超声微泡介导增强型绿色荧光蛋白基因转染视网膜神经节细胞的体内实验

BACKGROUND： Studies have demonstrated that ultrasound-mediated microbubble destruction significantly improves transfection efficiency of enhanced green fluorescent protein （EGFP） in in vitro cultured retinal ganglial cells （RGCs）. OBJECTIVE： To investigate the feasibility of ultrasound-mediated microbubble destruction for EGFP transfection in rat RGCs, and to compare efficiency and cell damage with traditional transfection methods. DESIGN, TIME AND SETTING： In vivo, gene engineering experiment. The study was performed at the Central Laboratory, Institute of Ultrasonic Imaging, Chongqing Medical University from March to July 2008. MATERIALS： Eukaryotic expression vector plasmid EGFP and microbubbles were prepared by the Institute of Ultrasonic Imaging, Chongqing Medical University. The microbubbles were produced at a concentration of 8.7 × 10^11/L, with a 2-4 μm diameter, and 10-hour half-life in vitro. METHODS： A total of 50 Sprague Dawley rats were randomly assigned to four groups. Normal controls （n = 5） were infused with 5 μL normal saline to the vitreous cavity; the naked plasmid group （n = 15） was infused with 5 pL EGFP plasmid to the vitreous cavity; in the plasmid with ultrasound group （n = 15）, the eyes were irradiated with low-energy ultrasound wave （0.5 W/cm^2） for a total of 60 seconds （irradiated for 5 seconds, at 10-second intervals） immediately following infusion of EGFP plasmids to the vitreous cavities. In the microbubble-ultrasound group （n = 15）, the eyes were irradiated with the same power of ultrasonic wave immediately following infusion of microbubbles containing EGFP plasmids to the vitreous cavities. MAIN OUTCOME MEASURES： After 7 days, retinal preparations and EGFP expression in RGCs were observed by fluorescence microscopy. RGC quantification in the retinal ganglion cell layer was performed. In addition, EGFP mRNA expression was semi-quantitatively determined by RT-PCR. RESULTS： The transfection efficiency of EGFP to RGCs by microbubbles with ultrasound was significantly greater than the other groups, and no obvious damage was detected in the RGCs. CONCLUSION： Under irradiation of low-frequency ultrasound waves, ultrasound-mediated microbubble destruction was effective and resulted in safe transfection of the EGFP gene to the RGCs.     

影响机动车驾驶员安全驾驶行为的因素分析

目的 探讨机动车驾驶员安全驾驶行为中身体条件的影响因素.方法 根据<公安部令第71号>规定,对6 707名驾驶员进行视力、色觉、立体视觉、选择反应时等身体健康检查,并将检查结果分组比较.结果色觉、立体视觉、选择反应时正常组与异常组违法驾驶率差异无显著性.但当双眼视力低于4.6时,驾驶员的违法驾驶率显著高于视力合格组(P<0.05);事故率高于视力合格组,但差异无显著性.结论 机动车驾驶员的近视对驾驶员的安全驾驶行为产生了一定的影响.     

MLH1、hMSH2及PCNA在宫颈癌组织中的表达及意义

目的:探讨宫颈癌中错配修复基因hMLH1、hMSH2及PCNA蛋白表达的关系及意义.方法:采用免疫组织化学SP法检测68例宫颈癌中的hMLH1、hMSH2及PCNA蛋白表达.结果:①宫颈癌中,hMLH1、hMSH2及PCNA蛋白阳性表达率为57.35%、58.82%及72.06%.②在PCNA 阳性表达和阴性表达的宫颈癌病例中,hMLH1阳件表达率分别为61.22%和47.37%,hMSH2阳性表达率分别为67.35%和36.84%.PCNA与hMSH2表达呈正相关(P<0.05).结论:hMSH2可能通过与PCNA蛋白相互作用参与宫颈癌的发生.     

