pCMV6-Entryp62真核表达质粒构建及高表达稳定细胞系的建立

【目的】构建pCMV6-Entryp62真核表达质粒,并将其转染至人乳腺癌细胞株MCF-7中,通过抗生素筛选构建高表达p62的稳定细胞系。【方法】以293ET细胞cDNA为模板,设计引物扩增p62基因片段,双酶切扩增出的目的基因片段及pCMV6-Entry Vector空载体,将酶切后的片段进行连接,转化构建质粒,酶切及测序验证;将构建好的质粒转染入MCF-7细胞株中,G418筛选稳定表达细胞株,并用实时定量PCR和Western blotting进行验证。【结果】酶切及测序结果证实成功构建pCMV6-Entry p62真核表达质粒;实时定量PCR结果显示,与对照组相比,转染p62的MCF-7稳定细胞中p62mRNA的表达显著升高;Western blotting检测Flag及p62蛋白表达显示,在转染p62的MCF-7稳定细胞检在62kd位置测到Flag阳性条带,对照组则没有阳性条带。在转染p62的MCF-7稳定细胞中p62蛋白的表达较对照组显著升高。【结论】成功构建了pCMV6-Entryp62真核表达质粒,并成功建立高表达p62的MCF-7稳定细胞系。     

静滴支链氨基酸引起过敏反应1例

静滴支链氨基酸引起过敏反应１例丰宁满族自治县医院王成艳关键词支链氨基酸，过敏反应患者男，３６岁。主因乏力、食欲不振、腹胀２０天，巩膜黄染３天，诊断为急性乙型肝炎收入我科。应用护肝降酶药物治疗，静点能量合剂、支链氨基酸。输入后无不良及过敏反应，病情明显...     

生物武器战的威胁对军事防生医学的挑战

生物武器医学防护是军事医学工作研究领域，不同于常规战伤及日常的救治工作。在沙漠盾牌（沙漠风暴）行动及海湾战争期间，生物武器已对参战士兵构成明显的威胁。我们应该清醒地认识到，医务工作者必须具备军事医学这一重要领域的基本知识，应加强对医学生的训练，使他们能够适应生物战的需要，提高对生物武器伤的识别及救治能力。     

电子病案书写中存在的问题及对策

随着信息技术的发展,电子病案以其快捷、方便、信息共享等优点,完全代替了传统的手写病历。但是,由于认识和管理上的疏漏,电子病案的书写存在着不少的问题,有的甚至造成了严重的后果。笔者对某医院1700多份电子病案进行了查阅审核,现就如何提高电子病案的书写质量和管理水平,有效预防医疗纠纷探讨如下。     

关于农村合作医疗筹资机制的探讨

资金筹集是我国新型农村合作医疗制度建设的首要和根本问题。新型农村合作医疗资金筹集必须建立多元化的筹资机制，确定科学合理的筹资水平。为此要制定各项保障措施，确保资金及时足额到位。     

武警某支队处置大规模突发事件卫勤保障的做法与体会

武警部队是维护国家和社会稳定，保障人民安居乐业的主要武装力量。2012年9月，我支队受领处置大规模突发事件任务后，根据上级指示要求和首长决心意图，迅速作出反应，成功处置了某地大规模突发事件。支队后勤着眼任务需要部队遂行卫勤保障任务，依据“拉得出，上得去，展得开，救得下”的卫勤总目标组织卫勤保障，为部队完成任务提供了有力地保障支撑。     

24例新生儿出血症的护理体会

新生儿出血症临床较常见。现将24例新生儿出血症的护理体会介绍如下。1临床资料24例中，男10例，女14例。早产地11例，足月儿13例，剖腹产2例，产钳助产3例，股吸4例，自然产15例。入院时间：一1天1例、2～4天15例、5～12天8例。治愈22例，死亡2例。2护理体会2．1观察呕血、便血的性质、颜色、和出血量，做好记录。胃肠道出血者需禁食，取侧卧位，防止呕吐物吸入气管引起窒息，用湿纱布擦净口鼻周围，及时清理呕吐物及血便。2．2注意皮下出血的部位、范围、性质、以鉴别其它原因引起的出血。23观察体温、呼吸、心率、血压的变化，颅内出血时…     

砷及砷化物与人类疾病

砷及其化合物广泛存在于自然界中 ,砷及其化合物可以引起人体多系统多器官的损伤 ,其中包括砷及其化合物的毒性作用。致畸、致癌、致突变等作用。近年研究发现砷可能是人体必需的微量元素。砷及其化合物有一定的有益的生物学效应 ,如用于临床的肿瘤治疗等。针对这几方面的研究进展做一综述     

砷中毒大鼠大脑皮层乙酰胆碱酯酶活性及其行为学变化

脑中化学物质的稳定性影响着正常人的思维、学习和行为变化,所以砷对脑发育的影响不容忽视.据Biswas[1]报道,在全身各器官中脑砷的浓度最低.但仍有部分砷通过脑脊液、血液进入脑实质,产生脑损伤.本研究通过测定不同剂量染砷大鼠大脑皮层乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性,及其行为学变化,揭示砷中毒与大脑皮层AChE活性和行为学变化之间的关系,同时为阐明砷对脑发育的影响及砷的神经毒性机制提供依据.     

高强度运动训练对大鼠骨骼肌细胞IL-6表达的影响

目的：研究高强度运动训练条件对大鼠骨骼肌细胞IL-6表达水平的影响。方法首先建立高强度运动训练大鼠动物模型,然后采用双抗体夹心ELISA法,检测高强度运动训练后大鼠外周血以及骨骼肌细胞IL-6的表达水平。结果经高强度运动训练后,大鼠骨骼肌细胞及外周血IL-6含量均有所升高。结果显示;经过高强度运动后,大鼠血清中IL-6的含量与对照组相比有明显升高,各组结果差异有统计学意义,P〈0.01,高强度运动组大鼠骨骼肌细胞中IL-6的含量与对照组相比,结果差异有统计学意义,P〈0.05。但是一次性力竭运动组大鼠外周血及骨骼肌细胞中IL-6的含量与对照组相比,结果差异无统计学意义,P＆gt;0.05。结论高强度运动训练可以诱导大鼠骨骼肌细胞及外周血中IL-6的表达,发挥抗炎作用。