自噬在肿瘤形成及治疗中的作用

自噬在肿瘤发生和发展中的作用成为癌症研究领域的又一个热点。自噬在肿瘤细胞中具有双重作用：一方面能够清除肿瘤细胞内折叠异常的蛋白和功能异常的细胞器等,防止基因组损伤而抑制肿瘤的形成。另一方面,在自身营养缺乏和低氧或缺氧的环境中,肿瘤细胞又可利用自噬作用维持生命。开展自噬信号通路与肿瘤之间关系的研究,认识自噬在肿瘤中的确切作用和功能,对于正确指导癌症的治疗和预防具有重要意义。     

补阳还五汤联合骨髓间充质干细胞对大脑中动脉闭塞再灌注治疗的作用机制

背景：急性脑缺血时基质金属蛋白酶通过降解细胞外基质,破坏内皮细胞间的紧密连接而增加微血管的通透性,破坏血脑屏障,导致脑水肿的发生。 目的：旨在从基质金属蛋白酶及细胞外基质方面,探讨补阳还五汤联合骨髓间充质干细胞移植对脑缺血再灌注大鼠的治疗作用机制。 方法：将96只SD大鼠随机分为模型组,组织型基质金属蛋白酶抑制剂1组,组织型基质金属蛋白酶抑制剂1+骨髓间充质干细胞组(简称骨髓间充质干细胞组),组织型基质金属蛋白酶抑制剂1+补阳还五汤联合骨髓间充质干细胞组(简称联合组,分12,24,36,48 h 4个亚组)。构建大鼠脑缺血再灌注模型,在立体定位仪下采用微量进样器脑部给予基质金属酶抑制剂及培养的骨髓间充质干细胞;联合组术前7 d开始给予补阳还五汤(10 mL/kg)灌胃,其余各组给予等剂量的生理盐水。给药10 d后采集实验动物血清和脑组织,采用ELISA 法测定血清中基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9水平,明胶酶谱法分析脑组织基质金属蛋白酶9活性。 结果与结论：与模型组相比,各组血清基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9水平和脑组织基质金属蛋白酶9的活性均有不同程度的下降,其中基质金属蛋白酶9下降明显(P < 0.05);与骨髓间充质干细胞组相比,联合组36 h和联合组48 h血清基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9水平和脑组织基质金属蛋白酶9、基质金属蛋白酶9前体活性下降最为明显(P < 0.01)。结果表明补阳还五汤联合骨髓间充质干细胞可与组织型基质金属蛋白酶抑制剂1协同作用,从而抑制因基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9所致的细胞外基质降解,修复受损的血脑屏障及防治缺血后脑水肿的形成。中国组织工程研究杂志出版内容重点： 干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

中医药防治阿尔茨海默病与Wnt/β-catenin信号通路作用研究述评

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种中枢神经系统退行性疾病,以记忆力减退和认知障碍为主要表现。经典Wnt信号通路是重要的信号转导通路之一,调节多种靶基因的转录、翻译,参与中枢神经系统发育的过程。Wnt/β-catenin信号通路参与多种神经系统发育过程的调节,包括突触发生及功能形态变化,神经细胞的增值分化等。Wnt/β-catenin信号通路在AD发生机制中起到非常重要的作用。近年来研究发现,中医药对Wnt/β-catenin信号通路具有调节作用,中医药具有多成分、多靶点的优势,多种中药及复方、单体具有保护神经血管单元的作用,主要是通过调节Wnt/β-catenin信号通路中的关键信号分子Wnt3a、Axin2、GSK-3β、Wnt7b、β-catenin、TCF4、Fiz9等蛋白的表达发挥作用。这对探讨AD的发病机制及中医药防治的作用机制提供理论基础。     

六味地黄丸通过Nrf2/HO-1通路抗氧化应激防治阿尔茨海默病的机制研究

目的 观察六味地黄丸通过Nrf2/HO-1通路对H₂O₂诱导海马神经元细胞(HT22)氧化损伤的保护作用,探讨其防治阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)的作用机制。方法 (1)以过氧化氢(Hydrogen peroxide,H₂O₂)诱导HT22细胞,通过噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性,DCFH-DA荧光染色法检测细胞内ROS含量,构建基于氧化应激损伤的早期AD细胞模型;(2)制备六味地黄丸含药血清(Medicated Serum of Liuwei Dihuang Pill,MSLDP),分别设置空白组、模型组、MSLDP组,检测细胞内SOD活力、MDA及ROS含量的变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)及蛋白免疫印迹(Western blot)法检测细胞内Nrf2、HO-1及NQO1等因子的mRNA的转录水平及蛋白表达量的变化;(3)采用Nrf2的抑制剂(ML385)抑制细胞内Nrf2的激活,RT-qPCR及Western blot法检测各组细胞内Nrf2、H...     

