小鼠胚胎干细胞来源平滑肌细胞的鉴定及其功能分析

背景：胚胎干细胞来源的平滑肌细胞是血管组织工程潜在的细胞来源之一,但这些细胞是否具有成熟平滑肌细胞的表型和功能仍不清楚。 目的：对小鼠胚胎干细胞分化的平滑肌细胞进行表型鉴定及功能分析。 设计、时间及地点：细胞学体外观察,于2007-05/2008-12在解放军沈阳军区总医院全军心血管病研究所完成。 材料：清洁级孕12.5 d昆明小鼠1只用于制备饲养层细胞,SD大鼠1只用于制备主动脉平滑肌细胞。小鼠胚胎干细胞系R1、小鼠微血管内皮细胞系由美国ATCC公司提供,转染pSPIE载体的胚胎干细胞R1由本实验室制备。 方法：①诱导分化及筛选：用转染pSPIE载体的胚胎干细胞R1制备拟胚体,拟胚体悬浮培养5 d后贴壁培养1 d,第7天加入全反维甲酸诱导分化4 d,第 11天用10 mg/L嘌呤霉素对诱导分化后的细胞筛选2 d。②表型鉴定：对筛选到的平滑肌细胞进行SM α-actin、SM22α、SM-MHC免疫荧光染色,以大鼠原代主动脉平滑肌细胞、未经筛选的第10天分化细胞作为对照,进行Western Blot分析。③收缩功能：10-5 mol/L卡巴可处理筛选到的平滑肌细胞 30 min。④体外成血管功能：将等量的内皮细胞和筛选到的平滑肌细胞混合,在Matrigel上培养。 主要观察指标：平滑肌细胞标志物的表达,平滑肌细胞的收缩,平滑肌细胞向内皮管腔样结构的募集。 结果：分化的平滑肌细胞主要分布于贴壁生长的拟胚体的外周部位,胚胎干细胞来源的平滑肌细胞3种标志物SM α-actin、SM22α、SM-MHC免疫荧光染色均呈阳性表达,Western Blot结果显示其SM α-actin、SM22α表达水平与大鼠原代主动脉平滑肌细胞相似,高于未经筛选的第10天分化细胞。筛选到的平滑肌细胞在10-5 mol/L卡巴可刺激下出现明显收缩,且能够募集到内皮管腔样结构周围。 结论：小鼠胚胎干细胞来源的平滑肌细胞具有与成熟平滑肌细胞相似的表型和功能。     

鼻中隔黏膜瓣重建鼻咽部放疗后坏死有效率的Meta分析

目的 系统评价鼻咽癌患者应用鼻中隔黏膜瓣重建鼻咽部放疗后坏死(PRNN)清创术后鼻咽部缺损的有效性。方法 应用计算机检索Pubmed、Cochrane Library、Embase、Web of Science等英文数据库,以及中国知网(CNKI)、万方(WANFANG)、维普(VIP)等中文数据库,检索时间为自数据库建立至2021年2月1日,检索鼻中隔黏膜瓣修复PRNN术后鼻咽部缺损的临床研究。由两位研究者独立筛选文献、提取资料后,应用RStuido软件进行效应量分析。结局指标为鼻中隔黏膜瓣重建鼻咽部缺损的有效率。此外,搜索并分析仅以鼻咽坏死组织清创治疗PRNN的研究作为参考。结果 初次检索获得文献1005篇,根据纳入及排除标准,最终纳入5篇单臂回顾性研究,共145例患者,鼻中隔黏膜瓣重建鼻咽部缺损成功率为84%(95%CI=[0.72,0.96],I²=74%)。同时,检索到9篇仅以鼻咽坏死组织清创治疗PRNN的研究,其上皮化率为47%(95%CI=[0.31,0.62],I²=94%)。结论 鼻中隔黏膜瓣作为有效的修补材料,可用于PRNN清创手术中鼻咽部缺损的重建,需要更多的前瞻性队列研究或随机对照试验以进一步研究。     

