恶性胸腔积液中性粒细胞和淋巴细胞比值变化及其临床价值

目的探讨外周血中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)在恶性胸腔积液中的变化及其临床价值。方法收集恶性胸腔积液患者50例(恶性胸腔积液组),良性胸腔积液患者50例(良性胸腔积液组)。检测所有研究对象的外周血细胞计数,比较NLR在良恶性胸腔积液患者间的差异。结果恶性胸腔积液组的NLR值较良性胸腔积液组明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。ROC曲线分析,NLR值的最佳阈值为2.14,AUC为0.77,灵敏度为76.8%,特异度为86.7%。结论 NLR测定是恶性胸腔积液诊断的敏感指标,具有较高的特异性,对恶性胸腔积液的诊断有一定的临床价值。     

微量稀释法测定抗真菌剂对酵母菌MIC的评价

目的　评价微量稀释法测定抗真菌剂对酵母菌最低抑菌浓度 (MICs)的可靠性和实用性。方法　应用微量稀释法和参考常量稀释法测定 5种抗真菌剂对 10 6株临床分离的酵母菌及 2株ATCC质控菌的MICs。结果　微量稀释法测得对念珠菌MICs 结果 (4 8h)与参考方法 (4 8h)比较 ,在± 1稀释度范围内总符合率为 93 2 % ,2株新型隐球菌 72h测定结果与参考方法相同。对 2株ATCC质控菌各测定 5 0次 ,则测定结果在质控中位数± 1稀释范围度内总符合率为 95 8%。结论　微量稀释法测定抗真菌剂对酵母菌MICs,其方法简便、结果准确可靠、重复性好 ,适合于常规工作。     

原发性胆汁性肝硬化患者外周血单个核细胞ANT3基因表达及临床意义

目的探讨腺嘌呤易位体3（ANT3）基因表达水平与原发性胆汁性肝硬化（PBC）的相关性。方法利用Taqman-MGB探针技术，通过ACT值建立实时荧光逆转录聚合酶链反应（FQ-RT-PCR）相对定量方法，检测30例健康人（对照组）和30例PBC患者（观察组）外周血单个核细胞（PBMC）ANT3基因的表达，同时检测血清γ-谷氨酰转移酶（γ-GT）与碱性磷酸酶（ALP）浓度。结果观察组PBMC中ANT3 mRNA表达的ACT值明显高于对照组，P〈0．01；其原始模板浓度为对照组的2．3倍，P〈0．01。观察组血清γ-GT、ALP浓度均升高，且与ANT3基因表达的△CT值呈负相关（P均〈0．05）。结论PBC患者PBMC中ANT3 mRNA表达水平明显升高，且与血清γ-GT、ALP浓度呈负相关。提示ANT3 mRNA的表达量与PBC的严重程度相关；ANT3基因检测在PBC发病机制、诊断及病情监控中有重要作用。     

血清九项肿瘤标志物组合检测原发性肝癌初步评价

用甲胎蛋白（ＡＦＰ）、γ－谷氨酰转肽酶（ＧＧＴ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、α１－抗胰蛋白酶（α１ＡＴ）、总唾液酸（ＴＳＡ）、铁蛋白（Ｆｔ）、铜蓝蛋白（ＣＰ）、ＬＤＨ同功酶及ＧＧＴ同功酶计９项血清肿瘤标志物作原发性肝癌的鉴别诊断。其中５项计量资料的统计学分布检验证明ＣＰ和ＴＳＡ近似正态（Ｐ＞０．１），ＧＧＴ、ＬＤＨ和α１ＡＴ呈正偏态，经自然对数转换后呈近似正态（Ｐ＞０．１），提示应根据资料分布特征确定     

碳青霉烯类药物非敏感肠杆菌科细菌基因型研究

摘要：目的：探讨临床分离的碳青霉烯类药物非敏感肠杆菌科细菌的基因型。 方法：收集2010年1月至2013年6月临床标本中分离的碳青霉烯类药物非敏感肠杆菌科细菌110株,K-B纸片扩散法检测细菌对临床常用药物的敏感性,纸片扩散表型确证试验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),改良Hodge试验（MHT）检测碳青霉烯酶表型,PCR、DNA测序及BLAST比对等方法确定菌株耐药基因型。 结果：110株碳青霉烯类非敏感肠杆菌科细菌中,MHT阳性77株(70.0%)。31株大肠埃希菌、1株产气肠杆菌和1株黏质沙雷菌检出bla_KPC-2基因,5株阴沟肠杆菌和1株产气肠杆菌分别检出bla_IMP-26和bla_VIM-2基因。36株32.7%菌株ESBLs表型试验阳性,主要检出bla_CTX-M-15、bla_SHV-12和bla_CTX-M-3 3种ESBLs基因型。 结论:本项研究碳青霉烯类非敏感肠杆菌科细菌以bla_KPC-2基因型为主,其次为bla_IMP-26和bla_VIM-2基因型。     

