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大鼠内皮抑素cDNA真核表达载体的构建及C6细胞上的分泌表达 总被引:1,自引:2,他引:1
目的构建分泌型大鼠内皮抑素(endostatin,endos)基因真核表达载体,并在C6细胞上获得表达。方法利用RT-PCR法从1日龄大鼠脑组织总RNA中扩增出endos基因,并将获得的基因重组入真核表达载体pBudCE4.1上。抽取经双酶切、PCR及测序鉴定后的重组子质粒,利用脂质体方法转染C6细胞,在Zeoc in抗性下筛选稳定表达endos的C6细胞克隆,W estern-b lot法检测阳性克隆子上清液中endos,免疫细胞化学鉴定endos在阳性克隆子上的定位,MTT法鉴定阳性克隆子分泌的endos的生物学活性,ELISA方法检测阳性克隆子上清液中的血管内皮细胞生长因子(VEGF)含量。结果从1日龄SD大鼠脑组织总RNA中扩增出endos基因,构建重组质粒endo-pBud,经酶切、PCR和测序鉴定,产物大小及基因序列与预期值相符。经抗性筛选的阳性克隆子可分泌具有生物学活性的endos,同时其VEGF表达下调。结论成功获得endos基因,构建endos重组质粒,并在C6细胞上获得分泌性表达。 相似文献
83.
目的探讨内皮抑素对胶质瘤病理特征的影响及分子药理学机制。方法利用经抗性筛选可表达内皮抑素的C6细胞裸鼠皮下注射制作胶质瘤模型,光镜和电镜观察其病理特征,ELISA法检测瘤组织中VEGF含量。结果转染有内皮抑素cDNA片段的C6胶质瘤组织中VEGF含量明显低于仅转染有空载体的C6胶质瘤组(P<0.01)。前者肿瘤边界清楚,瘤体未见明显的出血和囊性变,瘤体和瘤周均无明显的水肿;瘤组织内血管稀少,未见类微血管样结构;瘤体内可见大片不规则坏死,但坏死灶周和瘤周均无明显的血管反应,瘤周侵袭少见,可见凋亡瘤细胞;血管内皮细胞胞质内未见内VVO样结构,基板不连续,基底膜疏松。而仅转染有空载体的C6胶质瘤瘤周血管反应明显,瘤体和瘤周水肿严重,瘤细胞可侵袭瘤周组织,瘤内组织明显出血坏死,且可见瘤细胞形成类微血管样结构,血管内皮细胞胞质内VVO样结构较多,水肿越明显VVO样结构越多见,并与移植瘤组织中VEGF表达相一致,血管基板完整、连续,多数基质疏松,呈多层排列,外层可见少量胶原纤维。所观察的几种肿瘤中的微血管内皮细胞孔窗及血管周胶原纤维与转染的目的基因无明显的关系,且内皮细胞的凋亡均不明显。结论内皮抑素不会直接诱导胶质瘤组织内血管内皮细胞的凋亡,但可通过诱导VEGF的表达的下调而抑制瘤周血管反应和肿瘤新血管的生成。 相似文献
84.
目的用简易方法合成AdipostatinA。方法以3,5-二甲氧基溴苯为原料,经金属化、偶联、脱甲基化反应制得AdipostatinA。结果成功地合成了AdipostatinA,总收率为64%。目标化合物的结构经核磁共振氢谱及元素分析确证。结论本法合成步骤短,反应条件温和,收率较高。 相似文献
85.
对北京市部分医院检验科生化实验室的检验项目、检验仪器进行调查,为修订生化检验教学大纲、调整教学内容和改进实验方法提供重要依据,其主要目的 是使生化检验教学更加贴近临床实际,提高医学检验专业学生的实践能力和就业竞争力. 相似文献
86.
室间隔缺损封堵术后左心功能的超声评价 总被引:9,自引:0,他引:9
目的应用超声心动图评价Amplatzer封堵器治疗室间隔缺损(VSD)患者于封堵术前后左心功能的变化。方法观察28例VSD患者封堵术前、术后1个月和术后6个月左室舒张末期内径(EDD)、舒张末期容积(EDV)、收缩末期容积()ESV、每搏输出量()SV、射血分数()和短轴缩短率()大小及变化。结果封堵术后1个月较术前差异具有显著性意义,EDDEFFS(P<0.05),EDV(P<0.001)ESV(P<0.05)SV(P<0.001)EF,FS无明显变化;封堵术后6个月,6项指标均恢复正常,较,,,术前差异具有显著性意义(P<0.001)。结论超声引导下VSD封堵术能够有效的改善VSD患者的左心功能。 相似文献
87.
大多数的标本由护理人员采集,护士承担着从准备容器采集标本及送检这一重要环节。然而工作中常遇到因标本留取和处理不当而导致检验结果不正确或无法进行,延误诊断和治疗时间,给病人造成不必要的痛苦和经济损失。下面就工作中采集血液标本发现的问题进行总结。1严防溶血1.1抽血用的针头、注射器、试管等必须清洁干燥。1.2抽血前不应过分拍挤血管或扎止血带时间过长过多(因可使血液成分发生变化)。1.3一次穿刺不成功,应更换部位,并不得将2次抽得的血液注入同一试管。1.4抽血后取下针头沿试管壁缓慢注入,不可用力挤压,不可将血泡… 相似文献
88.
生理学教学中结合科学史知识,全面提高医学生素质 总被引:1,自引:1,他引:0
在大学的教学过程中,教师不但要传授学生必要的知识,还要培养学生发现问题、解决问题的能力,培养学生的科学精神和健全人格,实现素质教育。在生理学教学中将一些科学史引入课堂,不仅使学生更容易理解所学知识,而且还可以学习前辈们的科学精神并提高自己的科学素养;领悟科学家的思维过程,领会科学研究的一般方法,培养学生的探究能力,激发学生的学习兴趣,达到素质教育的目的。 相似文献
89.
90.