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小鼠心肌内转基因后压力超负荷模型的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
目的建立成年小鼠心肌内转基因后压力超负荷模型,探讨手术中关键性技术问题,为以后利用此模型研究相关心脏疾病提供可靠的实验方法。方法20只C57/BL6小鼠分成两组,分别是Lacz组和PBS组,用乙醚麻醉后,剪断右侧第一、二肋骨,打开胸腔,分离主动脉,用自制的弯钩在升主动脉下穿线,用带31G针头注射器从左心室部位进针,分别把携带Lacz基因的腺病毒载体100μl和PBS100μl注射入左心室,同时提起主动脉下的线暂时阻断主动脉血流5s、10 s、20 s、30 s后,关闭胸腔,饲养第2天,打开胸腔用26G的针头缩窄升主动脉70%,术后饲养1周,从右测颈动脉用27G针头穿刺测量血压后,取出心脏,用X-Gal染色,制成冰冻切片,显微镜下观察心脏的染色情况,用H-E染色观察心脏肥厚情况.以不缩窄升主动脉但做手术过程的假手术组做对照组。结果①术后1周成活率95%。②缩窄升主动脉的实验组比对照组的血压明显升高(P<0.05)。③H-E染色显示缩窄升主动脉1周后心室壁厚度增加。④肉眼和显微镜下都可以观察到同正常小鼠心脏比较,转染Lacz基因后阻断5 s或者更长时间主动脉血流的小鼠,心脏开始有蓝染,随时间延长颜色逐渐加深,但是阻断10 s、20 s和40 s主动脉血流的小鼠心脏蓝染无明显区别。结论①该方法简单有效,重复性好,可用来制作心肌内基因和心脏压力超负荷模型。②左心室心腔直接注射转染腺病毒携带的基因后,同时阻断升主动脉血流10 s以上可以使心脏基因有较好的表达,并且小鼠成活率高。 相似文献
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目的探讨猪冠状动脉前降支(LAD)结扎百分位点和心梗体积、左室射血分数的关系,以期指导研究者能够根据急性心肌梗死模型的心功能要求选择合适的LAD结扎百分位点。方法将47只小型猪开胸结扎心脏LAD中远段约30%~75%的不同百分位点,分别于术前、术后1 h心脏超声检查左室射血分数(LVEF),术后3 d进行常规冠状动脉造影,4周处死测量前降支结扎位点和梗死体积,最后用简单直线回归模型分析LAD结扎百分位点和心梗体积、左室射血分数回归方程和相关系数。结果47例动物手术过程中死亡8只,剩余39只存活动物冠状动脉造影均显示LAD中远段结扎部位处完全闭塞,表明手术成功。LAD结扎百分位点和术后1 h LVEF、术后1 hLVEF下降值、梗死心肌体积均明显相关(相关系数r分别为0.87、0.78和0.90,P均<0.001),其回归方程分别为:术后LVEF(%)=65.88-0.55x结扎百分位点;术后LVEF下降值(%)=0.12 0.59x结扎百分位点;心肌梗死体积(%)=0.53x结扎百分位点-5.43。结论猪LAD结扎百分位点和术后左室功能、梗死心肌体积均存在显著的相关性,可根据实验目的和对心功能的要求选择合适的结扎百分位点。 相似文献
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三氧化二砷洗脱支架抑制猪损伤冠状动脉局部炎性因子的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨三氧化二砷(As2O3)多聚左旋乳糖酸(PLLA)涂层支架对猪损伤冠状动脉局部炎性因子表达及炎性细胞浸润的影响,了解As2O3洗脱支架对局部炎性反应的作用. 方法 在8只小型家猪的前降支、回旋支和右冠状动脉随机双盲植入裸金属支架(裸支架组)、西罗莫司洗脱支架和As2O3洗脱支架,7 d处死,检测支架段血管单核细胞趋化蛋白(MCP)-1、白细胞介素(IL)-6蛋白和mRNA表达,HE和免疫组化检测炎性细胞浸润,体外观察As2O3对人T淋巴细胞的凋亡诱导作用. 结果裸支架组MCP-1蛋白和mRNA表达分别为0.857±0.053和0.724±0.027,IL-6蛋白和mRNA表达分别为0.551±0.032和1.015±0.041,As2O3洗脱支架和西罗莫司洗脱支架均降低支架段血管MCP-1(分别为0.421±0.055和0.406±0.042)和IL-6(分别为0.151±0.032和0.146±0.051)蛋白的表达(P<0.01),并同时降低MCP-1(分别为0.338±0.047和0.327±0.051)和IL-6(分别为0.531±0.052和0.523±0.061)mRNA的表达(P<0.01),As2O3洗脱支架和西罗莫司洗脱支架段血管局部炎性细胞浸润较裸支架组明显减少.体外细胞培养显示,As2O3具有诱导入T淋巴细胞凋亡作用. 结论 As2O3洗脱支架具有减少猪损伤冠状动脉炎性细胞浸润和抑制炎性因子MCP-1、IL-6表达的作用,诱导炎性细胞凋亡可能是其抗炎机制之一. 相似文献
