骨代谢疾病的实验室检查(一)

传统上认为骨骼仅为身体的支撑保护组织,现已发现骨骼也是人体代谢十分旺盛的代谢器官。人体所含无机物的99%存在于骨骼牙齿,骨组织的代谢在人的一生中无时无刻都在进行中。代谢性骨病是指各种原因所致的以骨代谢紊乱为主要特征的骨疾病。代谢性骨病属于代谢性疾病中的一类特殊疾病,临床上以骨重建紊乱所致的骨转换率异常、导致骨量及骨质量改变、骨痛、骨畸形和易发生骨折为主要表现。现代医学的许多进展推动着骨代谢性疾病的研究迅速向纵深发展,主要表现在:1、发现骨组织中的多种细胞功能是相互偶联(破骨细胞-成骨细胞偶联)的,其机制主要涉及到多种细胞因了、生长因子和内分泌/旁分泌激素间的偶联与相互作用。     

中药影响中性粒细胞活化作用的研究进展

中性粒细胞(PMN)活化后,通过“呼吸爆发”和脱颗粒作用产生大量炎性介质,为造成组织损伤和多器官功能障碍等危重病的首要原因之一。部分中药可有效抑制PMN活化和炎性介质的释放,并通过影响其与血管内皮细胞的黏附而发挥作用。     

脂质体包裹人血红蛋白微囊的制备及其对大鼠血液的影响

目的 :探讨用人血红细胞经低渗破膜释放出血红蛋白 (Hb) ,将Hb经过离心、超滤并制成血液代用品的新途径。方法 :采用脂质体包裹Hb的方法 ,并将制备脂质体包裹血红蛋白 (LEH)通过大鼠股静脉换血试验输入体内 ,异侧股动脉放等体积血 ,检测受试大鼠血液中的血红蛋白、红细胞、白细胞及血小板。结果 :制得Hb平均浓度为141g/L(5批 )、纯度为97.7 %稳定的LEH ,LEH包裹率为27.7% ,冰冻保存泄漏率<10 % ,LEH的直径为(237.5±37.3)nm。结论 :LEH是具有生物学活性的新型载氧制剂。     

便潜血免疫乳胶凝集试剂的研制及初步应用

目的 为了早期发现、诊断直、结肠癌，建立了一种检测便潜血的新方法。方法 利用免疫学原理，乳胶颗粒作为指示剂，检测粪便中的血红蛋白。结果 该方法灵敏度为40μgHb／g（粪便），与动物血、组织、人血清无交叉反应；测定范围；40～8000μg Hb／g粪便；对直、结肠癌诊断的灵敏度为100%。结论 与日本同类产品相比，特异性无明显差异（P〉0．05），灵敏度差异有统计学意义（P〈0．01）。临床应用结果表明，该法简便、快速，优于联苯胺法。由于此法具有较高的临床应用价值，建议使用此法进行粪便潜血检测，以取代传统的化学检测方法。     

层粘连蛋白-5γ2链Ⅳ功能区基因克隆及蛋白表达

层粘连蛋白 5(LN 5)是层粘连蛋白家族中一员 ,是 1个α3、β3和γ2 3条多肽链经二硫键结合的“Y”字型糖蛋白分子。该蛋白在皮肤修复与移植、肿瘤发生与迁徙中起重要作用 ,遗传性大疱性表皮松懈症 (JEB)与该多肽链结构的基因突变有关[1 3 ]。γ2链IV功能区对LN 5分子在细胞黏附过程中起关键性作用[4]。为探讨该功能区是否为LN 5最小黏附功能单位 ,是否可替代LN 5检测指标 ,本研究构建含γ2链IV功能区基因克隆载体 ,并对该蛋白进行原核表达。一、材料和方法1.材料来源 :人包皮组织 6份 ,来自天津第三中心医院、天津儿童医院实施包皮…     

