铜离子对肺癌细胞增殖的影响及相关基因的临床意义

背景与目的：破坏铜离子在体内的平衡可能会促进癌症的发生、发展。研究铜离子对肺癌细胞增殖的影响，分析铜离子及铜伴侣蛋白编码基因在肺癌及正常肺组织中的表达差异及其临床意义。方法：以肺癌细胞和肺正常细胞系为细胞模型，通过细胞增殖实验检测铜离子对细胞增殖能力的影响，通过蛋白质印迹法（Western blot）实验检测不同浓度铜离子溶液处理细胞后对细胞外调节蛋白激酶（extracellular regulated protein kinase，ERK）/磷酸化ERK（phosphorylated ERK，p-ERK）信号转导通路的影响。以烟草致癌物4-甲基亚硝铵-1-(3-吡啶基)-1-丁酮［4-(methylnitrosamino)-1-(3-pyridyl)-1-butanone，NNK］诱发小鼠肺癌，用电感耦合等离子体质谱仪（inductively coupled plasma-mass spectrometry，ICP-MS）分析小鼠肺癌组织和正常肺组织中铜的含量差异。利用癌症基因组图谱（The Cancer Genome Atlas，TCGA）、Oncomine和Kaplan-Meier Plotter网站等多种数据库分析铜伴侣蛋白超氧化物歧化酶（copper chaperone for superoxide dismutase，CCS）、细胞色素C氧化酶铜伴侣蛋白17（cytochrome C oxidase copper chaperone 17，COX17）和抗氧化剂1铜伴侣蛋白（antioxidant 1 copper chaperone，ATOX1）的mRNA表达水平与肺癌患者预后的相关性。结果：体外实验结果表明，5 μmol/L的铜离子浓度能显著提高肺癌细胞的增殖能力，且能诱导细胞内与细胞增殖相关的信号通路如ERK信号转导通路的激活。在NNK诱发的小鼠肺癌中，肺癌组织中的铜含量显著高于肺正常组织。TCGA和Oncomine等数据库分析结果表明，铜伴侣蛋白编码基因CCS、COX17和ATOX1在肺癌组织中的表达水平比癌旁正常组织的表达水平显著增高，其表达水平与肺癌患者的预后呈负相关。结论：在一定浓度范围内，铜离子能促进细胞增殖，肺癌患者铜伴侣蛋白编码基因有可能用于判断患者临床疗效和评估预后。     

染色体着丝粒探针的制备及其在检测染色体畸变中的应用

人类染色体的着丝粒区含有多种高度重序列家族，其中α卫星ＤＮＡ在每号染色体的着丝粒区都存在，它们由１７１ｂｐ长的重复序列单元构成，其中大部分序列高度保守［１］。本文通过简并引物扩增１７１ｂｐ的重复单元，生物素标记制备成着丝粒探针，并应用此探针对辐射诱发...     

重组融合蛋白抗CD20Fab-LDM的构建、表达及体外活性研究

目的构建和表达抗CD20Fab-LDP(力达霉素辅基蛋白)融合蛋白,制备强化融合蛋白抗CD20Fab-LDM(力达霉素),并测定该融合蛋白的生物学活性。方法采用PCR和overlapPCR方法构建抗CD20Fab-LDP融合蛋白,并用双脱氧终止法测定DNA序列;采用亲和层析法纯化该产物,并用Western blot鉴定纯化产物;采用FACS方法鉴定纯化产物与靶细胞的结合活性;采用冷乙二醇法制备强化融合蛋白抗CD20Fab-LDM;采用MTT法鉴定抗CD20Fab-LDM对CD20+Raji细胞特异性的细胞毒作用。结果DNA序列测定结果表明抗CD20Fab-LDP融合蛋白已构建成功,可溶性表达产物的产量可达4mg.L-1以上,具有与Raji细胞(CD20+)结合的活性,与抗CD20Fab的亲合常数相当,抗CD20Fab-LDM体外能特异性杀伤Raji细胞,IC50值为0.9×10-10mol.L-1。结论成功地构建了抗CD20Fab-LDP融合蛋白,并获得可溶性高效表达,表达产物具有与相应靶抗原结合的活性,并成功制备了抗CD20Fab-LDM强化融合蛋白,体外能特异性杀伤CD20+的Raji细胞。     

