青翘HPLC指纹图谱研究

目的建立青翘的HPLC指纹图谱。方法色谱柱:Thermo C18Column(4.6mm×250mm,5μm);柱温:30℃;流动相:乙腈-水,梯度洗脱;流速:1.0mL/min,检测波长:203nm。结果建立了青翘的HPLC指纹图谱,并标定了21个共有峰,指认了其中的3个共有峰。结论此法简便、准确、快速,为全面科学评价青翘质量提供了可靠的分析方法。     

丹参饮片HPLC指纹图谱研究

目的：建立丹参饮片的高效液相色谱指纹图谱,研究不同产地丹参饮片的质量,建立评价丹参饮片质量优劣的指纹图谱分析方法。方法运用Waters 2695 DAD-HPLC高效液相色谱仪,采用Thermo C18（4．6 mm ×250 mm ,5μm）色谱柱,以乙腈-4 mL · L -1甲酸水进行梯度洗脱,流速为1．0 mL · min-1,检测波长为270 nm ,柱温30℃,通过聚类分析和相似度分析建立10批丹参饮片的指纹图谱。结果10批丹参饮片中获得19个色谱共有峰,不同来源丹参饮片指纹图谱相似度有一定差别。结论采用HPLC方法建立丹参饮片指纹图谱,方法稳定、可靠、简便,色谱图展现的各峰分离度较好,特征明显,可作为丹参饮片真伪鉴别的标准,为丹参饮片的质量评价提供参考依据。     

疲劳症状量表在非小细胞肺癌患者化疗前后疲劳评估中的应用

目的通过疲劳症状量表（Fatigue Symptom Inventory,FSI）来观察非小细胞肺癌患者化疗前后疲劳症状的变化及其影响因素。方法应用疲劳症状量表（FSI）分别观察108例完成1周期化疗的非小细胞肺癌患者化疗前后1周内疲劳状况变化,并对其中81例完成2周期同方案化疗的患者进行2周期疲劳观察。结果年龄、性别、疾病分期、既往化疗次数对FSI得分无影响,KPS评分较低,有症状、体征且影响日常生活和工作,化疗前即有较高的FSI得分,疲劳程度及疲劳对生活的影响、疲劳持续时间得分在化疗后第1周多有所加重（P〈0.05）。各化疗方案对疲劳的影响无明显差异,化疗缓解率短期内对疲劳的影响也无明显差异。结论 KPS评分是影响非小细胞肺癌患者化疗前疲劳的主要因素,化疗前KPS低者FSI量表得分高,疲劳症状明显。化疗能暂时加重疲劳。三种两药联合化疗方案对疲劳的影响差别不大,肿瘤缓解率对短期内患者的疲劳无显著影响。     

宏基因组学第二代测序技术辅助诊断肺新生隐球菌和卡氏肺孢菌混合感染一例

1例存在艾滋病基础且胸部计算机断层成像检查表现为肺弥漫性磨玻璃样病变的患者,入院时考虑为肺孢子菌肺炎,但治疗效果欠佳。肺泡灌洗液宏基因组学第二代测序技术检测出新生隐球菌与卡氏肺孢菌序列。经过联合抗肺孢子菌和抗隐球菌治疗,患者逐渐恢复。提示艾滋病患者需要警惕混合感染的可能性,宏基因组学第二代测序技术在该类人群病原学诊断中可能具有广阔的应用前景。     

不同产地珠子参中多糖的含量测定

目的建立珠子参多糖的含量测定方法,并比较不同产地珠子参中多糖含量的差异。方法采用水提醇沉法对珠子参中多糖进行提取、纯化,采用蒽酮-硫酸比色法对不同产地珠子参中多糖进行含量测定,并对测定结果进行聚类分析。结果在0.0057 mg/mL~0.0190 mg/mL葡萄糖浓度C与吸光度A线性关系良好(r=0.9998),平均回收率为101.55%,RSD 2.2%,不同产地的珠子参多糖含量在3.26%~9.36%,不同产地珠子参多糖存在差异。结论本试验建立的珠子参中多糖含量测定方法简便、稳定、可行,不同产地珠子参中多糖含量的差异较大,该结果为珠子参中多糖质量控制和相关产品的开发利用提供了理论依据。     

糖智宁胶囊定性定量方法研究

目的建立糖智宁胶囊的定性定量方法。方法采用TLC法对糖智宁方中黄连进行定性鉴别,采用HPLC法测定糖智宁胶囊中葛根素和竹节参皂苷Ⅳa的含量。色谱柱为Kromasil C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;柱温30℃;以0.2%磷酸溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱;流速1 mL min-1;检测波长203 nm。结果薄层色谱鉴别中,特征斑点清晰、分离度好、专属性强、阴性样品无干扰;在HPLC法中,葛根素和竹节参皂苷Ⅳa线性范围分别是：0.122 4～1.836μg（r=0.999 9）、0.249 6～3.744μg（r=0.999 9）;平均加样回收率分别为98.3%、97.1%;RSD分别为1.0%、0.7%。结论所建方法专属性强,重复性好,可用于糖智宁胶囊的质量控制。     

