生物免疫刺激剂对大鼠外周血淋巴细胞和肝大颗粒淋巴细胞生物活性的影响

正常大鼠在体内应用干扰素（ＩＦＮα—２ｂ），卡介苗（ＢＣＧ）或二者联用后，检测外周血淋巴细胞转化率和酸性非特异性酯酶（ＡＮＡＥ）阳性淋巴细胞数量的变化。同时从正常大鼠肝内分离出大颗粒淋巴细胞（ＬＧＬ），体外分别受ＩＦＮα－２ｂ、ＢＣＧ或二者联合作用后，以３Ｈ－ＴｄＲ掺入实验测定生物免疫刺激剂（ＢＩＳ）对ＬＧＬ抗肝癌细胞作用的影响。结果：（１）单用ＩＦＮα－２ｂ对大鼠淋巴细胞母细胞化有一定的抑制作用，抑制率为２１．７％；单用ＢＣＧ使大鼠淋巴细胞转化率提高了２７．９％，二者联用则可消除ＩＦＮα－２ｂ对大鼠淋巴细胞母细胞化的抑制作用。（２）ＩＦＮα－２ｂ、ＢＣＧ或二者联用均使大鼠外周血ＡＮＡＥ阳性淋巴细胞显著增多，其中ＢＣＧ作用强于ＩＦＮα－２ｂ（Ｐ＜０．０１），以ＩＦＮα－２ｂ和ＢＣＧ二者联用的效果最强。（３）ＩＦＮα－２ｂ、ＢＣＧ均可显著增强大鼠肝ＬＧＬ的抑肝癌细胞增殖作用，ＢＣＧ作用较ＩＦＮα－２ｂ强，二者分别使肝ＬＧＬ抑肝癌细胞增殖作用提高了５０％和２２．４％，ＩＦＮα－２ｂ和ＢＣＧ协同作用的效果最强，使肝ＬＧＬ的抑肝癌细胞作用提高了６３％。实验结果为肝癌免疫治疗的最佳选择提供了充分的科学依据。     

靶向HOXA9基因shRNA慢病毒载体对U937细胞增殖与凋亡影响观察

目的：观察慢病毒介导的短发夹RNA（shorthairpinRNA,shRNA）沉默同源盒A9（homeoboxA9,HOXA9）基因对U937细胞增殖和凋亡的影响。方法：前期从4条针对HOXA9基因的RNA干扰（RNAinterference,RNAi）慢病毒载体中筛选出了l条敲减效率最高的包装成慢病毒H0xA9／GVll8RNAi—LV#2。实验分为对照组（control,CON）、阴性对照组（negativecontrol,NC）及敲减组（knockdown,KD）。HOXA9／GVll8RNAi-LV#2感染U937细胞5d后,FCM检测U937细胞感染效率,应用实时荧光定量PCR法检测HOXA9mRNA的沉默效率,蛋白质印迹法检测HOXA9蛋白的表达;MTT法和绘制细胞生长曲线检测细胞增殖抑制情况;FCM检测细胞凋亡及细胞周期;RT-PCR法检测细胞c-mycmRNA及p27mRNA表达情况。结果：慢病毒感染效率〉90％,KD组细胞中HOXA9mRNA的沉默效率〉55％,HOXA9蛋白的表达量明显减少,其中KD组相对表达水平达（0．223±0．024）,显著低于NC组（0．884±0．009）及CON组（0．891±0．013）,差异有统计学意义,F=1566．202,P〈0．001。MTT结果显示,KD组细胞的IR值为（40．469±1．756）％,明显高于NC组及CON组（F=1311．928,P〈0．001）,细胞生长曲线表明该组细胞生长速度减慢;FCM结果显示,KD组、NC组及CON组凋亡率分别为（26．762±2．245）％、（6．819±0．547）％和（6．113±0．349）％,KD组与NC组（q=25．501,P〈0．001）及CON组（q=26．418,P〈0．001）比较差异均有统计学意义,提示该载体显著增加细胞凋亡率;其细胞周期G0／G1期细胞比例较CON组及NC组明显增加,提示该载体使细胞周期阻滞于G0／G1期,F=27．769,P=0．001;RT-PCR结果表明,U937细胞KD组较CON组及NC组c-mycmRNA表达水平下降,p27mR—NA表达水平上升。结论：靶向HOXA9基因shRNA慢病毒载体能稳定沉默HOXA9表达,可显著抑制U937细胞增殖并促进其凋亡,同时可下调c-myc表达,上调p27表达,使细胞周期阻滞于G0／G1期。     

