0.05);Real-time PCR检测结果显示含药血清组Cbfα1、ColⅠ、OSX基因mRNA的相对表达水平明显高于生理盐水血清组(P0.05)。结论:健骨颗粒含药血清能提高体外培养成骨细胞中矿化结节的数量、AKP、HYP、OCN的含量、ColⅠ、Cbfα1、OSX mRNA的表达,促进成骨细胞增殖,加快细胞分化。     

健骨颗粒含药血清对体外破骨细胞CA Ⅱ、CK、MMP- 9mRNA表达的影响

目的 通过观察补肾健脾中药健骨颗粒含药血清对体外破骨细胞CAⅡ、CK、MMP-9mRNA表达的影响,进一步揭示健骨颗粒有效防治绝经后骨质疏松症的作用机制。方法 用M-CSF和RANKL诱导破骨前体细胞RAW264.7分化为成熟破骨细胞,alamar Blue法检测破骨细胞血清干预的最佳浓度,于破骨细胞培养第7天开始干预,分别用25%浓度的健骨颗粒含药血清和25%浓度的生理盐水血清干预,培养48小时后抽提总RNA,采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR)、实时荧光定量SYBR GREEN法检测CAⅡ、CK、MMP-9mRNA表达,并取骨片行甲苯胺蓝染色,计算分析骨陷窝数和骨吸收面积,同时运用氧化显色法检测破骨细胞培养液中TRAP含量,ELISA法检测骨磨片培养液中CTX含量。结果 健骨颗粒含药血清组破骨细胞CA Ⅱ、 CK、MMP-9mRNA表达水平明显低于生理盐水血清组（P <0. 05),含药血清组骨磨片的骨陷窝数和骨吸收面积以及TRAP和 CTx含量均低于生理盐水血清组（P<0.05)。结论 健骨颗粒能有效抑制破骨细胞CAII、CK、MMP-9mRNA表达,降低破骨细胞功能活性,抑制破骨细胞对骨基质的分解,从而抑制骨吸收。     

健骨颗粒对去卵巢骨质疏松模型鼠整合素信号转导通路的影响

目的 从分子水平探讨健骨颗粒对去卵巢骨质疏松模型鼠整合素传导通路的影响.方法切除大鼠卵巢建立骨质疏松模型,药物干预,运用荧光定量PCR检测模型鼠骨组织中Ⅰ型胶原、整合素β1(Itgβ1)和粘着斑激酶(FAK)mRNA表达. 结果 切除卵巢后12周,大鼠骨密度明显降低,模型成立.Ⅰ型胶原、整合素β1和FAK mRNA表达均明显下降.经过健骨颗粒治疗后12周,骨密度虽然未能达到正常,但与生理盐水组对比明显回升;Ⅰ型胶原、Itgβ1和FAK的mRNA表达则显著增加. 结论 健骨颗粒可通过整合素信号转导通路作用于成骨细胞,提高成骨细胞的功能活性,从而改善骨质量,控制骨密度的继续下降.     

扶正胶囊中人参皂苷Rg_1与Re及Rb_1的质量测定

目的:建立扶正胶囊中人参皂苷Rg1、Re、Rb1超高效液相色谱(UPLC)测定方法。方法:采用Acquity1UPLCBEHC18色谱柱(2.1mm×100mm,1.7μm),以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速0.5mL/min,检测波长203nm,柱温40℃。结果:扶正胶囊中人参皂苷Rg1、Re、Rb1在14min内完全分离;人参皂苷Rg1和人参皂苷Re分离度达2.0,人参皂苷Rg1、Re、Rb1峰理论板数均超过20000;经外标法计算,含人参皂苷Rg1、Re、Rb1质量分别为0.71mg/g,3.841mg/g,10.61mg/g。结论:本法简便、准确、快速,可用于扶正胶囊中人参皂苷Rg1、Re、Rb1含质量测定。     

p38MAPK通路在健骨颗粒促成骨细胞早期分化中的作用

目的观察p38MAPK信号转导通路在健骨颗粒促进体外培养成骨细胞早期分化过程中的作用。方法采用酶消化法分离、培养SD大鼠成骨细胞,分4组进行干预:对照组(加入生理盐水血清)、阻断剂组(加入p38MAPK的阻断剂SB202190)、中药组(加入健骨颗粒含药血清)和中药加阻断剂组(加入健骨颗粒含药血清和SB202190),运用化学比色法检测上清液中碱性磷酸酶(AKP)活性及羟脯氨酸(HYP)含量,实时荧光定量PCR-SYBR GREEN法检测成骨细胞Ⅰ型胶原(ColⅠ)的表达。结果在AKP活性、HYP含量及ColⅠmRNA表达3项指标上,中药组>中药加阻断剂组>对照组>阻断剂组,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论体外培养大鼠成骨细胞的早期分化与p38MAPK信号转导通路有关;健骨颗粒含药血清能促进成骨细胞的早期分化,但这一作用仅部分通过p38MAPK信号通路实现。