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目的 利用超声心动图评价自发性高血压大鼠(SHR)左室舒张功能.方法 15只3月龄雄性SHR,每3个月观测1次至9月龄,以同月龄Wistar大鼠15只作为对照.采用17.5 MHz小动物高频超声探头,通过M型超声、二尖瓣血流频谱和组织多普勒技术评价两组动物心脏结构与舒张功能各项指标变化.结果 和Wistar大鼠相比,3月龄SHR即出现E/E’升高(P<0.01);6月龄和9月龄SHR E/A、E’/A’均小于同月龄Wistar大鼠值(P<0.05),E/E’均大于同月龄Wistar大鼠值(P<0.01);减速时间(DT)、等容舒张时间(IVRT)比较差异无统计学意义.6月龄和9月龄SHR E/A、E’/A’均小于3月龄SHR值(P<0.05);E/E’均大于3月龄SHR值(P<0.05);DT、IVRT变化差异无统计学意义.不同月龄Wistar大鼠各项舒张功能超声指标变化差异无统计学意义.SHR和Wistar大鼠随月龄增大收缩功能变化差异均无统计学意义.结论 E/A、E'/A'和E/E’是评价SHR舒张功能变化的敏感指标. 相似文献
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核磁共振显像评价粒细胞集落刺激因子对心肌梗死后左心功能的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:用延迟增强核磁共振心肌灌注扫描(CMR)评价急性心肌梗死后注射粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对梗死后左室功能的影响。方法:选取2008年1月-2009年1月收治的22例急性心肌梗死患者,入院后均接受急性心肌梗死的常规治疗(包括药物与介入治疗),在此基础上随机分成G-CSF治疗组和对照组,G-CSF治疗组除常规治疗外还给予G-CSF(商品名:惠尔血,600μg·d-1)连续注射5d,两组均在心肌梗死后第7天和6个月进行心脏CMR检查,测量患者的左室舒张末期容积和收缩末期容积,计算左室射血分数。结果:对照组左室射血分数在心肌梗死后7d时为(55.58±5.93)%,在心肌梗死后6个月时为(55.77±7.55)%;治疗组左室射血分数在心肌梗死后7d时为(54.16±11.29)%,在心肌梗死后6个月时为(56.43±9.49)%。两组左室射血分数在心肌梗死后6个月时与7d时比较均有增加,但治疗组左室射血分数增加较对照组增加明显,差异有统计学意义(P=0.0047)。结论:急性心肌梗死后注射G-CSF能显著改善心功能。CMR能够用作客观评价心肌梗死后左室功能的方法。 相似文献
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目的 探讨BALB/c小鼠心肌梗死(MI)后弹性模量与心肌结构和心功能的相关变化。方法 分别于小鼠MI后1小时、24小时、7天、14天和28天,行心脏功能和左心室腔内压力检测;应用原子力显微镜检测梗死心肌弹性模量;梗死心脏组织制成石蜡切片行苏木素-伊红染色和Mallary纤维染色。结果 (1)梗死后心肌弹性模量呈现先降低后逐渐增高的时间依赖性变化。(2)组织病理染色显示,心脏结构与心肌弹性的变化在时间上呈对应关系。(3)心肌梗死后心脏功能和左心室腔内压力的改变表现出与上述理化参数相似的变化趋势。结论 小鼠心肌梗死后弹性模量、心肌结构和功能均表现出时间依赖性相关变化且相互之间保持高度的一致性。 相似文献