急性淋巴细胞白血病幸存患儿对麻疹、腮腺炎和风疹疫苗接种的体液免疫反应

目的:探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)幸存患儿加强接种疫苗前后血清中麻疹、腮腺炎、风疹抗体水平变化。方法:回顾性分析2014年1月～2018年12月我院收治的47例ALL存活患儿的临床资料,检测其血清中麻疹、腮腺炎、风疹IgG水平,比较不同临床特征ALL幸存患儿,麻疹-腮腺炎-风疹联合疫苗(MMR)加强免疫前后麻疹、腮腺炎、风疹抗体水平。结果:性别不同的ALL幸存患儿血清中麻疹、腮腺炎、风疹抗体阳性率差异无统计学意义(P0.05);年龄、从治疗结束至试验间隔时间不同的ALL幸存患儿血清中麻疹、腮腺炎、风疹抗体阳性率有显著差异(P0.05);加强免疫后麻疹抗体阳性率可提高腮腺炎抗体阳性率、风疹抗体阳性率显著(P0.05)。结论:MMR加强免疫麻疹、腮腺炎、风疹抗体阳性率均升高,建议加强MMR疫苗接种,尤其是年龄5岁及治疗结束后时间间隔5年的ALL幸存患儿。     

体位改进用于腹腔镜胃减容术中的价值

〔摘 要〕 目的：对体位改进在腹腔镜胃减容术中的应用价值进行探讨。方法：选取平顶山市第一人民医院 2018 年 1 月 至 2020 年 6 月收治的 48 例行腹腔镜胃减容术治疗患者作为研究对象，将其按照手术中体位摆放不同分成两组，各 24 例， 对两组患者的术后皮肤受压情况等进行观察比较。结果：两组比较，观察组患者的术后皮肤受压状况以及异常感觉表现、 围术期护理满意度等效果指标均优于对照组，差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。结论：体位改进在腹腔镜胃减容术中应 用效果显著，能够有效减轻和避免患者手术过程中皮神经损伤与压力性损伤等不良情况发生。     

Apolloon反义寡核苷酸对K562细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨Apollon反义寡核苷酸（antisense oligonucleotide,ASODN）对白血病细胞K562增殖及凋亡的影响。方法设计合成特异性的Apollon硫代磷酸ASODN及其对照错义寡核苷酸（missense oligonucleotide,MSODN）,脂质体介导转染K562细胞后,采用MTT法检测K562细胞增殖,Annexin V-FITC法检测细胞的凋亡。结果Apollon反义寡核苷酸对K562细胞的生长抑制呈浓度-时间依赖性。Apollon ASODN在终浓度为600 nmol/L作用K562细胞时,能明显抑制其增殖,K562细胞凋亡率显著增加（P<0.01）。结论Apollon 反义寡核苷酸可下调Apollon基因表达,有效抑制K562细胞的增殖,并促进K562细胞凋亡。     

黄芪注射液对U937细胞增殖与凋亡的影响及相关机制的探讨

目的 研究不同浓度黄芪注射液对白血病细胞株U937增殖、凋亡的影响,并初步探讨其相关分子机制。方法 白血病细胞株U937随机分为实验组（分别采用不同浓度黄芪注射液62.5、125、250、500、1 000 μg/mL处理 U937细胞）和对照组（不加黄芪注射液）。四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测各组细胞增殖能力,FITC-PI双染法流式细胞术检测各组细胞的凋亡,Hoechst33258染色后荧光显微镜下观察各组细胞形态学变化;U937细胞加入1 000 μg/mL黄芪注射液后0 h、12 h、24 h、48 h,采用RT-PCR法检测c-myc、p27 mRNA的表达。结果 与对照组相比,不同浓度黄芪注射液均能抑制U937细胞增殖,差异均具有统计学意义（P<0.05）;不同浓度黄芪注射液均能诱导U937细胞凋亡,较对照组显著增多（P<0.05）,黄芪注射液浓度为1 000 μg/mL时凋亡率可达（63±4）%;黄芪注射液作用于U937细胞,随时间延长,c-myc mRNA表达逐渐下降,p27 mRNA表达逐渐增强,差异均具有统计学意义（P<0.01）。结论 黄芪注射液体外可有效抑制白血病细胞株U937增殖,并诱导其凋亡,其相关分子机制可能与下调c-myc基因和上调p27基因表达有关。     