铅镉联合作用对大鼠肾小管上皮细胞脂质过氧化的影响

为观察铅镉联合作用对大鼠肾小管上皮细胞脂质过氧化的影响 ,对原代大鼠肾小管上皮细胞提取、纯化、鉴定、培养后 ,采用 3× 3析因设计方法进行染毒实验 ,A组 :醋酸铅 0 0 2mmol L ;B组 :醋酸铅 0 1mmol L ;C组 :氯化镉 0 0 0 1mmol L ;D组 :氯化镉 0 0 0 4mmol L ;E组 :醋酸铅 0 0 2mmol L +氯化镉 0 0 0 1mmol L ;F组 :醋酸铅 0 0 2mmol L +氯化镉 0 0 0 4mmol L ;G组 :醋酸铅 0 1mmol L +氯化镉 0 0 0 1mmol L ;H组 :醋酸铅0 1mmol L +氯化镉 0 0 0 4mmol L。染毒时间为 6小时。经超声波粉碎细胞后 ,测定细胞内谷胱甘肽 (GSH)和丙二醛 (MDA)的含量 ,以及谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)和超氧化物歧化酶 (SOD)的活性。与对照组比较 ,联合染毒组GSH、GSH Px、SOD水平显著降低 ,MDA水平显著升高 ,析因分析表明 ,铅镉联合作用在对大鼠肾小管上皮细胞GSH、SOD、MDA改变方面有交互作用 (P <0 0 5 ) ,即铅镉联合作用呈现增毒作用 ;在对GSH Px改变方面未见交互作用     

B27在强直性脊柱炎发病中的作用研究进展

强直性脊柱炎 (ａｎｋｙｌｏｓｉｎｇｓｐｏｎｄｙｌｉｔｉｓ ,ＡＳ)是与ＨＬＡ关联最强的疾病 ,在不同人种和地区中已发现Ｂ2 7和ＡＳ关联的相对风险率 (ｒｅｌａｔｉｖｅｒｉｓｋ ,ＲＲ)值异乎寻常地高。可以肯定Ｂ2 7分子是ＡＳ的原发关联成分 ,直接证据来自人类Ｂ2 7转基因大鼠 ,发现这种带有人类Ｂ2 7等位基因的实验动物可发生类似ＡＳ疾病[1] 。有几种假说试图解释Ｂ2 7在ＡＳ发病中的作用 :连锁不平衡学说 (ｌｉｎｋａｇｅｄｉｓｅｑｕｉｌｉｂｒｉｕｍｔｈｅｏｒｙ)认为ＨＬＡ和疾病相关可能是由于ＨＬＡ某基因座位的等位基因和真正…     

促红细胞生成素多克隆抗体及酶标抗体的制备及纯化研究

目的以免疫亲和层析方法纯化重组人促红细胞生成素（rhEPO）并免疫新西兰家兔制备多克隆抗体,用辣根过氧化物酶标记抗体,为进一步建立ELISA检测体系做准备。方法购买rhEPO,用淋巴结内注射法制备多克隆抗体,EPO抗体与葡聚糖凝胶偶联,制成抗体亲和层析柱,以rhEPO作为抗原上样纯化。抗体先盐析粗提纯再过SPA亲和层析柱纯化。用高碘酸钠法制备酶标抗体。结果亲和层析纯化的抗原、抗体纯度较高,蛋白质含量测定分别为0.560、.41 mg/ml;酶结合率为0.578。结论免疫亲和层析法纯化rhEPO,制备的多克隆抗体及酶标记抗体的纯度好,可以满足下一步组建试剂盒的需求。     

CA125的生物素-亲和素酶联免疫检测方法的建立

目的:建立CA125的生物素-亲和素酶联免疫检测(BA-ELISA)方法,进行方法学评价.方法:纯化卵巢癌患者腹水得到CA125抗原,制备生物素化CA125抗体,酶标板包被生物素化BSA,建立BA-ELISA反应系统.观察本方法的灵敏度、回收率、特异度、稳定性等指标.测定卵巢癌患者以及卵巢良性肿瘤患者血清CA125水平,与化学发光免疫检测结果对比.结果:BA-ELISA方法灵敏度为3.18 U/L,与CEA、PSA等交叉反应率低;高低浓度样品平均回收率分别为107.11%、99.96%,批内和批间变异分别为7.97%、8.04%,稳定性好.本研究与化学发光免疫检测检出结果差异无统计学意义,检测卵巢癌患者血清CA125水平,回归方程为y＝-6.830 + 1.014x,r＝0.993.检测卵巢良性肿瘤患者血清CA125水平,回归方程为y＝1.936 + 0.937x,r＝0.986.结论:BA-ELISA检测方法的建立在诊断卵巢癌等方面灵敏度高、特异性强,操作简便,无需昂贵仪器,适合广泛应用.     

林洪生治未病思想在中医药防治肿瘤疾病上的应用

治未病思想最早见于《黄帝内经》,是中医学术思想的重要组成部分,其着重强调防患于未然。林洪生教授将治未病这一重要思想引入到中西医结合防治肿瘤疾病中,具体将其划分为未病先防、既病防变、瘥后防复三个层次,同时运用中医药分阶段规范化治疗的思想配合西医对疾病进行治疗,在临床上取得了显著疗效。文章概括介绍了林洪生教授运用治未病思想指导中西医结合防治肿瘤的理论方法,为其学术思想的传承与推广提供一定参考。