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目的通过检测wnt11、WIF-1及β-catenin在压力超负荷心力衰竭小鼠中的表达探索wnt信号在心力衰竭发生过程中的作用。方法主动脉缩窄法(transverse aortic constriction,TAC)建立C57/BL6小鼠心衰模型,假手术组为对照组。彩色多普勒采集心脏指标,取建模前后的血浆样本及心肌样本,测定血液中wnt11、WIF-1浓度及心肌组织中wnt11、WIF-1及β-catenin表达情况。结果与假手术组比较,TAC组小鼠wnt11、β-catenin的表达明显高于假手术组,而WIF-1的表达明显下降。结论 wnt途径信号分子参与压力超负荷介导的心力衰竭发生发展过程,相关生物标记物可能对心力衰竭的治疗有指导意义。 相似文献
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目的: 检测大鼠心肌在缺氧条件下发生细胞凋亡的变化,以及乙醛脱氢酶2(ALDH2)在此过程中所起的作用。 方法: 运用缺氧模型,比较大鼠心肌细胞在单独缺氧和经ALDH2特异性抑制剂daidzin预处理24 h后缺氧的凋亡改变,酶活性检测采用乙醛代谢法、凋亡的测定通过用Hoechest 33324、免疫荧光标记用流式细胞仪测定和TUNEL试剂盒检测。 结果: 心肌细胞在daidzin作用下,其酶活性被抑制而细胞无凋亡发生。在daidzin预处理24 h后再经缺氧诱导,比单独缺氧引起的心肌细胞凋亡更为明显:表现为在Hoechest 33324染色中,细胞核溶解和核碎裂(P<0.05),FACS和TUNEL显示,凋亡细胞明显增加(P<0.05)。 结论: ALDH2酶活性降低可增加心肌细胞对缺氧导致凋亡的易感性,ALDH2对缺氧引起的细胞凋亡有拮抗作用。 相似文献
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目的研究经冠状动脉骨髓单个核细胞移植治疗原发性扩张型心肌病的远期疗效。方法入选18例原发性扩张型心肌病患者,随机分为对照组8例和移植组10例,两组均给予常规抗心力衰竭药物治疗。移植组接受经冠状动脉自体骨髓单个核细胞移植。两组术前、术后12个月分别检测血常规及生化指标(肝功能、肾功能、血糖、血脂、高敏C反应蛋白),术前、术后12个月分别行超声心动图、心电图、6min步行试验,术前和术后12个月行心脏核磁共振(MRI)检查测定左室射血分数(LVEF)。随访至两年,记录患者年住院天数,以死亡作为研究终点。结果术后12个月细胞移植组6min步行路程较术前有明显增加(521.7±78.2m比321.5±63.7m,P<0.05),LVEF变化值在细胞移植组与对照组间存在统计学差异(3.1%±4.5%比-2.4%±4.6%,P=0.019),但LVEF值较术前无统计学差异,左室舒张末内径(LVEDd)在移植组及对照组间存在明显差异(67.2±1.0mm比69.5±1.1mm,P<0.01)。研究过程中未发现有发热、过敏反应、栓塞事件等发生。结论骨髓单个核细胞移植治疗原发性扩张型心肌病安全可行,可延长6min步行路程,减小LVEDd。 相似文献
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目的:探讨超顺磁性氧化铁纳米颗粒(superparamagnetic iron oxide nanoparticles,SPIONs)铁羧葡胺(SHU555A,商品名为Resovist)标记大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的有效性及安全性。方法:分离培养大鼠骨髓MSCs,将其与50μg/mL Resovist共孵育24 h,并暴露于中心表面磁感应强度0.6 T磁场,采用普鲁士蓝染色、细胞透射电镜、原子吸收分光光度法检测细胞标记效率,采用细胞增殖试验及细胞活力检查观察细胞的标记毒性。结果:大鼠MSCs经Resovist标记后,普鲁士蓝染色显示,细胞内均可见大量着色颗粒,标记率接近100%;电镜检查显示,胞质内有含铁致密颗粒囊泡,未见氧化铁对细胞微细结构的破坏和毒性作用;原子吸收分光光度法测定结果显示,细胞平均铁含量(21.77±3.62)pg。Resovist标记和外加磁场对细胞增殖能力、细胞活力均无明显影响。结论:Resovist标记大鼠骨髓MSCs高效、安全,在细胞磁靶向方面具有临床应用潜力。 相似文献