应用PolyWin多导睡眠仪滴定CPAP呼吸机治疗用压力的研究

目的：探讨应用PolyWin多导睡眠仪滴定CPAP呼吸机治疗用压力的选择方法。方法：先用PolyWin多导睡眠仪给患者做多导睡眠图检查，选择中至重度睡眠呼吸暂停综合征(SAS)20例在PolyWin系统的控制下，用RemstarCPAP呼吸机做压力滴定，根据患者在各压力下的睡眠结构、血氧饱和度、RDI等多项指标选择使各指标改善如正常人一样的最小压力，用此压力治疗2个月后随访病人，并用PolyWin多导睡眠仪于患者睡眠时测定其睡眠图变化，以了解选定压力的治疗效果。结果：根据PolyWin多导睡眠仪压力滴定并结合其睡眠图变化所选定的压力治疗SAS，可明显改善患者的症状，使Sa02及RDI等指标恢复如正常人指标。结论：用PolyWin多导睡眠仪做CPAP呼吸机的压力滴定并根据睡眠图的变化来选择的压力。具有治疗效果显著及病人易接受的特点，值得推广。     

微波修复CD44s、CD44v6抗原及其在颅内转移瘤与胶质母细胞瘤中表达研究

目的探讨微波抗原修复对CD44s和CD44v6抗原的影响及其在颅内转移瘤及胶质母细胞瘤中的表达与这些肿瘤侵袭、转移之间的关系.方法应用微波-0.1%Triton X-100(MW-T)和微波-柠檬酸缓冲液(MW-CA)修复抗原,微波-LSAB免疫组化染色检测CD44s和CD44v6在20例正常脑组织、35例脑胶质母细胞瘤和30例颅内转移瘤中CD44的表达情况.结果 MW-CA和MW-T抗原修复处理的IOD显著高于未修复组的IOD值(P＜0.01);20例正常脑组织中CD44s和CD44v6表达均为阴性;35例脑胶质母细胞瘤CD44s阳性表达率为100%(35/35),CD44v6表达为阴性;30例颅内转移瘤中CD44s阳性表达率为86.7%(26/30),CD44v6阳性表达率为66.7%(20/30).CD44v6在颅内转移瘤与脑胶质母细胞瘤的表达差异有显著性(P＜0.01).结论微波抗原修复处理可以显著提高CD44s和CD44v6的IOD值;脑胶质母细胞瘤中CD44V6的表达可能与其脑内侵袭过程有关,无CD44v6表达可能与其很少发生颅外转移有关,并有可能成为颅内转移瘤诊治的有用指标之一.     

CD44s基因蛋白在非小细胞肺癌中的表达

目的：探讨标准型CD44（CD44s）基因蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）中各组织学类型的表达及与淋巴结转移的关系。方法：采用微波免疫组织化学染色方法（LSAB）检测CD44s在78例NSCLC中的阳性表达率。结果：NSCLC总阳性表达率为74．4％（58／78），鳞癌、腺癌、大细胞癌和腺鳞癌的阳性率分别是63．2％（24／38）、88．9％（24／27）、83．3％（5／6）和71．4％（5／7），鳞癌与腺癌、大细胞癌之间有非常显著差异（P＜0．01）。高、中、低和未分化组的阳性率分别是68．4％（13／19）、75．8％（25／33）、76．2％（16／21）和80．0％（4／5），高分化组和未分化组之间有显著性差异（P＜0．05），其他各组之间无显著性差异（P＞0．05）。转移和无转移的阳性率分别为48．1％（17／27）和88．2％（45／51），其中强阳性率分别是25．9％（7／27）和74．5％（38／51），不论是阳性率还是强阳性率，二组差异均非常显著（P＜0．01）。结论：CD44s阳性表达率高、阳性强度强的病人转移率低，CD44s可作为区分NSCLC组织学类型及淋巴结转移潜能的辅助指标。     

医院成本控制及相关因素分析

医疗机构目前还处于一种非常尴尬的境地，一方面带有福利、公益性质，另一方面政府已完全没有能力养它，投入不足10％，医院必须按照市场模式去运转，加强对成本的核算与控制摆到了医院面前。医院对成本管理需要从算账的浅层次上升到控制的深层次，并在控制过程中加强对制约因素的分析，以达到控制成本的效果。     

灌注法示踪微血管技术的实验研究

灌注法示踪微血管技术的实验研究熊正文，朱森树，李春光，苏红（中国人民解放军２５１医院，张家口０７５０００）在脊髓损伤后修复、断肢再植，心脑血管疾病，肿瘤生长与转移，皮瓣移植等的研究中，常需要了解其微血管生长变化，构形，立体分布，走行及相互联系等。目前...     

夏季凉菜八种

榨菜拌腐竹 原料 腐竹200克,香菜50克,榨菜50克,酱油、味精、醋、姜丝、香油、辣椒油各少许。 制法 将腐竹用开水泡软,无硬心时取出,切成丝,放入开水锅里焯一下,用凉水过凉,控干水分装盘。榨菜