IV型胶原片段阻滞原的基因克隆及原核表达研究

目的 克隆中国人阻滞原基因并高效表达。方法 利用高保真聚合酶链反应（HF-PCR）从胎肝细胞QSD胞克隆Ⅳ型胶原α1链NC1结构域编码序列，即阻滞原基因。并进行序列分析。将阻滞原基因克隆入表达载体pQE-31，转化大肠杆菌M15[pREP4]并用IPTG诱导蛋白表达，蛋白电泳鉴定重组阻滞原蛋白。结果 从胎肝细胞克隆的人阻滞原基因长687bp，编码229个氨基酸。大肠杆菌表达的重组阻滞原N-末端与载体编码的组氨酸标签形成融合蛋白；SDS-PAGE分析显示，经IPTG诱导后可出现28kd的目的蛋白条带。最高可占总菌体蛋白的32%，结论 该法可成功克隆阻滞原基因。将有助于肿瘤血管抑制疗法的深入研究。     

INR和96型血凝仪测定凝血酶原时间室间质评

按卫生部临检中心分发ISI标记凝血活酶试剂的要求及国产试剂，分别对同时分发的不同凝血酶原浓度参比血浆，使用96型血凝仪测定凝血酶原时间，结果显示ISI标记试剂测定的INR值均接近参考数据均数，而国产试剂测定值与参考数据均数有些离散。室间质评有助于提高检测水平，96型血凝仪为质评和临床工作提供可靠的方法学．     

恶性血液病患者系统性真菌感染的诊断与治疗

化疗及造血干细胞移植可明显改善多数恶性血液病患者的预后，但随之产生的获得性中性粒细胞减少及免疫缺陷可引发致命的系统性真菌感染。因此早期诊断和经验性抗真菌治疗，成为提高患者生存率的关键措施。此外，一些具有毒性小，抗菌谱更广的新的抗真菌药物的研究及开发，也为真菌感染的治疗提供了更多的选择。     

人类红细胞生成素放射免疫分析

从新鲜浓缩200倍人尿中，经DEAE──纤维素吸附和免疫亲和层桥提纯了红细胞生成素；免疫家免产生了抗血清；125I—红细胞生成素用Bolton－Hunter法制备；采用平衡法建立RIA；数据用参数Logistic数据处理程序处理。批内和批间CV分别为4．53％和12．38％，回收率为104．98％，可测范围为2．06～271.5μg／L．ED50为46．78μg／L，与血栓调节素无交叉反应。40名健康成人血浆红细胞生成素含量为4．965±0．906μg／L。该法可为肾性贫血和红细胞增生症的诊疗提供一种简便和有效的手段。     

激活的蛋白C耐性试验方法学的考虑

本文根据确认的血栓形成危险因素激活的蛋白C耐性条件，建立了激活的蛋白C－白陶土部分凝血活酶时间测定和因子V1691APCR。前者检测方法学受激活的蛋白C用童影响，操作简便，经济．适于大规模普查激活的蛋白C耐性。后者可从基因水平上对因子VG169lA所致激活的蛋白C耐性作出明确诊断。这对血栓性疾病的诊断及预防提供了新的方法。     

新灯盏花素体内抗血栓形成的作用

新灯盏花素是植物灯盏花中一种有抗血小板作用的复盐成分。在家兔的主动脉血栓模型中能减轻血小板的破坏与5-羟色胺释放反应,对血栓形成有明显的抑制作用,这种作用与剂量呈正相关性。新灯盏花素对血小板与血管内皮细胞的花生四烯酸代谢物TXB_2与6-酮-PGE1α的生成均有抑制作用。试验结果表明该药在体内有强烈的抗血栓效应。     

抗人脑胶质瘤单克隆抗体的制备及其特征

以本研究室建立的人脑恶性胶质瘤细胞系SHG—44为抗原免疫BALB/C小鼠,通过杂交瘤技术获得了二株恒定地分泌抗胶质瘤细胞单克隆抗体的杂交瘤细胞株SZ—38,SZ—39。 应用ELISA及免疫荧光法测定了该两株单抗与20种肿瘤细胞系,7种正常人体细胞,12种颅内肿瘤及12种正常人体组织的反应性。结果显示单抗SZ—38,SZ—39主要作用于胶质瘤细胞,特别是恶性胶质瘤细胞,其识别胶质瘤相关抗原可能为一种神经外胚层肿瘤抗原。 经用免疫沉淀及免疫转移电冰鉴定McAb SZ—38,SZ—39识别抗原分别为胶质瘤细胞表面Mw47,000Mw180,000的单链糖蛋白。     

急性早幼粒细胞白血病患者FG、SFC、FDP及D-二聚体的检测

测定40例正常人和50例急性早幼粒细胞白血病患者血浆纤维蛋白原（Fg）、血清纤维蛋白降解产物（FDP），血浆可溶性纤维蛋白复合物（SF）及血浆D-二聚体的含量．结果：Fg为1．8±0．72g／L，FDP为464±94μg／L，SFC为482．5±167mg／L，D-二聚体为5524.94±4247．03μg／L．正常对照组Fg为3．2±0．87g／L．FDP为215±63μg／L，SFC为49．7±16．4mg／L，D-二聚体为177．1±43．9ug／L．两组差异显著．提示上述指标可作为显示体内出凝血像异常及纤溶亢进的有效证据．作为DIC的确诊可确切地反应疾病病变过程．     

2N型血管性血友痛临床表现与基因突变

报道１例２Ｎ型血管性血友病患者，其临床表现和实验室怀血友病甲完全相似，以前一直被误诊为血友病甲。运用ｖｏｎ Ｗｉｌｌｅｂｒａｎｄ因子－ＦⅧ结合试验，发现患者血浆ｖＷＦ不能与ＦⅧ结合。为了阐明该患者ｖＷＦ缺陷的分子病理机制，通过多聚酶链反应和变性梯度凝胶电泳，发现该患者在１８号外显子内存在Ｇ－Ａ突变，序列分析表明患者成熟ｖＷＦＮⅧ结合区域２２位氨基酸残基甘氨酸突变为谷氨酸。     

抗人血小板单克隆抗体的研究Ⅱ(一种新型的抗血小板膜糖蛋白Ⅰ单克隆抗体SZ-2)

抗人血小板单克隆抗体SZ-2在pH8.0的0.1M磷酸缓冲液中可吸附在葡萄球菌蛋白A-Sepharose4B上,用pH6.0的0.1M枸椽酸钠缓冲液将其洗脱、提纯,表明本抗体属IgGl亚类。与用兔抗小鼠Ig亚类血清作免疫双扩散所得结果相符。应用免疫荧光法和放射免疫分析分别测定SZ-2抗体与人血小板、红细胞、白细胞、骨髓巨核细胞和各种