肠出血型大肠埃希菌O104:H4转运蛋白AatA单克隆抗体制备及鉴定

目的 表达肠出血型大肠埃希菌O104 :H4的融合蛋白GST-AatA,获得单克隆抗体。方法 人工合成肠出血型大肠埃希菌O104 :H4的转运蛋白基因aatA,连接至pMDl8-T载体,转化E.coli DH5α,双酶切回收,构建原核表达质粒PGEX-6P-1-GST-AatA,测序鉴定后,转化E.Coli BL21,IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western Blot分析目的蛋白的表达并纯化该重组蛋白。将纯化后的融合蛋白GST-AatA免疫Balb/c小鼠,制备相应单克隆抗体;并对该单克隆抗体的纯度、亚型、效价、特异性进行鉴定和分析。结果 构建的原核表达载体PGEX-6P-1-GST-AatA能表达融合蛋白GST-AatA;亲和层析纯化后融合蛋白GST-AatA纯度达到95 %,免疫小鼠后得到相应特异性单克隆抗体。结论 成功制备出一株抗转运蛋白AatA的单克隆抗体,该抗体为IgG1亚型,特异性好,效价高,纯度可达97%。     

护士分层次培训的实施与效果

探讨提高在职护士综合素质的方法,认为抓好在职护士培训、执业考试训练及规范化分层次培训,通过实践与全方位的培养,能使在职护士综合素质提高,使护理队伍迅速成长.     

司维拉姆所致药品不良反应回顾性分析

目的 分析司维拉姆所致药品不良反应(adverse drug reactions,ADR)的发生情况,为临床安全用药提供参考。方法 收集国内外公开报道的司维拉姆所致ADR文献资料,提取相关信息后进行分析。结果 共收集到司维拉姆所致ADR27例,男13例,女14例,主要发生在老年患者,60岁以上患者共16例,占全部病例的59.2%;多合并有一种或多种基础疾病,用药剂量为2.25～6.40g/d,其中大部分为2.4g/d;ADR发生时间主要集中在用药1年内,不良反应主要有胃肠系统表现,如恶心、呕吐、腹痛、便血等,18例患者及时停用司维拉姆,3例患者停药后改用醋酸钙或碳酸钙,1例患者停药后改用碳酸镧,多数患者经停药和相应的对症治疗后情况好转,1例患者因支气管阻塞死亡。结论 司维拉姆在使用过程中需注意胃肠系统不良反应,加强患者用药教育及监测,避免严重不良反应的发生。