敲低miR-221、miR-222表达对乳腺癌细胞放射敏感性影响的研究

R-222共转染组细胞PTEN蛋白表达明显上调,pAkt蛋白表达下调.结论 反义miR-221、AS-miR-222可能通过上调PTEN蛋白表达增强MCF-7人乳腺癌细胞放射敏感性.     

microRNA-221和microRNA-222与恶性肿瘤的研究进展

微RNA(micmRNA)-221和microRNA-222是成簇的microRNA,在恶性肿瘤中起促癌作用,在胶质母细胞瘤、前列腺癌、乳头状甲状腺癌等恶性肿瘤中高表达.microRNA-221和microRNA-222通过调控其特定的靶基因行使促癌作用.在所有预测的靶基因中,p27kip1和p57kip2是已被验证的靶基因,microRNA-221和microRNA-222通过下调p27kip1和p57kip2的表达来促进肿瘤的形成和生长.     

放射治疗诱导肿瘤细胞凋亡的近期研究动态

人们在研究射线所致细胞死亡机制过程中发现,凋亡是射线所致细胞死亡的一种形式,并且射线与凋亡的关系密切。近年来,就此方面的研究越来越多。本文综述放疗诱导凋亡现象及一些通过改变放疗诱导凋亡来提高肿瘤控制率的最新研究动态。     

立体定向放疗与常规放疗结合治疗高分级脑胶质瘤

目的采用立体定向放疗与常规放疗结合治疗高分级脑胶质瘤,分析其疗效,探讨其影响预后的因素.方法自1998年12月至2005年1月用立体定向放疗与常规放疗结合的方法治疗高分级脑胶质瘤106例.立体定向放疗针对GTV追加剂量,每次5～7Gy,共计5～7次,常规放疗主要针对亚临床病变,一般剂量为50Gy.寿命表法统计生存率.结果本组病例1、3年生存率分别为66.2%和27.0%.Ⅲ级胶质瘤较Ⅳ级的患者预后好,预后与年龄、肿瘤部位和治疗剂量等其他因素无关.结论立体定向放疗加常规放疗治疗高分级脑胶质瘤既发挥了放射物理剂量分布的优点,又符合放射生物学原则,较以往治疗提高了患者的生存机会.     

斯奇康对结核性胸膜炎的免疫调节作用机制

目的探讨斯奇康对结核性胸膜炎的免疫调节作用机制。方法用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接酶标记的链酶卵白素-生物素检测法,观察斯奇康治疗前后结核性胸膜炎患者胸水中sICAM-1、IFN-γ和外周血淋巴细胞上粘附分子配体CD11a、CD11b阳性表达百分率。结果经斯奇康治疗后,患者胸水中sICAM-1、IFN-γ及外周血CD11a、CD11b表达显著降低(P<0.001),且10例患者胸水完全吸收。结论斯奇康对结核性胸膜炎的免疫调节可能通过影响淋巴细胞上粘附分子的表达及细胞间粘附连接实现,以此抑制结核性胸膜炎的细胞免疫反应,减少胸水渗出,控制患者病情。     

X-刀治疗高危脑干胶质瘤八例

近几年少数脑干胶质瘤可通过显微外科切除，但绝大多数脑干胶质瘤以内生弥散型生长，其因在脑瘤中预后最差而被视为高危脑干胶质瘤，此种肿瘤手术难以完整切除，故以放疗为主，但传统放疗的疗效较差。我院2000年1月-2001年12月对8例患者行常规放疗加X-刀治疗，报告如下。     

替莫唑胺治疗胶质母细胞瘤的长期疗效评价

目的 以卡莫司汀(BCNU)为对照,观察替莫唑胺(TMZ)对胶质母细胞瘤化疗的疗效,并探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)的表达对胶质母细胞瘤预后的影响. 方法 天津市环湖医院神经外科自2004年1月至2009年1月使用化疗药物治疗胶质母细胞瘤患者283例,其中应用TMZ 97例(TMZ组),BCNU 186例(BCNU组),免疫组织化学染色检测手术切除的肿瘤组织中MGMT的表达,对患者进行随访并比较2组患者的生存率、客观有效率和并发症的发生. 结果 TMZ组患者累积生存率高于BCNU组,差异有统计学意义(x2=27.944,P=0.000);TMZ组、BCNU组患者的客观有效率分别是75.26％(73/97)和45.16％(84/186),差异有统计学意义(x2=24.753,P=0.000);与BCNU组比较,TMZ组白细胞减少症的发生率较低,差异有统计学意义(x2=15.681,P=0.000). 结论 TMZ治疗胶质母细胞瘤疗效较BCNU显著,副作用小,耐受性好,是一种理想的胶质母细胞瘤术后化疗药物.     

