RhoA和CDC42在急性白血病的表达异常及其意义

目的 检测急性白血病(AL)患者骨髓单个核细胞中RhoA和CDC42蛋白的表达水平,探讨Rho GTP酶相关的骨髓微环境与造血干细胞相互作用异常在白血病细胞恶性行为中的作用.方法 分离并制备54例AL患者及22名正常供者的骨髓单个核细胞的细胞裂解液,应用Western blotting方法,检测其中RhoA和CDC42蛋白的相对表达量,非配对t检验分析RhoA和CDC42蛋白在AL患者和正常供者中表达的差异,Spearman分析患者RhoA和CDC42基因的蛋白表达量与临床资料的相关性.结果 初治AL患者骨髓中RhoA和CDC42的蛋白表达水平显著高于健康人,其中急性髓系白血病M2、M3,及M5亚型患者的RhoA蛋白表达升高尤为显著,M3亚型患者的CDC42蛋白表达量升高最为显著.结论 初治AL患者骨髓中RhoA和CDC42表达显著上调,提示Rho GTP酶介导的白血病细胞迁移活跃导致骨髓微环境相互作用异常在白血病发生中起作用.     

组成活化型Rac1GTP酶通过上调促血小板血成素受体的表达促进白血病细胞的静息

目的:研究Rac1 GTP酶的活化对白血病细胞静息的影响,并探索其机制.方法:构建Rac1组成活化型慢病毒载体,以此感染急性髓系白血病KG-1a细胞,比较感染了组成活化型Rac1的KG-1a (Rac 1-V12-KG-1a)细胞和感染空载体的KG-1a(pCDH-KG-1a)细胞在G0期的比例差异.以Rac1特异性抑制剂NSC23766处理感染后KG-1a细胞,4d后检测两组细胞G0期比例的变化.实时定量PCR检测两组细胞中与细胞周期和细胞静息相关分子的表达.流式细胞术检测小鼠Rac 1GTP酶高度活化的AMLI-ETO9a白血病细胞模型中促血小板生成素受体(myeloproliferative leukemia MPL)-和MPL+细胞群在G0期的比例.结果:感染了组成活化型Rac1的Rac 1-V 12-KG-1a细胞的G0期细胞比例显著高于感染空载体的pCDH-KG-1a细胞的比例[(15.30±0.60)％ vs(11.50±0.17)％,P＜0.05];抑制剂处理KG-1a细胞后,随着抑制剂浓度的增加G0期细胞比例显著下降(P＜0.05).实时定量PCR检测结果显示,周期抑制因子P21、P27、P57的mRNA表达水平在Rac1-V12-KG-1a细胞表达均有不同程度的上调,静息相关调节分子N-Cadherin和MPL mRNA表达水平均显著升高(P＜0.05);流式检测结果显示,MPL+白血病细胞群的比例在G0期显著高于MPL组[(40.3±3.5)％vs (19.05±7.65)％,P＜0.05].结论:白血病细胞中Rac1 GTP酶的活化通过上调MPL等细胞外在调节因子的表达增加休眠期细胞的比例,从而促进白血病细胞维持静息状态.     

参芪地黄汤加减治疗狼疮性肾炎有效及安全性的系统评价

目的：系统评价参芪地黄汤加减治疗狼疮性肾炎的有效性及安全性。方法：检索PubMed、The Cochrane Library、Embase、Wed of Science、国家知识基础设施数据库、中国学术期刊数据库、中文科技期刊数据库等数据库,收集参芪地黄汤治疗狼疮性肾炎的随机对照试验（RCT）,检索时间为建库至2020年7月。采用RevMan 5.3进行Meta分析。结果：最终纳入12项研究,共886例患者。Meta分析结果显示：观察组（参芪地黄汤联合西医常规治疗）在改善患者临床疗效,降低24 h尿蛋白定量,降低血管内皮生长因子（VEGF）,降低系统红斑狼疮疾病活动指数（SLEDAI）,提升补体C3含量等方面均优于对照组,差异有统计学意义（均P<0.05）;观察组不良反应发生情况低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：参芪地黄汤加减治疗狼疮性肾炎疗效明确,且不良反应少,安全性好,值得临床推广应用。     