125Ⅰ标记的FLt4多抗导向定位淋巴结的可行性分析及其代谢动力学研究

探讨125Ⅰ标记的Flt4多抗(125Ⅰ-Flt4 PcAb)导向定位淋巴结的可行性及其在体内的代谢动力学特点,为应用Flt4 PcAb进行前哨淋巴结(sentinel lymph node,SLN)的检测提供实验依据.应用氯胺T法对Flt4 PcAb进行125Ⅰ标记;125Ⅰ-Flt4 PcAb经大鼠足背皮下注射,研究125Ⅰ-Flt4 PcAb在淋巴结内浓集及其在体内的代谢动力学特点.结果表明125Ⅰ-Fit4 PcAb经皮下注射后,在胭窝淋巴结的ID(%)/mg值最高,血液次之,其它各组织器官均很小;胭窝淋巴结的ID(%)/mg值在注射后0.5h达最高,血液32h达最高;其在体内的代谢可进行二室动力学模型拟合,吸收相半衰期(T1/2Ka)为0.64±0.1d,清除相半衰期(T1/2β)为3.5±0.5d.这提示125Ⅰ-Flt4PcAb能够对淋巴结进行导向定位;它在体内的代谢符合二室动力学模型,清除相半衰期较长.     

两腔心及合并畸形的彩色多普勒超声心动图特征研究

Objective To probe into the color Doppler echocardiographic characteristics of bilocular heart (BH) and associated malformations. Methods Twenty patients of BH were examined with color Doppler echocardiography (CDE) and the characteristics were observed. All the CDE results were compared with angiocardiography and 14 were confirmed by operation. Results Nineteen cases were properly diagnosed based on the CDE characteristics,1 case were misdiagnosed as mitral atresia. CDE characteristics of BH were obvious:① Apical four-chamber view of two-dimensional echocardiography (2DE) showed total echo dropout in both the interatrial septum and the interventricular septum and disappearance of the intracardiac "cross". The common atrioventricular valve closed during systole and appeared as figure "8", named 2DE "8" sign. During diastole, the common atrioventricular valve opened to a common ventricle. ② Color Doppler flow imaging (CDFI) showed common intra-atrial flow signal entereda common ventricle through common atrioventricular valve during diastole in all patients and colorful reflux through common atrioventricular valve during systole in 15 cases. ③ Among the 20 eases, 16 of the common atria were situs solitus,4 were situs inversus; 10 of the common ventricles were type A,2 were type B and 8 were type C. According to the spatial relationship of the great arteries,there were 4 type Ⅰ ,7 type Ⅱ and 9 type Ⅲ.There were 18 pulmonary stenosis and 2 pulmonary hypertension. ④ In the presence of pulmonary stenosis, CDFI showed colorful shunt signals through pulmonary artery during systole. Conclusions BH and associated malformations have obvious echocardiographic characteristics. CDE has a specific value in diagnosing BH and associated malformations.     

鼻内镜下选择性翼管神经切断术对伴有变应性鼻炎的慢性鼻窦炎的疗效观察

目的 探讨鼻内镜下选择性翼管神经切断术治疗伴有中重度变应性鼻炎的慢性鼻窦炎的临床效果。 方法 选择2015年9月至2016年9月在首都医科大学宣武医院就诊的伴有中重度持续性变应性鼻炎(AR)的慢性鼻窦炎鼻息肉的患者132例。所有患者分为两组,对照组62例采取常规手术方法治疗慢性鼻-鼻窦炎,变应性鼻炎选择保守治疗。观察组70例患者在常规手术基础上行选择性翼管神经切断术,包括鼻后神经切断术和翼管神经咽支的切断。应用视觉模拟量表(VAS)、Lund-Kennedy内镜黏膜形态评分、Lund-Mackay鼻窦CT扫描病变范围评分来对术后随访资料收集分析评估,对患者治疗前和治疗结束后随访情况做自身对比,记录治疗前,手术后6个月、1年、2年的数据。 结果 随访2年,对研究终止时随访成功且临床资料完整的106例病例进行分析,观察组56例,对照组50例。观察组病例治疗前VAS评分为(7.6±2.2)分,治疗后6个月VAS评分为(2.3±1.2)分,治疗后1年VAS评分为(2.6±1.7)分,治疗后2年VAS评分为(2.8±1.8)分,与治疗前比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。观察组采用选择性翼管神经切断术治疗伴有中重度变应性鼻炎的慢性鼻窦炎总的有效率94.6%(53/56)。与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.01)。通过对并发症的统计分析发现观察组未发生泪液分泌障碍、萎缩性鼻炎等并发症。其并发症的发生与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。将术后2年观察组的疗效评估结果与手术前过敏原检测结果进行相关性分析,显示手术疗效与过敏的严重程度并无明确相关性(P>0.05)。 结论 鼻内镜下选择性翼管神经切断术是治疗伴有中重度持续性变应性鼻炎的慢性鼻窦炎的安全、有效的手段。     