六味地黄丸通过PI3K/Akt/FoxO3a通路调控自噬对SAMP8小鼠记忆功能的影响

目的 探讨六味地黄丸通过磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/叉头框转录因子O3a（FoxO3a）通路调控自噬对快速老化小鼠8型（SAMP8）小鼠记忆功能的影响。方法 6月龄SPF级抗快速老化亚系小鼠（SAMR1）雄性小鼠6只设为正常组，6月龄SPF级SAMP8雄性小鼠24只随机均分为模型组、多奈哌齐组（0.747 mg·kg^-1）、六味地黄丸高、低剂量组（2.700、1.350 g·kg^-1），灌胃给药2个月。Morris水迷宫法检测各组小鼠学习和记忆能力；尼氏染色观察小鼠皮层、海马神经元；免疫组化（IHC）检测皮层、海马微管相关蛋白1轻链3B（LC3B）阳性表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组小鼠皮层自噬关键分子酵母ATG6同系物（Beclin1）、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、自噬相关基因5（ATG5）、胱天蛋白酶-3（Caspase-3）、Caspase-9、Akt、p-Akt、FoxO3a、p-FoxO3a的蛋白表达水平。结果 与正常组小鼠比较，模型组小鼠逃避潜伏期明显延长（P<0.05，P<0.01），穿越平台次数、目标象限停留时间显著减少（P<0.01）；皮层、海马神经细胞数量明显减少、体积缩小，分布疏散，LC3B阳性表达显著增多（P<0.01）；皮层Beclin1、ATG5表达显著升高（P<0.01），Bcl-2表达水平降低（P<0.01），Caspase-3、Caspase-9表达水平显著升高（P<0.01），p-Akt/Akt、p-FoxO3a/FoxO3a表达水平显著降低（P<0.01）。与模型组比较，多奈哌齐组及六味地黄丸高、低剂量组小，3 d逃避潜伏期明显缩短（P<0.05，P<0.01）；穿越平台次数显著增加（P<0.01）；目标象限停留时间显著增加（P<0.01）；多奈哌齐组皮层海马神经元神经细胞数量增多，六味地黄丸高、低剂量组小鼠神经元数目及尼氏体明显增加且分布致密，细胞损伤程度较低；多奈哌齐组及六味地黄丸高、低剂量组皮层、海马LC3B阳性表达显著降低（P<0.01）；六味地黄丸高、低剂量组Beclin1表达显著降低（P<0.01），多奈哌齐组和六味地黄丸低剂量组ATG5表达显著降低（P<0.01），多奈哌齐组及六味地黄丸高、低剂量组皮层Bcl-2表达水平显著升高（P<0.01），Caspase-3表达水平显著降低（P<0.01），Caspase-9表达明显降低（P<0.05，P<0.01），p-Akt/Akt、p-FoxO3a/FoxO3a表达水平显著升高（P<0.01）。结论 六味地黄丸有效改善了快速老化SAMP8 AD模型小鼠的学习记忆能力，保护神经元，其机制可能与调控PI3K/Akt/FoxO3a信号通路，下调自噬相关因子ATG5、Beclin1和LC3B表达和减少凋亡有关。     

高校线上教学模式的比较分析与应用探索

在当前疫情防控常态化背景下，线上教学作为一种新的授课模式，已经成为高等教育教学的主流。教学质量的提高，离不开科学的线上教学，与传统的线下授课相比，线上教学既有优势又有不足。文章就线上教学的几种模式进行比较分析，并提出相应建议，以有效提高线上教育教学质量。     

