三种抗环瓜丝氨酸抗体检测试剂性能评价及临床应用

目的评价3种抗环瓜丝氨酸(CCP)抗体检测试剂盒的分析性能,并比较临床应用。方法收集93例类风湿性关节炎(RA)患者、118例非RA疾病(自身免疫性疾病82例、骨关节炎36例)患者以及20名表面健康人群的血清样本,评价罗氏、欧蒙、富纯3种抗CCP抗体试剂的分析性能,比较不同试剂间的相关性,评估各自的初步临床应用价值。结果 3种试剂检测精密度差异无统计学意义,批内、天间变异系数(CV)均<10%。罗氏和欧蒙2种试剂在检测范围内呈线性,富纯试剂的真实线性范围为25.0～1 027.9 RU/mL。3种试剂检测结果相关性较好,罗氏与欧蒙、富纯试剂的相关系数(r)分别为0.90、0.87,欧蒙、富纯试剂的相关系数(r)为0.97。根据厂商提供的Cut-off值,诊断灵敏度可达83.9%～86.0%,特异性为92.0%～97.1%。罗氏、欧蒙、富纯检测试剂的受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)分别为0.91、0.92和0.89,比较任意2种检测试剂的AUC,差异均无统计学意义(Z值分别为0.27、0.89、0.63,P均>0.05)。结论总体来说,不同方法抗CCP抗体检测试剂的检测结果之间具有一定的可比性,临床应用的诊断特性差异不明显,但标准化仍存在问题。     

M蛋白干扰对血清样本常规生化检测项目的影响

目的 全面评估单克隆蛋白(M蛋白)对24项常规生化检测项目的影响以及可能存在的潜在干扰.建立适用于临床实验室鉴别、验证进而去除M蛋白干扰的可操作流程.方法 观察57例M蛋白阳性样本的检测反应曲线,鉴别出可疑M蛋白干扰样本,再通过强生Vitros 5.1 FS干式生化分析仪的检测结果验证M蛋白干扰.使用生理盐水稀释M蛋白...     

利用多重数字PCR检测KRAS相关突变

 目的 建立多重数字PCR体系检测血浆细胞游离DNA(cell-free DNA, cfDNA)中KRAS第2外显子12、13密码子的7种突变。方法 构建7种KRAS突变型质粒用以建立多重数字PCR检测体系,以灵敏度、特异度和动态范围为主要参数评估体系的性能。利用该体系检测15例手术可切除的胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma, PDAC)患者血浆cfDNA中KRAS第2外显子12、13密码子突变情况,并与ARMs的检测结果进行比对。结果 自建的多重数字PCR在0.01%～10%的动态范围内线性良好。两个检测体系的灵敏度分别可达到0.025%和0.043%。15名PDAC患者组织中KRAS突变的阳性率达到100%。数字PCR检测血浆cfDNA所得的结果与组织结果的匹配率达到40%,ARMs检测组织和血浆cfDNA结果的匹配率为20%。15例样本中使用多重数字PCR检测到血浆cfDNA的最低丰度达到0.09%。结论 多重数字PCR具备高灵敏度和特异性,可用于准确定量外周血cfDNA中KRAS相关突变的水平。     

糖化白蛋白与糖尿病视网膜病变、糖尿病肾病及糖尿病周围神经病变的相关性

 目的  探讨糖化白蛋白(glycosylated albumin, GA)与糖尿病视网膜病变、糖尿病肾病及糖尿病周围神经病变的相关性。方法  选取2015年5月至2016年2月在复旦大学附属中山医院就诊的糖尿病患者300例, 采用液态酶法检测血清GA, 同时检测糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin, HbA1c)等其他生化指标, 记录患者身高、体重、糖尿病病程及并发症等信息。结果  糖尿病肾病组中GA(%)高于无并发症组［22.6(18.0~28.2) vs. 20.1(17.6～25.0), P=0.012］。Person相关性分析发现, HbA1c(r=0.818, P＜0.001)、空腹血糖(r=0.534, P＜0.001)、总胆红素(r=0.129, P=0.025)和丙氨酸氨基转移酶(r=0.276, P＜0.001)与GA呈正相关, 而体重指数(r=-0.131, P=0. 024)、肌酐(r=-0.117, P=0. 043)、尿酸(r=-0.213, P＜0.001)及同型半胱氨酸(r=-0.130, P=0.024)与GA呈负相关。多因素非条件Logistic回归模型表明GA是糖尿病肾病的独立危险因素(OR=1.148)。结论  GA与糖尿病肾病密切相关, 是糖尿病肾病的独立危险因素。     

481例恶性肿瘤患者循环肿瘤细胞(CTC)检测的回顾性分析

 目的  基于CellSearch平台,回顾性分析肝癌、胃癌、结直肠癌、乳腺癌、胰腺癌、肺癌、前列腺癌7类肿瘤患者循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTC)数量及形态特征,探讨其临床价值。方法  回顾分析复旦大学附属中山医院检验科2014年12月至2016年4月7类肿瘤患者共481例CTC检测结果,有CTC检出者回顾原始荧光检测图像,随访时间更新至2018年4月。比较7类肿瘤患者术前、术后CTC数量变化及形态特征。分析肝癌患者不同治疗阶段的CTC形态变化及其临床价值。结果  术前组CTC检出率为53%～100%,术后组为0～37%,7类肿瘤术后组均有显著下降,其中乳腺癌和胃癌下降最为显著(χ2=9.12, P=0.003; χ2=5.76, P=0.016)。不同肿瘤CTC形态存在较大异质性,以肝癌和肺癌为甚。肝癌患者连续监测结果显示,不同治疗阶段的CTC数量及形态均有变化且与临床预后相关。结论  7类肿瘤术后组CTC7.5检出率显著低于术前组。在肝癌治疗监测过程中,CTC形态变化对于治疗反应及临床预后可能有一定的提示作用。     

