反相高效液相色谱法测定人血中血小板活化因子方法学的…

目的：探讨用反相高效液相色谱法（ＲＨＰＬＣ）测定人血中血小板活化因子（ＰＡＦ）方法学的实用性。方法：分析实验影响因素，并与生物法对比观察，对不同年龄段正常人与冠心病患者血中ＰＡＦ含量进行测定与分析，结果：证实ＲＨＰＬＣ法测定ＰＡＦ操作简便，与经典生物法有良好的相关性，（ｒ＝０．９０７９）。结论；用ＲＨＰＬＣ法测定血中ＰＡＦ的干扰因素少，重复性好，测定的血ＰＡＦ值具有可靠性，能较准确地反映血中的ＰＡ     

人参总皂甙及单体对脐血CD 34+细胞体外扩增的影响

目的 探讨人参总甙、人参皂甙单体对脐血CD34 细胞体外扩增的影响。方法 用Stem Span ^TM sFEM无血清液体培养基加入不同浓度的人参总皂甙(GS)、人参皂甙单体(Hgl、Rbl)，进行液体扩增，计数总细胞敷并检测CD34 细胞。收获扩增后的细胞用MethoCult^TM H4．435半固体培养基培养，计数CFU-E、BFU-E、CFU-GM集落。结果 GS、Rgl、Rbl具有刺激CD34 细胞液体培养的作用。GS的最佳浓度是50mg／L，Rgl最佳浓度是5mg／L，Rbl最佳浓度是5m/L。细胞总数分别扩增20．4、24．5、2，4．1倍，CD34 细胞数分别扩增4．22、5．19、4．12倍。在液体培养后仍可刺激扩增后脐血细胞集落形成，CFU-E集落形成能力分别比对照组高90．1％、70．8％、72．8％；BFU-E集落形成能力分别比对照组高53．4％、68．0％、67．0％；CFU-GM集落形成能力分别比对照组高67．0％、29．8％、39．4％；结论 人参总甙、人参皂甙单体能促进造血干／祖细胞增殖，并且能诱导定向分化，具有类似生长因子和协同生长因子作用。     

人工红细胞及微囊包被血红蛋白的制备与鉴定

目的　确定有效制备及鉴定微囊包被血红蛋白和纳米级人工红细胞的方法。方法　首先通过低渗法制备高纯度、高浓度的血红蛋白 ,然后根据界面缩聚法的原理 ,利用匀速微囊制备喷头 ,将含有卵磷脂、聚乳酸的有机相 (丙酮、乙醇 )直接滴入含有 2 ,3 DPG和酶及抗氧化剂的血红蛋白水相中 ,通过高速搅拌使囊心物 (2 ,3 DPG与血红蛋白单体、二聚体构建的不稳定的四聚体 )的周围形成单个球状膜壳型微囊。结果　低渗法制备的血红蛋白浓度为 1 4 .1 g/dl,纯度为 97.7%。微囊包被血红蛋白其微囊呈圆球状 ,表面光滑均匀 ,微囊直径 0 .2 5 4 μm(电子显微镜下估算值 )。人工红细胞透射电镜 :单个包囊颗粒呈圆球状 ,有的表面光滑 ,有的表面稍有凹凸 ,平均粒径为2 1 0nm ,最小粒径为 1 90nm ;扫描电镜显示 :颗粒内部电子密度较高、不均匀 ,呈纤维状和细颗粒状交错分布 ,是为血红蛋白 ,颗粒边缘有一窄带 ,电子密度低于中央为膜层 ,平均粒径为 2 37nm。人工红细胞的包埋率为 2 7.7% ,泄漏率在 4℃生理盐水中 30d仅释放 6 .9%。结论　界面缩聚法可制备纳米级人工红细胞 ,且具有携带和释放氧气及二氧化碳的生物活性     

成骨细胞对造血干细胞增殖、分化影响的研究进展

造血干细胞的增殖和分化直至最后成为成熟的血液细胞释放至外周血的整个过程都离不开骨髓造血微环境 (BM HME)的调节。BMHME是由骨髓基质细胞 (BMSC)构成的。同时 ,BMSC又是成骨细胞的主要来源。也就是说 ,在体内造血细胞和成骨细胞具有非常密切的空间关系。体外长期培养造血干细胞也离不开基质细胞的支持。BMSC为造血细胞提供了保护作用[1 ] 。基质细胞 (包括网状成纤维细胞、巨核细胞、脂肪细胞和内皮细胞 )和造血细胞的直接接触 ,基质细胞产生的细胞外基质和基质细胞合成的细胞因子与各种造血细胞的形成都有关系[2 ,3] 。成骨细…     

人白细胞抗原-DRB基因多态性与特应性皮炎易感性的相关性研究

目的寻找特应性皮炎(AD)患者易感的人白细胞抗原(HLA)基因型,分析该易感基因的单链构象多态性与正常人的差别.方法用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)检测122例AD患者和80名健康献血员的HLA-DRB等位基因型,并分析该易感基因的单链构象多态性.结果外源性AD组和AD合并哮喘及变应性鼻炎组HLA-DR3与正常对照组比较,基因频率升高(RR＝5.27和3.59,均P<0.05),而HLA-DR6基因频率降低(RR＝0.10和0,均P<0.05),而HLA-DR3阳性的16例AD患者中,仅1例的单链构象多态性与正常人不同.结论HLA-DR6是AD的抗性基因,携带有HLA-DR6的个体较不易患AD,而HLA-DR3是易感基因,携带有HLA-DR3的个体,较易患AD,而携带HLA-DR3基因的个体与正常人比较无碱基差别.     