甲型H1N1流感合并川崎病1例

1临床资料患儿,男,11岁,30 kg,2009年12月初因“高热4 d,恶心、呕吐、腹部不适15 h”入院。患儿于4 d前始无明显诱因出现高热,体温最高达40·4℃,伴咳嗽、有痰,在当地门诊输液治疗3 d,具体不详,效果欠佳,仍有高热、咳嗽。15 h前出现腹部不适,恶心、呕吐4次,呈非喷射性,为胃内容物,量较多,饮食、睡眠差,大小便未见异常。入院查体:t40·1℃,P 135次/分,R 30次/分,BP 115·0/75·0 mmHg,神志清,精神差,急性热病容,全身皮肤黏膜未见黄染、皮疹及出血点,颈部可触及数个0·5 cm×0·5 cm大小肿大淋巴结,质软,活动可;眼睑无浮肿,巩膜无黄染,     

Apollon siRNA联合川芎嗪对白血病细胞增殖及凋亡的影响

目的 观察Apollon siRNA 靶向沉默Apollon 基因联合川芎嗪（TMP）对人慢性粒细胞白血病细胞株K562 增殖及凋亡的影响。方法 根据前期实验筛选出的干扰效果最佳的Apollon siRNA 片段,构建pGPHIGFP-Neo-Apollon 真核表达载体,并将构建成功的载体转染至K562 细胞。将实验分为细胞对照组（未行任何处理）、阴性对照组（转染阴性质粒载体）和RNA 干扰组（转染pGPHI-GFP-Neo-Apollon 质粒载体）,利用RT-PCR 法和细胞免疫荧光法分别检测各组细胞Apollon mRNA 及蛋白的表达情况;再于上述分组基础上新增TMP 组（施加320 μg/mL TMP）、TMP+ 阴性对照组和TMP+RNA 干扰组,应用MTT 法和流式细胞术分别检测各组K562 细胞的增殖能力和细胞凋亡率。结果 构建的pGPHI-GFP-Neo-Apollon 载体能在K562 细胞内稳定表达;RNA 干扰组Apollon mRNA 及其蛋白的相对表达水平明显低于细胞对照组和阴性对照组（均P<0.05）;RNA 干扰组K562细胞的增殖抑制率和凋亡率高于细胞对照组（P<0.05）,与RNA 干扰组及TMP 组比较,siRNA 转染联合TMP能显著提高K562 细胞的增殖抑制率和凋亡率（均P<0.05）。结论 Apollon siRNA 转染能显著抑制K562 细胞增殖并促进其凋亡,且与TMP 联合使用对提高K562 细胞的增殖抑制率和凋亡率具有显著协同作用,提示siRNA技术联合药物在白血病治疗中具有重要的潜在价值。     

RNA干扰HOXA9基因对人类急性单核细胞白血病U937细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨小干扰RNA（siRNA）沉默HOXA9基因对人类急性单核细胞白血病U937细胞株增殖、凋亡的影响。方法设计合成针对HOXA9的特异性siRNA寡核苷酸链,应用阳离子脂质体介导瞬时转染U937细胞。实验分为3组：实验组（脂质体转染靶向HOXA9的siRNA）、阴性对照组（脂质体转染阴性对照siRNA）和细胞对照组（仅加等量细胞及培养液）。利用反转录．聚合酶链反应法、Western blot法分别检测各组细胞HOXA9 mRNA、蛋白的表达;四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。结果转染靶向HOXA9的siRNA后,实验组、阴性对照组、细胞对照组mRNA相对表达水平分别为、（22.980±0．548）％、（82．371±1．517）％、（8d．637±2．252）％（P〈0．05）,蛋白相对表达水平分别为（50．377±2．773）％、（102．275±3．898）％、（107．510±3．905）％（P〈0．05）;siRNA转染后实验组U937细胞增殖明显受抑制且细胞凋亡率显著增高,24、48、72h增殖抑制率分别为（41．909±4．333）％、（54．470±3．756）％、（65．835±1．024）％,凋亡率为（26．800±2．081）％,与细胞对照组、阴性对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论靶向HOXA9的siRNA可有效沉默U937细胞HOXA9基因表达,明显抑制细胞的增殖并促进细胞凋亡,为临床白血病HOXA9基因靶向治疗提供了实验依据。     

新生儿化脓性脑膜炎62例临床分析

新生儿化脓性脑膜炎(简称新生儿化脑)是新生儿严重的急性感染性疾病.本病临床表现很不典型,颅内压增高征出现较晚,又常缺乏脑膜刺激征,早期诊断困难,死亡率高.所以早期诊断和正确治疗是关键.本文对我院2000年到2005年收治的62例新生儿化脑进行分析,现总结如下.