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71.
SARS冠状病毒N蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 制备SARS冠状病毒(SARS-CoV)N蛋白特异性单克隆抗体(McAb),为SARS的快速诊断及致病机制的研究提供实验材料。方法 用纯化的重组SARS-CoVN蛋白免疫BALB/c小鼠,经细胞融合和亚克隆后获得分泌针对N蛋白的杂交瘤细胞株,用Western blot和间接免疫荧光法检测这些细胞株分泌的单克隆抗体特异性,并将N蛋白分3段表达初步定位单克隆抗体识别表位所在区域。结果 通过细胞融合和3轮克隆化,筛选出分泌抗N蛋白的6个杂交瘤细胞株。Western blot及免疫荧光显示,获得的McAb可与SARS-CoVN蛋白及SARS-CoV发生特异性反应,有4个细胞株分泌的抗体的识别位点位于N蛋白N端,2个位于C端。结论 获得了SARS-CoV特异性单克隆抗体并进行了初步定位,可用于SARS的早期诊断及致病机制研究。 相似文献
72.
明胶-聚乳酸载药纳米微球的制备及其体外释药研究 总被引:21,自引:0,他引:21
采用复合乳液—溶剂挥发法制得明胶—聚乳酸载五氟脲嘧啶(5—Fu)微球,以混合型乳化剂Tween—80:Span—80=5:1—作为初乳乳化剂,O—羧甲基壳聚糖作为复乳乳化剂,考察了明胶—聚乳酸载药微球的制备条件对微球的成球性、药物包封率及体外释药的影响。结果表明乳化剂的选择、内部水相药物浓度和PLA分子量等均对载药微球的结构与性能产生影响,经优化条件得到了成球性和体外释放都比较好的载药微球。 相似文献
73.
215例急性和亚急性重型肝炎临床特征对比性分析 总被引:7,自引:0,他引:7
目的进一步了解急性重型和亚急性重型肝炎(简称急重和亚急重)患者的临床特征,以及它们之间的异同。方法收集和整理215例急重和亚急重住院患者的临床资料,使用X^2检验、t检验、回归分析等方法进行相关的统计学分析。结果①乙型肝炎病毒感染仍是急重和亚急重型肝炎的主要病因,均占30%以上。抗结核药物是药物性急重和亚急重肝炎的首要原因;②急重和亚急重患者肝性脑病发生率分别为78.13%和43.05%,差异有统计学意义(P〈0.001);③急重患者的平均凝血酶原活动度低于20%,而亚急重患者平均凝血酶原活动度低于30%;④急重患者发生率前三位的并发症分别为肝性脑病、电解质紊乱及脑水肿;而亚急重则分别为腹水、电解质紊乱及肝性脑病;⑤急重和亚急重患者的病死率与病情最重时PT、WBC及中性粒细胞比例均呈正相关,而与PTA、TC均呈负相关;亚急重还与病情最重时TB、BLA及CRE呈正相关,与CHE、TG、PLT、ALB呈负相关。结论①急重和亚急重患者无论在好发年龄、肝性脑病发生率、肝性脑病出现时间,还是在凝血功能异常、预后与实验室指标等方面差异较大,属两个独立的疾病;②对于无肝性脑病的急重和亚急重患者,严重的凝血功能异常是一个重要的灵敏和特异性指标。 相似文献
74.
75.
76.
目的 探讨横纹肌肉瘤(RMS)基因组DNA的变化特征.方法 在一步法RT-PCR检测所有标本PAX3/PAX7-FKHR mRNA融合基因表达情况的基础上,应用比较基因组杂交技术分析25例原发性RMS患者,其中腺泡状横纹肌肉瘤(ARMS)10例,胚胎性横纹肌肉瘤(ERMS)12例,多形性横纹肌肉瘤(PRMS)3例.根据融合基因表达情况、组织学分型、临床分期、组织学分级、性别和年龄进行分组比较.同时收集RMS细胞株A204(腺泡型)、RD(胚胎型)作为对照.结果 25例RMSCGH分析结果显示:(1)RMS中发生DNA拷贝数扩增最常见的部位是2p和12q,其他依次为6p、9q、10q、1p、2q、6q、8q、15q和18q(30%),发生DNA拷贝数丢失最常见的部位是3p、11P和6p(30%).(2)ARMS扩增最常见的染色体臂是12q、2p、6、2q、4q、10q和15q(30%),缺失最常见的染色体臂是3p、6p、1q、5q(30%);ERMS扩增最常见的染色体臂是7p、9q、2p、18q和1 p、8q(30%),缺失最常见的染色体臂是11p.基因组变化在不同的组织学分类中差异无统计学意义(P0.05).(3)伴有融合基因组扩增最常见的染色体臂是12q、2、6、10q、4q和15q(30%),缺失最常见的染色体臂是3 p、6p、5q(30%);不伴有融合基因组扩增最常见的染色体臂是2p、9q、18q(30%),基因组缺失最常见的染色体臂是11p和14q(30%).12q扩增在这两组间的差异有统计学意义(P<0.05),并多见于伴有融合基因的RMS.(4)在临床分期分组中,9q扩增在Ⅱ期和Ⅲ~Ⅳ期间差异有统计学意义(P<0.05),且多见于Ⅱ期患者.结论 (1)2p、12q、6p、9q、10q、lp、2q、6q、8q、15q、18q扩增及3p、11p、6p缺失可能与RMS发病相关;(2)12q扩增可能与融合基因相关;(3)9q扩增可能与RMS发病早期有关. 相似文献
77.