中医药防治肺结节的优势及思考

肺癌是目前中国发病率和死亡率第一的恶性肿瘤,针对肺结节的早诊早治可以降低肺癌患者的死亡率。本文总结关于中医药防治肺结节的优势,同时提出中医药防治肺结节的思考,主要包括五点:(1)增强患者的身体状况,使其耐受治疗;(2)中医非药物疗法可以预防和治疗肺结节及肺癌的术后并发症;(3)多发性肺结节难以根除,中医药可以预防肺结节的复发;(4)单纯中医药治疗逆转肺结节发生发展;(5)重视中医情志疗法。文章旨在探索中医药治疗肺结节的优势,并结合临床工作和研究进展进行思考,以期为各位同道提供参考借鉴。     

骨髓间充质干细胞经不同时间成骨细胞诱导后细胞性质比较

目的 探讨骨髓间充质干细胞经成骨细胞诱导不同时间后的细胞性质。方法 成人骨髓分离单个核细胞（MNC）,体外培养获得间充质干细胞（MSC）,传至第4代后加入地塞米松（DEX）、抗坏血酸和β-甘油磷酸,诱导成骨分化。诱导7d和14d后的细胞与正常成人成骨细胞分别加入不同浓度骨形态发生蛋白-2（BMP-2）和DEX,48h后检测细胞增殖、碱性磷酸酶（ALP）活性和骨钙素（OCN）的含量。结果 BMP-2和DEX对诱导7d后的细胞有明显的刺激增殖和ALP活性的作用;对诱导14d后的细胞,BMP-2和DEX都不能刺激细胞增殖和ALP活性,但OCN含量明显增加。正常成人成骨细胞对BMP-2和DEX作用的反应与诱导14d的成骨样细胞基本一致,但其OCN绝对含量明显高于MSC来源的成骨细胞。结论 骨髓MSC向成骨诱导7d和14d后细胞分化程度不同。诱导时间在MSC的成骨分化中是一个非常关键的因素,但其机制和最佳诱导时间尚需进一步研究。诱导14d后的MSC的成骨活性低于正常成人成骨细胞。     

神农33对急性肺损伤大鼠白介素—1β因素表达的影响

目的：观察白介素－1β（IL－1β）在内毒素（LPS）所致急性肺损伤（ALI）发病过程中的作用及神农33（SN33）注射液对ALI大鼠的保护作用。方法：Wistar大鼠尾静脉注射LPS,建立ALI模型。分别采用ELISA和Northern Blotting方法检测不同时相血清中IL－1β含量及肺组织IL－1βmRNA水平的变化;同时以地塞米松为对照,观察SN33对IL－1β基因表达的影响。光镜、电镜观察大鼠肺病理形态学变化。结果：LPS诱发大鼠ALI过程中血清IL－1β水平显著高于正常对照组（P＜0．01）,峰值为LPS攻击后2h;肺组织IL－1βmRNA表达明显增高,峰值为LPS攻击后1h;以SN33保护的大鼠,IL－1β和mRNA表达均明显低于相应时相LPS攻击组;且肺损伤程度减轻,结论：IL－1β在LPS诱导的ALI过程中起着重要作用;SN33注射液可以抑制IL－1β的释放和表达,对肺脏有一定的保护作用。     

神农33对急性肺损伤大鼠肿瘤坏死因子基因表达的影响

目的：探讨肿瘤坏死因子（TNF－α）在内毒素（LPS）所致急性肺损伤（ALI）发病过程中的作用,及神农33（SN33）注射液对TNF－α基因表达的影响。方法：给大鼠静脉注射LPS,建立ALI模型。分别采用ELISA和Northern blotting方法检测LPS攻击后不同时间血清中TNF－α含量,及肺组织TNF－αmRNA水平的变化,同时以地塞米松（DXM）为对照,观察神农33注射液对TNF－α释放和表达的影响,及肺病理形态的变化,结果：LPS诱发大鼠ALI过程中血清TNF－α水平高于正常对照组（P＜0．01）,肺组织TNF－αmRNA表达明显增高,以神农33保护的大TNF－α含量和mRNA表达均低于相应时相LPS攻击组,且肺损伤程度减轻,结论：TNF－α在LPS诱导的ALI过程中起着重要作用,神农33注射液可以抑制TNF－α的释放和表达,对肺脏有一定保护作用。