敲低miR221/222上调PUMA促进胶质母细胞瘤U251细胞凋亡的体内研究

目的 探讨敲低miR-221/222表达上调PUMA对U251人脑胶质母细胞瘤凋亡的影响及其机制. 方法 5周龄BALB/c裸鼠左侧鼷部皮下接种1 mm3移植胶质瘤瘤块建立裸鼠移植瘤模型,1周后接受治疗(转染无义序列组、反义miR-221/222共转染组分别瘤内注射无义对照序列、反义miR-221/222寡核苷酸,对照组注射等量溶剂,每组8只).治疗开始至28 d观察肿瘤的生长情况,观察期结束时取肿瘤组织HE染色检测病理学改变;荧光原位杂交(FISH)、实时定量PCR检测肿瘤组织miR-221、miR-222的表达;TUNEL染色检测肿瘤细胞凋亡,免疫组化染色、Western blotting检测肿瘤组织凋亡相关蛋白PUMA、bax和bcl-2、p53的表达. 结果 治疗后6～28 d反义miR-221/222共转染组移植瘤的体积明显低于对照组和转染无义序列组,差异有统计学意义(P＜0.05);与转染无义序列组及对照组比较,反义miR-221/222共转染组肿瘤组织miR-221、miR-222 mRNA的表达水平下降;HE染色显示反义miR-221/222共转染组肿瘤组织异型性减低,新生血管数减少;与对照组和转染无义序列组比较,反义miR-221/222共转染组肿瘤组织的凋亡指数较高,差异有统计学意义(P＜0.05);免疫组化染色检测显示与对照组和转染无义序列组比较,反义miR-221/222共转染组PUMA、bax表达阳性率较高,bcl-2表达阳性率较低,差异有统计学意义(P＜0.05); Western blotting检测显示与对照组和转染无义序列组比较,反义miR-221/222共转染组肿瘤组织PUMA和bax蛋白表达升高,bcl-2表达下降,而p53表达无明显变化. 结论 反义miR-221/222治疗可通过上调PUMA蛋白表达来诱导U251胶质瘤细胞凋亡.     

反义miR-221/222上调Cx43恢复人胶质瘤细胞系U251细胞间缝隙连接通讯的体外研究

目的 探讨反义miR-221/222上调缝隙连接蛋白43(Cx43)以恢复人胶质瘤细胞系U251细胞间缝隙连接通讯的作用机制.方法 脂质体共转染反义寡核苷酸(AS-miR-221/222),下调U251细胞miR-221和miR-222表达水平,采用Northern blotting法检测U251细胞miR-221和miR-222表达水平;虫荧光素酶活性分析并获得靶基因;Western blotting法和免疫荧光法检测U251细胞Cx43表达水平;划痕标记染料示踪技术检测细胞间缝隙连接通讯.结果 AS-miR-221/222组U251细胞miR-221(t=1312.152,P=0.000)和miR-222(t=1226.031,P=0.000)表达水平明显降低;荧光活性明显高于其他各组(均P=0.000),证实Cx43基因为miR-221和miR-222靶基因;Cx43表达水平亦明显升高,且高于无义序列组(t=735.768,P=0.000)和对照组(t=686.252,P=0.000).对照组和无义序列组U251细胞细胞间缝隙连接通讯缺失,罗氏黄仅传递划痕细胞边缘单列细胞;AS-miR-221/222组U251细胞细胞间缝隙连接通讯明显恢复,罗氏黄传递至划痕细胞邻近7～8列细胞.结论 反义miR-221/222可通过上调Cx43表达水平恢复人胶质瘤细胞系U251细胞间缝隙连接通讯.     

共抑制miR-221/222表达上调PUMA促进胶质瘤U251细胞凋亡的体外研究

目的 探讨反义miR-221/222上调PUMA表达促进人脑胶质母细胞瘤U251细胞凋亡及其机制.方法 脂质体共转染反义miR-221/222下调U251人脑胶质瘤细胞株miR-221、miR-222的表达.流式细胞术检测转染后U251细胞凋亡变化;Caspase 3/7活性检测转染后U251细胞中Caspase 3的活性;JC-1检测转染后U251细胞线粒体膜电位变化;免疫荧光检测Bax蛋白定位;Western blot分析凋亡相关蛋白的表达变化.结果 流式细胞术显示反义miR-221/222可增加U251细胞凋亡;Caspase 3/7活性检测显示反义miR-221/222可增加U251细胞Caspase 3活性;JC-1检测显示反义miR-221/222可增加U251细胞线粒体膜电位衰减;免疫荧光检测反义miR-221/222可促进Bax蛋白从胞质中向线粒体膜上转移;Western blot显示反义miR-221/222共转染组的PUMA、Caspase 3、Bax蛋白表达明显上调,bc1-2蛋白表达明显下调.结论 反义miR-221/222通过上调PUMA蛋白表达来增加胶质瘤细胞U251的凋亡.