RNAi沉默HMGA1基因对肝癌细胞凋亡和细胞周期的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:筛选HMGA1基因沉默稳定转染肝癌细胞株,检测沉默后肿瘤细胞凋亡、周期和增殖的变化。方法:靶向HMGA1的RNAi载体转染肝癌细胞,G418筛选得到稳定转染细胞株并鉴定;MTT法和FACS检测细胞增殖、凋亡及细胞周期。结果:成功建立基因沉默HMGA1稳定细胞株;HMGA1基因沉默后,细胞凋亡百分率(29.46±3.04%)明显高于质粒对照组和空白对照组(1.96±0.76%和2.04±0.70%,P<0.01);G0-G1期细胞百分率(75.21±2.35%)明显高于质粒对照组和空白对照组(37.98±3.02%和39.23±3.63%,P<0.01),G2-S期(24.79±2.35%)显著低于质粒对照组和空白对照组(62.03±3.01%和60.77±3.63%,P<0.01);MTT检测显示,HMGA1沉默细胞增殖与质粒对照组和空白对照组相比显著降低(P<0.01或0.05)。结论:基因沉默HMGA1可促进肿瘤细胞凋亡,抑制细胞增殖。 相似文献
78.
目的 探讨HLAⅠ、Ⅱ类基因多态性与肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndmme,HFRS)患者临床特征的相关性。方法 应用PCR-SSO(polymerase chain reaction using sequencespecific oligonucleotides)基因分型技术对中国北方地区56例汉族HFRS患者HLAⅠ、Ⅱ类基因频率分布进行了检测。结果 HFRS重型组HLA-B35携带率为20%,HLA-B62及HLA-DR11携带率皆为15%.与轻型组比较差异皆具有统计学意义(P〈0.05)。结论 HLAⅠ类基因中HLA-B35、HL4-B62及HLAⅡ类基因中HLA-DR11与中国北方地区汉族人群HFRS患者病情严重性密切相关。 相似文献
79.
80.
Yan Chang LEI Yong Wen HE Chun Xia GUO Department of Infectious Disease Union Hospital Tongji Medical College Huazhong University of Science Technology Wuhan P. R. China . 《中华微生物学和免疫学杂志(英文版)》2006,4(3):222-230
To clarify the role of APOBEC3G (A3G) in cellular defense against hepatitis B virus ( HBV), the expression of A3G in normal human liver and the regulation of the A3G expression in hep-atoma cell line (HuH-7) were investigated. Expression level of APOBEC3s mRNA in human liver was determined by RT-PCR. HuH-7 and HepG2 cells were treated with various concentrations of IFN-α(0 U/ml, 100 U/ml, 500 U/ml, 1000 U/ml)for 12 h. The mRNA levels were measured by a quantitative RT-PCR, the results were normalized relative to the specimens without IFN-αstimulation. Total protein of HuH-7 cells treated with various concentrations of IFN-αfor 48 h was subjected to Western blot analysis. For reporter gene assay, HuH-7 cells were transfected with the reporter plasmids containing IRF-E sites and its mutants with different lengths. Then the cells were treated with or without 1200 U/ml IFN-a for additional 12 h (1000 U/ml) after 24 h of transfection, and the cell lysate was prepared and assayed for luciferase activity. It was found that normal human liver expressed the mRNA of A3G. A3G mRNA expression in HuH-7 and HepG2 cells were up-regulated by IFN-αstimulation in a dose-depen-dent manner. Western blot analysis indicated that A3G protein expression was also enhanced by IFN-αstimulation. Sequence analysis showed the existence of putative sites of IFN regulatory factor element (IRF-E) in 5' region of A3G gene upstream the initiation codon. IFN-αstimulation results in 6- to 8-fold increase in luciferase activity in cells transfected with the plasmid containing IRF-E sites of the 5' upstream sequences, whereas luciferase activity did not change in cells transfected with the plasmid containing mutant IRF-E sites or without IRF-E sites. As a conclusion, A3G are expressed in normal human liver. A3G expression was up-regulated by IFN-αstimulation in hepatoma cells and could be involved in host defense mechanisms against HBV. ERF-E site in 5' region of AP0BEC3G gene upstream the initiation codon plays an important role in this process. 相似文献