POCT临床应用建议

POCT(point-of-care testing)在患者近旁进行分析,操作简单,使用方便,可快速得到检测结果,有助于缩短治疗周期、改进治疗效果和提高医疗效率,已得到广泛应用.但如果应用不当,POCT的使用也可能对患者的医疗效果产生不利的影响,甚至可能造成医疗费用不合理地增加.     

常规生化检验项目生物学变异的研究

目的 通过研究中国人32项常规检验项目的生物学变异数据,计算检验质量目标,为制定我国临床检验质量标准提供依据.方法 参考国外同行的生物学变异实验设计和计算方法,通过对22名上海中山医院检验科工作人员(男12名,女10名,年龄20～40岁,中位年龄30岁)短期(1 d内5个时间点为采血时间:8:00、10:00、12:00、14:00和16:00)、长期(连续6周,每周早晨8:00为采血时间)以及对照血清(体检健康人的新鲜混合血清)的检测,计算生物学变异数据、个体指数(Ⅱ)及质最目标.结果 (1)得到了 32项常规检验项目的短期和长期生物学变异数据以及以长期生物学变异数据为基础的Ⅱ和质量目标.(2)发现饮食对部分检验项目的生物学变异有一定影响,其中最明显的是游离脂肪酸,餐后相对餐前的检测值平均偏低约30％.其次是超敏C反应蛋白,餐后相对餐前的检测值平均偏低约20％.但三酰甘油,餐后相对餐前的检测值平均偏高约10％.(3)得出的质量目标允许总误差适宜值与欧洲生物学允许总误差适宜值和美国临床实验室改进修正案室间质量评估指标之间存在一定差异.结论 (1)本研究中载脂蛋白E和游离脂肪酸的实验结果弥补了欧洲生物学变异数据库的不足.(2)32项常规检验项目中仅少部分受到饮食因素的影响.(3)以中国人生物学变异数据为基础设立的分析质量目标和欧洲生物学质量目标基本一致,但也有少部分项目存在差异.(4)使用生物学变异数据设立分析质量目标比使用CLIA室间评估指标更实际有效.     

生化项目复检规则合理性的评价

为提高检测结果准确性,实验室按照一定的规则对标本进行复检.但是检测结果重复测定会延长结果报告临床的时间,增加检测成本,浪费人力资源,因此近年来其实际使用价值受到质疑.2009年,有文献[1]报道危急值复检并不能提高检测结果准确性,相反有可能延误了重要检测结果报告临床的时间.     

国产乙型肝炎病毒表面抗原酶联免疫吸附试验试剂盒的检测效果评价

目的:评价6种国产乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒的检测效果。方法:应用AXSYM全自动微粒子酶免疫化学发光分析仪检测测定后余留标本,对相关样品进行稀释,然后选取6种国产HBsAgELISA试剂盒进行检测,评价6种国产试剂盒的灵敏度、精密度、特异度、检测范围和钩状效应(Hook效应),确立临界值(cut-off)对应的浓度范围以及不同孵育时间对检测灵敏度的影响等。结果:6种试剂盒的灵敏度有一定差异,范围在0.40～0.60ng/mL之间。对低浓度标本,6种试剂盒的批内精密度变异系数(CV)分别为6.21%、9.45%、9.42%、13.04%、10.49%和4.84%;批间精密度CV分别为15.76%、19.12%、19.54%、23.89%、24.22%和14.99%。HBsAg质量浓度与临界值指数(COI)呈S型曲线关系。在本实验所分析的HBsAg浓度范围内未发现高剂量Hook效应。6种试剂盒临界值对应的质量浓度在0.3～0.5ng/mL之间。结论:国产HBsAgELISA试剂盒的灵敏度有待进一步提高。     

血清胆红素不同检测方法的评价

目的评价临床上最为常用的3种胆红素检测方法。方法使用罗氏、强生、和光3种胆红素试剂对58份新鲜患者血清做相关性分析。使用3种试剂分别检测梗阻性黄疸患者术前及术后的血清样本,并比较检测结果。结果3种试剂对总胆红素（TBil）检测的结果相关性较好,强生、和光与罗氏试剂的相关系数（r）分别为0．99、0．98,和光与罗氏试剂对直接胆红素（DBil）检测结果的r为0．99;强生试剂检测结合胆红素（Bc）／TBil比值在梗阻性黄疸成功解除梗阻后迅速下降,下降趋势较罗氏、和光试剂检测结果更为明显。结论罗氏、强生、和光3种胆红素试剂由于方法不同,其对胆红素的检测结果有一定的差异。强生试剂测定Bc更能准确反映梗阻性黄疸的疗效观察。