推拿疗法治疗小儿泄泻的临床疗效观察

观察椎拿治疗小儿泄泻的临床疗效，50例患儿得经过椎拿治疗后，总有效率为96％。其中显效占86％，有效占10％，无效占4％。椎拿疗法能促使脾胃等消化器官的兴奋性提高，增强消化吸收功能，尤其对小肠的吸收功能有一定的提高，以及能增加机体免疫力，从而起到健脾止泻的作用。     

纳洛酮对海马神经元的预防保护作用

目的为观察缺氧对大鼠海马神经元的影响及纳络酮的保护作用。方法采用细胞培养方法获取10～14d的海马神经元,将含药血清加入到培养液中,4h后建立95%N2＋5%CO2混合气体急性缺氧模型,胎盘兰染色细胞计数并做流式细胞仪检测以及酶法测定抗氧化酶（超氧化物歧化酶）的抗氧化能力及丙二醛、NO的含量。结果离体条件下纳络酮可显著增强海马神经元的活性,降低其凋亡率及死亡率;提高细胞上清夜中超氧化物歧化酶的活性,降低丙二醛及NO的含量,且成量效比例关系。结论纳络酮在体外有抗缺氧损伤的作用。其作用机制可能是通过抑制细胞凋亡,提高抗氧化酶的活力,清除自由基,而发挥作用。     

粘质沙雷氏菌最适培养条件筛选

目的:通过对粘质沙雷氏菌最适宜培养条件的筛选,进一步指导灵杆菌素生产提高收率和质量。方法:以发酵液吸光度和菌体干重作为发酵的评价指标,通过单因素和多因素试验的方法学手段,对粘质沙雷氏菌发酵过程中各种营养因素影响进行考察。结果:培养基各种组分对粘质沙雷氏菌发酵培养过程影响显著,碳源、氮源和生长因子影响较为明显。结论:最佳培养基配比为:葡萄螗0.8%、蛋白胨0.8%、氯化钠0.6%、KH_2PO_40.4%、K_2HPO_4 0.1%、酵母膏0.6%。     

经阴道穿刺卵巢巧克力囊肿注入乙醇的疗效及血清CA-125观察

目的探讨经阴道穿刺卵巢巧克力囊肿的疗效.方法对72例卵巢子宫内膜异位囊肿的患者行阴道超声下的穿刺及99.9%乙醇固定术,观察术中、术后及至术后2年的临床过程.并对血中CA-125浓度进行动态测定.结果术后长短期疗效无显著差异.结论此方法治疗卵巢巧克力囊肿操作简便、安全有效.     

切开复位治疗髁状突骨折

目的：探讨髁状突骨折手术治疗的途径和可行性。方法：采用耳屏前入路或耳屏与颌下联合入路进行髁状突的复位、固定及关节囊的修复。结果：本组16例共20经术后平均4个月的随访,面部形态在本对称,张口度正常,无关节紊乱及面神经功能障碍,结论：关节囊外移位性髁状突突骨折采用切开复位坚固内固定方法治疗。可取得满意的临床疗效。