珠子参抗肝损伤药效的物质基础研究

目的探索珠子参抗肝损伤药效的物质基础。方法利用溶剂提取法、大孔树脂法及各种色谱技术,进行珠子参有效部位和化学成分的提取分离;采用CCl4所致小鼠化学性肝损伤模型,进行珠子参药效部位及有效成分筛选。将小鼠平均分为对照组、模型组、阳性对照组、珠子参不同剂量组,共9组。每天灌胃1次,连续7d。检测血清中AST和ALT含量的变化。结果珠子参总皂苷高剂量、中剂量可以降低ALT和AST含量,珠子参多糖低剂量组与模型组比较也可以降低ALT和AST的含量,而总皂苷高剂量有显著作用;竹节参皂苷Ⅳa各剂量组、人参皂苷Ro中、低剂量组均能降低ALT和AST的含量,与模型组对比,差异有统计学意义,竹节参皂苷Ⅳa低剂量效果显著。结论珠子参总皂苷为珠子参抗肝损伤的有效部位,主要化学成分竹节参皂苷Ⅳa为其抗肝损伤的主要有效成分。     

珠子参ISSR-PCR反应体系的建立及优化

目的建立珠子参的ISSR-PCR适宜扩增反应体系和程序,为其深入研究奠定基础。方法采用新型植物基因组DNA提取试剂盒提取珠子参总DNA,并用正交设计实验对其ISSR反应体系条件进行筛选及优化。结果提取的基因组DNA纯度和完整性较好,A260/A280值在1.8².0之间,DNA无降解现象,可满足ISSR-PCR扩增要求。珠子参ISSR分析的最适反应体系为:在20μL PCR反应体积中,含10ng模板DNA、0.20mmol·L-1dNTPs、1.5μmol·L-1引物、3U TaqDNA聚合酶、2μL10×PCR Buffer、3mmol·L-1 Mg2+。扩增程序为:95℃预变性5min,94℃变性30s,58℃退火30min,72℃延伸1min,循环40次,72℃延伸10min。由此可获得带型丰富和清晰可辨的DNA指纹图谱。结论建立的ISSR-PCR反应体系可用于研究珠子参的遗传变异和遗传多样性。     

基于HPLC波长切换联合梯度洗脱技术的茵栀黄口服液中15种成分定量研究

目的建立HPLC波长切换联合梯度洗脱法(HPLC-DVD法)同时测定茵栀黄口服液中14种活性成分新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、栀子苷、对羟基苯乙酮、野黄芩苷、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C、千层纸素A苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、千层纸素A及一种辅料成分苯甲酸的含量。方法采用HPLC-DVD法,WelchUltimateXB-C18(250mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,进行梯度洗脱,体积流量前30 min为0.8 mL/min,后续为1.0 mL/min;新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸检测波长为325 nm,栀子苷检测波长为238 nm,对羟基苯乙酮检测波长为275 nm,苯甲酸检测波长为228 nm,野黄芩苷、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C检测波长为325 nm,千层纸素A苷、汉黄芩苷检测波长为203 nm,黄芩素、汉黄芩素、千层纸素A检测波长为274 nm;进样量为10μL。结果 15种指标成分新绿原酸在74.46～1 574.42 ng(r=0.999 8)、绿原酸在34.58～741.10 ng(r=0.999 6)、隐绿原酸在34.65～742.62 ng(r=0.999 7)、栀子苷在234.42～5 024.45 ng(r=0.999 9)、对羟基苯乙酮在74.46～1 574.42 ng(r=0.999 9)、苯甲酸在321.79～6 897.10 ng(r=0.999 8)、野黄芩苷在44.70～958.08 ng(r=0.999 7)、异绿原酸B在32.53～697.22 ng(r=0.999 5)、异绿原酸A在8.60～184.38 ng(r=0.999 6)、异绿原酸C在31.93～684.30 ng(r=0.999 7)、千层纸素A苷在254.82～5 461.66 ng(r=0.999 5)、汉黄芩苷在10.18～218.12 ng(r=0.999 9)、黄芩素在92.81～1 989.33 ng(r=0.999 6)、汉黄芩素在31.17～668.00 ng(r=0.9995)、千层纸素A在11.74～251.73ng(r=0.9998)与峰面积具有较好的线性关系;精密度良好,RSD≤0.75%;重复性良好,RSD≤1.95%;供试品溶液在室温条件下8 h内稳定,RSD≤1.77%;平均加样回收率和相应的RSD分别为100.69%(0.55%)、101.99%(1.78%)、99.20%(0.72%)、100.13%(0.48%)、100.96%(1.74%)、100.02%(0.46%)、101.14%(0.27%)、99.87%(0.59%)、100.21%(1.56%)、102.18%(0.33%)、99.00%(1.02%)、98.82%(0.65%)、98.31%(0.58%)、96.01%(0.44%)、100.56(0.71%)。10批次供试品中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、栀子苷、对羟基苯乙酮、苯甲酸、野黄芩苷、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C、千层纸素A苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、千层纸素A的含量分别为0.246～0.322、0.213～0.290、0.203～0.267、1.786～2.047、0.035～0.046、2.393～2.541、0.263～0.392、0.139～0.216、0.032～0.067、0.208～0.250、2.120～2.648、0.063～0.102、0.081～1.429、0.164～0.246、0.079～0.110 mg/mL。结论建立的HPLC-DVD法同时测定茵栀黄口服液中的15种成分,方法简便、快速、准确,可为茵栀黄口服液质量控制提供科学依据。