血清α_1－抗胰蛋白酶的重氮复盐显色测定法

血清α＿１－抗胰蛋白酶的重氮复盐显色测定法解放军杭州一一七医院临床实验中心（３１００１３）张丽君，曾贤铭，陈汉美，吴其华血清α１－抗胰蛋白酶（α１－ＡＴ）活性对消化道肿瘤的诊断和肝癌的预后评价等具有重要价值［１］。其测定方法主要有免疫法和化学法［２，...     

人Toll样受体3基因表达水平的实时荧光定量PCR测定

目的建立检测人Toll样受体3（TLR3）mRNA表达水平的实时荧光定量逆转录PCR（FQ-RT-Pert）法，及探讨其在外周血单个核细胞（PBMC）中的表达水平。方法用Beacon Designer2．1软件设计TLR3基因特异性引物和荧光探针，逆转录扩增目的片段，构建重组体pMD18-T-TLR3作为定量标准品。在ABIPrism7000型荧光定量分析仪上，通过荧光强度达到一定阈值时的循环数来定量起始模板，建立标准曲线；并检测30名正常人及20例原发性胆汁性肝硬化（PBC）患者，20例慢性乙型肝炎肝硬化患者外周血PBMCTLR3基因的荧光强度，根据标准曲线及循环阈值，由软件自动计算样本中TLR3mRNA的起始拷贝数。结果FQ-RT-PCR检测TLR3基因的线性范围为10^2～10^8拷贝数／μl RNA（r=0．9974），内参β-actin的线性范围为10^3～10^8拷贝数／μl RNA（r=-0．9984）；高浓度样本批内和批间变异系数（CV）分别为6．7％和8．7％，低浓度样本批内及批间CV分别为12．3％和14．0％，30名健康人，20例PBC及20例慢性乙型肝炎肝硬化患者PBMC中均有TLR3 mRNA的表达，分别为3．46×10^2～4．51×10^3拷贝／μg RNA、4．92×10^2～1．42×10^4拷贝／μg RNA和2．58×10^2～7．17×10^3拷贝／μg RNA。结论成功建立检测TLR3 mRNA的FQ-RT-PCR方法，可作为临床和基础研究TLR3基因表达的工具。     

粒细胞集落刺激因子受体基因在原发性胆汁性肝硬化外周血单个核细胞的表达及临床意义初探

目的探讨粒细胞集落刺激因子受体(G-CSFR)基因在原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血单个核细胞(PBM C)的表达情况及其临床意义。方法建立以18S rRNA基因为内参的实时荧光逆转录聚合酶链反应相对定量方法,检测30例PBC患者和30例正常人PBM C中G-CSFR基因的相对表达量。结果PBC患者PBM C中G-CSFR mRNA的ΔCT值为10.6±2.2,其相对表达量是正常对照组(8.9±0.4)的30%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论G-CSFR基因在PBM C中的表达降低与PBC的发病密切相关,提示G-CSFR在PBC的发病中可能具有一定作用。     

联合检测抗核抗体、抗双链DNA及抗ENA谱对自身免疫病的诊断价值

目的：了解联合检测ANA,抗ds-DNA及抗ENA对诊断自身免疫性疾病的价值。方法：ANA和抗ds-DNA用免疫荧光法,抗ENA用免疫印迹法,对99例自身免疫性疾病患和79例健康血清进行了检测。结果：ANA 系统性红斑狼疮（SLE）,混合结缔组织病（MCTD）和系统性硬皮病（PSS）阳性率均高于70％,对MCTD可达100％,抗ds-DNS对SLE有100％特异性,而阳性率为69．0％;抗ENA谱对鉴别病种价值较大,其中抗Sm对SLE和抗Sc170对PSS的诊断种异性均达100％。三个项目联合检测,对SLE,PSS和MCTD阳性检出率分别为88．7％,80．0％和100％。结论：联合检测可提高检测阳性率,降低漏检率,同时有利于作出鉴别诊断。