应用重组改良型人膜联蛋白检测动脉粥样硬化斑块的实验研究

目的：探讨99mTc标记重组改良型人膜联蛋白（H-AnnexinV）检测兔动脉粥样硬化病变的价值。方法：7只雄性大耳白兔随机分为模型组和正常对照组。模型组4只（其中1只用于模型对照研究）大白兔通过球囊损伤腹主动脉内膜,并饲喂含2%胆固醇、5%猪油的高脂饲料15周制备动脉粥样硬化模型。3只正常对照组大白兔饲喂普通饲料15周。15周后取3只模型组大白兔自耳缘静脉注射99mTc-H-AnnexinV 37~55.5MBq/kg（含500μg H-AnnexinV）,进行活体及离体血管显像。正常对照组显像方法相同。对模型组兔降主动脉分段,测定各段质量和放射性计数,并进行病理学检查。剩余1只模型对照组兔静脉注射99mTcO4- 37~55.5MBq/kg。结果：3只模型组兔注射99mTc-H-AnnexinV后10分钟降主动脉可见放射性摄取,随着时间的延长,显像剂摄取增加,显像剂注射后2小时,模型组兔降主动脉显影最为清晰。正常对照组兔在注射显像剂后10分钟可见降主动脉放射性摄取,随着时间的延长,显像剂摄取减少,注射显像剂后2小时,降主动脉放射性摄取不明显。注射显像剂后2小时模型组靶/非靶（T/NT）比值（2.68±0.25）明显高于对照组（1.57±0.24,t=5.44,P＜0.01）。含AS斑块血管片段的放射性摄取为（63.33±14.11）cpm/mg,明显高于非斑块的血管片段（21.75±8.30）cpm/mg（t=9.53,P＜0.01）。1只模型对照组兔静脉注射后10分钟到2小时均未见明显主动脉影像。结论：99mTc- H-AnnexinV核素显像可成为一种无创检测动脉粥样硬化斑块的方法。     

应用重组改良型人膜联蛋白评估兔动脉粥样硬化病变程度的实验研究

目的：探讨99mTc标记的重组改良型人膜联蛋白（H-Annexin V）评估兔动脉粥样硬化病变程度的价值。方法：9只雄性大耳白兔随机分为球囊损伤组、单纯高脂饲料组、正常对照组,每组3只。球囊损伤组兔通过球囊损伤腹主动脉内膜,并饲喂高脂饲料15周。单纯高脂饲料组兔饲喂高脂饲料15周。对照组兔给予普通饲料喂养15周。15周后3组大白兔均自耳缘静脉注射99mTc-H-Annexin V 37~55.5MBq/kg,进行活体及离体血管显像。对球囊损伤组和高脂饲料组兔降主动脉分段,测定各段质量和放射性计数,并进行病理学检查。结果：显像剂注射后2小时,球囊损伤组兔降主动脉显影最为清晰。单纯高脂饲料组兔仍可见降主动脉影像。对照组兔降主动脉显影不明显。注射显像剂后2小时球囊损伤组靶/非靶（T/NT）比值（2.68±0.25）明显高于单纯高脂饲料组（2.08±0.18,t=3.26,P＜0.05）和正常对照组（1.57±0.24,t=5.44,P＜0.01）。离体显像可见：球囊损伤组影像较为清晰,而单纯高脂饲料组可见降主动脉显影,但影像欠清晰。球囊损伤组含AS斑块的血管片段放射性摄取为63.33±14.11cpm/mg,明显高于单纯高脂饲料组含AS斑块血管片段的放射性摄取52.08±12.39cpm/mg（t=2.17,P＜0.05）。结论：99mTc-H-Annexin V核素显像在评估兔动脉粥样硬化病变程度方面具有重要的临床价值。     

二甲双胍和噻唑烷二酮类分别与达因-35联用治疗多囊卵巢综合征的疗效比较

目的:比较二甲双胍和噻唑烷二酮类(TZDs)分别与达因-35联用治疗多囊卵巢综合征(PCOS)的临床疗效。方法:随机将53例患者分成两组,A组予以二甲双胍治疗3个月后与达因-35共用3个月,B组予以TZDs治疗3个月后和达因-35共用3个月,总治疗期6个月,比较治疗前后内分泌激素、体重指数、血糖、排卵率等的改变。结果:两组治疗后胰岛素(INS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、睾酮(T)及黄体生成素(LH)均明显降低(P<0.05,P<0.01)。A组降低体重优于B组,B组改善胰岛素抵抗优于A组。两组在排卵率和妊娠率方面无显著差异(P>0.05),双胍组4例自发性妊娠,TZDs组也有4例自发性妊娠。随访1年,8例婴儿发育均无异常。结论:二甲双胍和TZDs分别与达因-35联用,均能改善PCOS患者的胰岛素抵抗及内分泌紊乱,肥胖的PCOS患者推荐首选二甲双胍+达因-35,体重正常者或胰岛素抵抗严重者选用TZDs+达因-35。     