荧光原位杂交检测上海6.25事故受照者的染色体畸变

电离辐射能诱发多种染色体畸变 ,其中染色体易位属于稳定性畸变 ,并且畸变率与最初照射剂量相关良好 ,因而易位畸变分析是回顾性剂量估计及远后效应评估的重要指标。应用染色体特异性探针进行荧光原位杂交 ,能灵敏和迅速地计数易位等稳定性畸变 ,因而非常适合于早先受照者的染色体畸变分析。本实验采用该技术研究了 6 2 5钴源事故受照者外周血淋巴细胞的染色体畸变。一、材料和方法1 材料 :5例60 Ｃｏ源事故受照者曾在照后 2 4ｈ取外周血进行染色体畸变分析估计生物剂量为 1 9～ 5 1Ｇｙ ,属急性全身均匀照射。在照后第 8、9年分别取静脉…     

45,X/46,X,r(X)核型Turner综合征一例

患者 15岁 ,因原发闭经、身材矮小 ,于 1998年在解放军总医院就诊。身体检查 :身高 135ｃｍ ,体重 38ｋｇ。眼、耳、鼻无异常 ,发际位不低 ,无蹼颈及肘外翻。乳房未发育 ,外阴发育如幼女 ,无阴毛及腋毛 ,无月经来潮。Ｂ超检查显示子宫、卵巢发育幼稚。智力一般。患者父母非近亲婚配 ,母在孕期未接触有害物质 ,未服任何药物。家族中无类似病患者。细胞遗传学检查 :外周血淋巴细胞染色体标本经Ｇ显带分析 ,染色体核型为 :45 ,Ｘ/ 46 ,Ｘ ,ｒ(Ｘ) ,其中 45 ,Ｘ占 75 % (图 1) ,46 ,Ｘ ,ｒ(Ｘ)占 2 5 % (图 2 )。经染色体核型确认诊断为Ｔｕｒｎ…     

绿茶多酚抑制人鼻成纤维细胞及A549上皮细胞IL-8的产生

绿茶中多酚类化合物包括表棓儿茶素棓酸酯(EGCG)、表棓儿茶素(EGC)、表儿茶素棓酸酯(ECG)、表儿茶素(EC)和(-)-儿茶素,其中EGCG是最主要的多酚类化合物。为了探索绿茶抗炎作用机制,作者采用原代人鼻黏膜成纤维细胞和A549支气管表皮细胞,分析了上述5种化合物对IL-8诱导的阻断作用。分别用2、10、50μg/mL的5种绿茶多酚与成纤维细胞和A549细胞共同培养24h,然后培养液用10ng/mL的重组人IL-4、IL-13、肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素(IFN)-γ刺激24h,再用1ng/mL的IL-1β处理24h。以ELISA分析IL-8,并进行蛋白质印迹分析和RT-PCR…     

赴非洲劳务人员境外输入性疟疾综合干预模式及效果评价

目的探索出国劳务人员输入性疟疾综合干预新模式。方法根据全国、江苏省和镇江市2006—2013年的疟疾疫情和特点,将赴非洲疟疾疫区的劳务人员作为研究对象,分为干预组和对照组。干预过程分为出国前医学咨询,出国期间防控技术辅导,回国后追踪调查3个阶段。比较两组人员疟疾知识提高情况、在国外期间和回国后的疟疾罹患率差别情况,评价干预效果。结果干预组健康教育前后疟疾知识问卷回答正确率从4.22%上升至97.95%。回国后疟疾罹患率干预组显著低于对照组,干预组疟疾罹患率为0.18%,第一对照组疟疾罹患率为1.12%,第二对照组疟疾罹患率为1.50%。干预组在国外期间疟疾患病率显著低于对照组。结论综合干预措施对控制劳务人员在国外和回国后的疟疾疫情有显著作用。     

YG-40型CO2激光治疗机的典型故障分析与排除

本文介绍了YG-40型CO2激光治疗机的典型故障分析与排除     

充分发挥检验检疫技术支撑作用确保创建国际卫生机场圆满成功

2005年4月3日，中国大地上又新增了一座国际卫生机场，南京禄口国际机场（以下简称禄口机场）通过了世界卫生组织的考核验收，荣获“国际卫生机场”称号，成为中国大陆40多个对外开放机场中5个国际卫生机场之一。创建国际卫生机场（以下简称创建）是一项参与单位多、技术含量高、工作难度大的系统工程。在3年的艰苦创建过程中，南京出入境检验检疫局（以下简称南京局）作为南京空港口岸的卫生主管部门，充分发挥技术支撑作用，与机场公司、驻场单位通力合作，确保了创建工作圆满成功。