高脂血症对脑缺血大鼠血管调节因子的影响

目的　比较高脂血症条件下复合脑缺血大鼠模型在缺血不同时间血管内皮细胞功能及血管调节因子的变化特点，分析高血脂因素对脑缺血性损伤的影响。方法　实验动物随机分为正常组、高脂血症组、假手术组、高脂假手术组、单纯脑缺血组、复合脑缺血组，高脂饲料喂养大鼠，制备高脂血症大鼠模型线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血模型（MCAO）。分别在缺血3天、7天取材，用酶联免疫法（ELISA）检测血清中血管性血友病因子（vWF）、一氧化氮（NO）、内皮素1（ET-1）、6-酮-前列腺F1a（6-keto-FGF1α）（前列环素PGI2　的代谢产物）、血栓素B2（TXB2）（血栓素TXA2的代谢物）的含量。结果　与相应假手术组相比较，复合脑缺血组和单纯脑缺血组中vWF和TXB2因子在脑缺血模型各时间点血清含量呈增多趋势；vWF在单纯脑缺血7天和复合脑缺血3　天血清含量均增多，具有统计学意义（P<0.05）；而ET-1的含量无明显变化（P>0.05）；TXB2单纯脑缺血3天和7天血清含量均增多，具有统计学意义（P<0.05），而在复合脑缺血的血清中含量无明显变化（P>0.05）；NO、6-keto-FGF1α在缺血3天、7天血清含量均高于相应的假手术组，差异具有统计学意义（P<0.05）。复合脑缺血组与单纯脑缺血组组间比较，vWF复合脑缺血组在缺血3天、7天血清含量均增多（P<0.05）；ET-1的含量无显著性变化（P>0.　05）；TXB2复合脑缺血组血清含量减少，缺血3天、7天含量均明显增加（P<0.05）；NO、6-keto-FGF1α复合脑缺血组在缺血3天、7天血清含量均减少，但在缺血3天组间比较无明显变化（P>0.05），缺血7天组间明显增加（P<0.05）。结论　高脂血症条件下，血管调节因子在缺血不同时期既有累积现象，又有特异性的表达，可能在脑缺血恢复期有助于损伤的修复。     

高脂血症合并脑缺血对模型大鼠炎症因子的影响

目的:比较复合脑缺血模型和单纯脑缺血模型在不同时间炎症反应变化,分析高脂血症炎症因素对缺血脑组织的影响.方法:动物随机分为正常组、高脂对照组、假手术组、高脂假手术组、单纯缺血组和复合缺血组.取材时间是模型组脑缺血手术后3d和7d.采用高脂饲料饲养大鼠,复制经典的高脂血症动物模型,检测大鼠血清中血脂的含量以确定模型成功;复制大脑中动脉缺血模型,观察大鼠脑部缺血损伤情况.采用线栓法复制大鼠大脑中动脉缺血模型,观察大鼠脑部缺血损伤情况.用酶联免疫法(ELISA)检测血清中单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF-α)T、C-反应蛋白(creactive protein,CRP)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的水平.结果:MCP-1,TNF-α和CRP在复合脑缺血组和单纯脑缺血组与相应假手术组组内比较,脑缺血组在缺血3,7d血清含量均多于相应的假手术组,差异显著(P＜0.05);复合脑缺血组与单纯脑缺血组组间比较,MCP-1,TNF-α在复合脑缺血组在缺血3,7d血清含量均增多,差异显著(P ＜0.05);CRP在复合脑缺血组织3d血清含量均增多(P＜0.05),缺血7d血清含量均降低(P＜0.05).SOD在复合脑缺血组和单纯脑缺血组与相应假手术组组内比较,脑缺血组在缺血3,7d活性均降低,差异显著(P＜0.05);复合脑缺血组与单纯脑缺血组组间比较,复合脑缺血组在缺血3d活性降低,差异显著(P＜0.05).结论:高脂血症条件下,炎症因子在缺血不同时期既有累积现象,又有特异性的表达,这可能在脑缺血恢复期有助于损伤的修复.     

阿尔茨海默病炎症机制研究进展

Aβ蛋白沉积是阿尔茨海默病（ AD）病理过程的起始环节,Aβ蛋白可以诱发包括神经胶质细胞增生、炎症细胞和细胞因子激活在内的一系列炎症反应,从而促使神经细胞的死亡或加速死亡,而神经细胞的死亡又可以成为新的促炎症反应刺激因素,使 AD患者大脑内的炎症反应不断延续和增强,病灶不断扩展。因此,减少Aβ蛋白的生成,抑制炎症反应的发生,可能为AD 的防治开辟新的途径。