018 Ox-LDL对内皮细胞粘附分子表达及粘附功能影响的研究

目的: 大量的研究已证明高脂血症是动脉粥样硬化的重要危险因素, 血脂异常可引起血管内皮细胞和血细胞的功能改变. 近年来的研究发现, 其中氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)起主要作用. 故尔观测Ox-LDL对血管内皮细胞粘附分子ICAM-1、 VCAM-1、 P-selectin表达和粘附作用的影响. 方法: 本研究采用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)作研究载体, 采用单核细胞系U937细胞观测Ox-LDL对内皮细胞(EC)粘附功能的影响, 采用免疫组化ABC法和ELISA二种方法观测Ox-LDL(100 μg/ml和200 μg/ml二种浓度)对EC上粘附分子ICAM-1、 VCAM-1和P-selectin表达的影响. 以计数法观测Ox-LDL对EC粘附功能的影响. 结果: 以ABC法测定ICAM-1的阳性表达率(%)如下: 100 μg/ml为60.8±11.5, 200 μg/ml为67.2±7.6, TNF-α(250 U/ml)为88.2±11.5, 未加任何刺激剂的对照组为37.9±5.6. 结果表明: 以Ox-LDL处理的HUVEC ICAM-1阳性表达率显著高于对照组. 以ELISA法测定的结果(以OD值表示)是100 μg/ml为1.424±0.361, 200 μg/ml为1.612±0.402, TNF-α为1.965±0.420, 对照组为1.330±0.320, 此结果同样表明Ox-LDL显著增加HUVEC上ICAM-1的表达. 以上二种方法均未观测到Ox-LDL对HUVEC上VCAM-1和P-selectin表达的影响. 粘附实验的结果显示: 浓度为100 μg/ml的Ox-LDL能显著增强U937细胞与HUVEC的粘附率(%), 实验组为20.22±8.29, 对照组为6.19±4.09, 二者差异非常显著(P<0.01). 结论: 本研究测定结果表明Ox-LDL确有促EC活化, 增加其表面粘附分子表达, 增强EC与白细胞(特别是单核细胞)的粘附作用, 促进动脉粥样硬化形成的作用.     

Ox-LDL对内皮细胞粘附分子表达及粘附功能影响的研究

目的 :大量的研究已证明高脂血症是动脉粥样硬化的重要危险因素 ,血脂异常可引起血管内皮细胞和血细胞的功能改变。近年来的研究发现 ,其中氧化低密度脂蛋白(Ｏｘ ＬＤＬ)起主要作用。故尔观测Ｏｘ ＬＤＬ对血管内皮细胞粘附分子ＩＣＡＭ 1、ＶＣＡＭ 1、Ｐ ｓｅｌｅｃｔｉｎ表达和粘附作用的影响。方法 :本研究采用人脐静脉内皮细胞 (ＨＵＶＥＣ)作研究载体 ,采用单核细胞系Ｕ937细胞观测Ｏｘ ＬＤＬ对内皮细胞 (ＥＣ)粘附功能的影响 ,采用免疫组化ＡＢＣ法和ＥＬＩＳＡ二种方法观测Ｏｘ ＬＤＬ(10 0 μｇ/ｍｌ和 2 0 0 μｇ/ｍｌ二种浓度 …     

液体切应力对内皮细胞粘附分子及单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的 :观察流体切应力对内皮细胞粘附分子ＩＣＡＭ 1、ＶＣＡＭ 1及单核细胞趋化蛋白质 (ＭＣＰ 1)表达的影响以及在动脉粥样硬化发病中的意义。方法 :以人静脉内皮细胞(ＨＵＶＥＣ) ,作观测对象 ,采用平行板流动腔产生一定大小的切应力 ,采用免疫组化ＡＢＣ法观测经 0 .72Ｐａ作用不同时间 (30ｍｉｎ、5ｈ)后 ,粘附分子表达的变化 ,采用ＥＬＩＳＡ方法测定灌流液中ＭＣＰ 1蛋白浓度 ,反映内皮细胞表达ＭＣＰ 1的变化。结果 :粘附分子测定的结果如下 :切应力作用 30ｍｉｎ后 ,ＩＣＡＭ 1的阳性表达率 (% )为 5 6 .3± 10 .2 ,作用 5ｈ后为 5…     

中药葛根防治糖尿病的作用机制和研究进展

糖尿病患病率高且并发症多,严重影响各种疾病的预后。在治疗上,降糖西药不良反应较多,限制临床治疗。中医药对于防治糖尿病经验丰富,可通过多靶点多通路降低患者血糖。中药葛根作为辛凉解表药,有清热、生津、止渴之效,药理学研究其具有抗氧化应激反应、减少炎症因子积聚、增强胰岛素敏感性、减少胰岛素抵抗等作用。葛根治疗糖尿病的主要活性成分为葛根素,临床研究表明以葛根素、葛根药对、葛根类方辨证论治各种糖尿病患者,疗效显著。近年来研究发现葛根素、葛根药对及葛根类方可以通过多靶点、多通路抑制氧化应激反应、调节体内炎症因子水平、减少AGEs的形成与累积、抑制胰岛β细胞凋亡、增加胰岛素敏感性、减少胰岛素抵抗等多种途径达到降低血糖,控制并改善各种并发症。文章旨在通过梳理相关文献,从葛根素、葛根药对、葛根类方3个方面总结归纳中药葛根防治糖尿病的作用机制和研究进展。