STAT1特异性siRNA真核表达载体的构建及体外转染优化

目的:构建STAT1特异性siRNA真核表达载体,并转染人气道上皮细胞(16HBE).方法:根据GeneBank数据库提供的STAT1基因两种变异体的共同核苷酸序列,按照Tuschl设计原则,选择设计双链siRNA,再转化为能表达其小发卡结构RNA(small hairpin RNA,shRNA)的DNA序列,并将其连接到带有卡那霉素抗性和增强绿包荧光蛋白的pGenesil-1.1真核表达载体上,将其转染至气道上皮(16HBE)细胞中,观察荧光表达,鉴定其转染效率.结果:通过酶切鉴定和序列测定,成功地构建了二条表达小干扰RNA的质粒及其阴性对照质粒,并成功转染到(16HBE)细胞株中,质粒/脂质体为1μg:2μl条件,能有效地转染细胞,转染效率达到50%以上.结论:成功构建siRNA真核表达载体并能成功体外转染,为下一步气道炎症性疾病的基因沉默研究奠定了良好的基础.     

支气管哮喘基因学研究进展

支气管哮喘是一类在环境因素和遗传因素共同作用下产生的、以气道高反应性和气流可逆性受限为特征的、呼吸道慢性炎症性疾病。近些年来的研究发现了很多与疾病发生密切相关的易感基因,包括ORMDL3,HLA基因簇中的DQA1*0104、DQB1*0201、DQA1*0401、DQA1*0601、DRB1*1501/1502,β2肾上腺素受体,IgE高亲和力受体β链。但是关于机制水平的研究仍然匮乏,需要今后更加注重这个方面。     

针刺加血府逐瘀汤加减治疗头痛61例

2004年7月～2008年12月,采用针刺配合血府逐瘀汤内服治疗瘀血头痛60例,均为门诊病人,男21例,女39例;年龄16—66岁,其中35—45岁女性28例;病程3个月～10年。