环磷酰胺诱发叙利亚地鼠胚胎细胞恶性转化的分子生物学特征

采用杂交, 测序, RT-PCR 等方法对环磷酰胺(CP)转化的不同叙利亚地鼠胚胎(SHE)细胞株癌基因和抑癌基因进行了分析, 结果表明, c-myc癌基因以扩增的方式被激活, 在Ha-ras和Ki-ras癌基因上均存在着突变. 在对Ha-ras 207 bp的一段cDNA序列分析中发现, 总共发生了35处碱基对的替换, 除两处是在密码子的第一位碱基外, 其余均发生于第三位碱基上, 但除第67位密码子的第三位碱基由于G-T颠换导致所编码的甲硫氨酸被异亮氨酸取代外, 其余碱基的替换均未导致氨基酸的改变. 分析还表明, CP致Ha-ras癌基因的突变无位点专一性. 结果还表明, p53抑癌基因也发生了突变,并且可能属于点突变性质. 因此, CP引起的SHE细胞恶性转化的分子机理可能是以点突变和基因扩增的方式引起c-myc, Ki-ras, Ha-ras癌基因的激活及p53抑癌基因的失活或表达改变.     

膦氧氮丙啶对雄性小鼠的生殖毒性研究

膦氧氮丙啶(phosphine oxide,MAPO)对AMS雄性小鼠经口染毒60天,与正常雌鼠交配后,雄鼠染毒剂量≥10ppm时其生育率为0％,阴性对照及MAPO1ppm组雄鼠生育率为100％。对小鼠附睾精子数量检测,MAPO10ppm和100ppm组的精子数量分别为0.62和0.51×10~6/ml/10g附睾,明显低于对照组(2.59×10~6/ml/10g附睾)和MAPO1ppm组(2.06×10~6/ml/10g附睾),仅存的精子活动度极差,绝大多数是伴有畸形的死精子。畸形精子中以无定形等头部畸形居多。结果表明,MAPO对哺乳类动物也是一种雄性不育剂,对雄性小鼠生殖细胞具有潜在诱变危害。     

小鼠精原细胞染色体制备和体内姊妹染色单体互换(SCE)方法

化学物质(药物)诱发生殖细胞突变是遗传毒理学研究的重要课题。细胞染色体观察可以提供遗传损伤的直接依据。关于哺乳动物精原细胞染色体制备方法,Evans等已分别报告并进行了改良。实践表明,这类方法难以稳定地获得足够数量的中期细胞。我们根据Yamamoto等的方法略加改进,并对几个主要实验条件做了研究,使此法较为稳定。在此基础上,我们又参照Kanda等的方法稍加改进,在活体小鼠体内进行了精原细胞染色体的姊妹染色单体互换(SCE),为开展化学物质(药物)对生殖细胞的遗传毒理学研究及比较体内外SCE频率差别等的探讨,提供了一条可行和实用的技术途径。     

45种金属化合物的微核试验

本文用骨髓细胞微核试验检测了45种金属化合物的致突变作用,其中12种诱发微核率明显升高,即:氰化锂、硫酸铍、硫酸钒、重铬酸钾、铅酸钾、氯化铁、氯化钴、氯化铑、氯化镉、氯化铂、亚钾酸钠和硝酸钍,表明这些金属化合物有致突变作用。因为微核试验的结果与金属化合物致癌性之间有一定关系,故推荐微核试验作为评价金属化合物致突变性和预测致癌性的一项指标     

醋氨己酸锌对CHL细胞染色体畸变试验

醋氨己酸锌对ＣＨＬ细胞染色体畸变试验徐波，刘秀华，宋欣，王治乔（北京军事医学科学院毒物药物研究所１００８５０哈尔滨哈尔滨医药工业研究所１５００４０北京总后医专１０００７１）本文用ＣＨＬ细胞染色体畸变试验检测醋氨已酸锌是否具有诱变性。试验的最大浓度是该...     

MAPO与UDMH诱发正常人淋巴细胞姊妹染色单体互换和染色体畸变观察

细胞染色体的姊妹染色单体互换(SGE),是指哺乳动物细胞在外加5-溴脱氧胸腺嘧啶核苷(Brdu)培养中,后者掺入新合成的DNA链中胸腺嘧啶核苷位置。细胞经两个分裂周期后,一条染色单体DNA双链的一股含Brdu,另一股不含(深染),余下一条单体的DNA双链均含Brdu(浅染)。     

碱性成纤维细胞生长因子的染色体畸变试验

目的　检测碱性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ)的致突变性。方法　采用ＣＨＬ细胞染色体畸变试验。ｂＦＧＦ最大浓度为ＣＨＬ细胞 5 0 %抑制浓度。在±Ｓ9ｍｉｘ条件下 ,2 4及 48ｈ收获细胞做染色体畸变分析。结果　溶媒、Ｓ9ｍｉｘ对照染色体畸变率正常 ,ｂＦＧＦ 2 5、5 0、10 0、2 0 0 μｇ ｍｌ浓度染色体畸变率为1 5 %～ 4 5 % (正常 <5 % )。阳性对照丝裂霉素Ｃ染色体畸变率显著增高 ,环磷酰胺无Ｓ9ｍｉｘ染色体畸变率正常 ,有Ｓ9ｍｉｘ染色体畸变率显著增高 ,表明本试验系统可靠。结论　在本试验系统条件下 ,ｂＦＧＦ在 2 5～ 2 0 0 …     

环磷酰胺诱发永生化人支气管上皮细胞的恶性转化

研究环磷酰胺 (CP)对人类支气管上皮细胞的致癌转化效应 .实验利用永生化人支气管上皮细胞(BEAS 2B)为靶细胞模型 ,研究CP诱导的BEAS 2B细胞 (BEAS CP)的恶性转化 ,并伴随研究了BEAS CP转化细胞的增殖动力学 ,细胞周期和非贴壁依赖性生长等转化表型特征 .结果显示 ,经传代和软琼脂培养基筛选 ,BEAS CP细胞已具有较为稳定的转化表型和细胞生物学特性 ,可能是具有裸小鼠致瘤性的恶性转化细胞 .结果表明CP对BEAS 2B细胞具有恶性转化效应     

戍炔雌醇对大白鼠致畸胎研究

研究戍炔雌醇（ＣＥＥ３）对妊娠大鼠的毒性和致畸胎作用。结果表明，ＣＥＥ３００５、０２５和１２５ｍｇ／ｋｇ３组于妊娠后７～１６天灌胃给药，可引起妊娠母鼠阴道出血和影响着床率。ＣＥＥ３３ｍｇ／ｋｇ组于妊娠后第１２天单次灌胃给药不引起妊娠母鼠阴道出血，而且受孕率亦正常。不同剂量ＣＥＥ３对胎鼠发育基本无影响。对不同剂量组活胎鼠进行检查，其外观、内脏和骨骼畸形均获得阴性结果。结果表明，ＣＥＥ３对胎鼠无致畸胎作用