差异蛋白质组学样品的制备

差异蛋白质组学是运用蛋白质组研究手段,对正常和病理状态下组织或细胞中蛋白质表达数量、位置和修饰状态的差异比较,发现与病理状态或疾病相关的特异蛋白质。差异蛋白质组学可阐明某些疾病的发病机制,筛选肿瘤特异性标记,发现新治疗靶点等,对肿瘤早期诊断、治疗有重要意义。而蛋白质样品的制备又是实验中最关键的一步。     

胰头与十二指肠的血供关系及其临床意义

目的　了解胰头及十二指肠的血管走行,为在DPPHR术中如何保护十二指肠的血供及是否行Kocher操作提供更多的形态学资料。 方法　随机选取40具尸体,充分解剖暴露肠系膜上动脉、胃十二指肠动脉及胰十二指肠前后动脉弓,对供应十二指肠的动脉及伴行的静脉行径进行仔细观察和记录。 结果　在97.5%的标本中（n=39）, 胰十二指肠后动脉弓及伴行的静脉均位于胰后筋膜内;在90%的标本中（n=36）, 胰十二指肠下前动脉及伴行的静脉走行于胰十二指肠沟内,易于保留;在个别标本中（10%, n=4）, 没有完整的胰十二指肠前动脉弓;其中1例标本（2.5%,n=1）,没有完整的胰十二指肠后动脉弓,但供应十二指肠的动脉及其伴行静脉仍位于胰后筋膜内。 结论　DPPHR手术的关键在于保留胰十二指肠后动脉弓,同时尽可能地保留部分胰十二指肠前动脉弓,而Kocher操作有利于保护胰十二指肠后动脉弓;在个别标本中,没有完整的胰十二指肠前动脉弓,此时施行DPPHR可能伤及十二指肠血供,导致手术失败。     

人胆汁双向凝胶电泳分离技术的建立与优化

背景：双向凝胶电泳是目前最好的蛋白质分离方法,然而胆汁样品中的盐、脂和蛋白酶对双向凝胶电泳干扰较大,影响电泳图谱的重复性。 目的：通过对胆汁样品双向凝胶电泳的几个关键环节的分析,建立起一种适合于有效分离胆汁蛋白质的双向凝胶电泳分离方法。 设计、时间及地点：胆汁双向凝胶电泳图谱对照实验,于2008-03/11在重庆市神经病学重点实验室完成。 材料：胆汁标本取自于重庆医科大学附属第一医院肝胆外科,于肝移植过程中从供体中取得。 方法：将标本分别按3种不同方法进行处理：①2D-Clean-up试剂盒处理胆汁标本：用裂解液,7 mol/L尿素,2 mol/L硫脲,质量浓度为0.4 g/L的过硫酸铵,65 mmol/L二硫苏糖醇,质量浓度为0.2 g/L的载体两性电解质溶解沉淀过夜。②在胆汁标本中加入4倍体积的预冷丙酮,用预冷的丙酮洗涤沉淀,然后用真空冻干机抽干,用裂解液溶解沉淀过夜。③在胆汁标本中加入4倍体积的预冷三氯乙酸/丙酮混合液,用预冷的丙酮洗涤沉淀,然后用真空冻干机抽干,用裂解液溶解沉淀过夜。经过一维等电聚焦和二维SDS-PAGE电泳分离人胆汁蛋白质组。将切取的蛋白质点进行脱色,酶解,萃取,冷冻抽干后,进行质谱鉴定。 主要观察指标：胆汁双向电泳图谱上蛋白质点数目,位置及重复性的比较。 结果：3种方法均能得到理想的一向电泳等电聚焦,与单纯的丙酮沉淀法相比较,但三氯乙酸/丙酮沉淀法损失了较多的中小分子量的蛋白质,因此不适合于胆汁标本的处理。与2D-Cleanup试剂盒处理法相比,丙酮沉淀法纯化胆汁内盐、脂较丰富,去除干扰成分,具有较好的效果,具有成本低廉、操作简便等优势。 结论：通过优化胆汁蛋白质提取、上样量和双向电泳重复性检测等步骤,建立了人胆汁双向凝胶电泳的方法,丙酮沉淀与双向凝胶电泳技术的结合是获取人胆汁蛋白质组的一种有效方法。     

急性胆管炎合并药物性肝损伤导致急性肝功能衰竭1例

<正>患者男,36岁。因腹痛腹胀1个月,皮肤巩膜黄染1周于2015年7月22日入院。1个月前出现上腹部剧烈绞痛,伴腹胀、恶心、呕吐,食欲欠佳,巩膜稍黄染于院外诊断为胆囊结石伴胆囊炎,给予对症治疗。因反复上腹部剧烈绞痛,自行服用布洛芬止痛(每天大概10片左右)后黄疸加重,尿色加深。体检:神     

《肝胆胰外科杂志》稿约

正《肝胆胰外科杂志》由浙江省教育厅主管,温州医科大学主办,1989年创刊,双月刊,逢单月25日出版,国内外公开发行(ISSN1007-1954,CN33-1196/R)。本刊被国家科技部列为"中国科技论文统计源期刊"(中国科技核心期刊),并被美国《化学文摘》、美国《乌利希期刊指南(网络版)》、波兰《哥白尼索引》、中国科技论文与引文数据库、中国核心期刊(遴选)数据库、中国生物医学数据库、中国学术期刊(光盘版)检索与评价数据库、中国期刊全文数据库、万方数字化期刊群等国内外多家权威数据库收录。本刊多次获浙江省优秀科技期刊一等奖,在浙江省卫生高级专业技术资格评审医药卫生刊     

人肝肿瘤耐药细胞亚系建立及生物学特性研究

目的:以阿霉素(DOX)诱导建立人肝肿瘤细胞系HepG2的多药耐药亚系HepG2/DOX,并对HepG2/DOX的生物学特性及耐药机制进行研究.方法:以浓度梯度递增方法,用DOX诱导HepG2产生耐药性.显微镜观察细胞形态,绘制生长曲线,作染色体常规及G带分析.MTT法检测HepG2、HepG2/DOX细胞对抗癌药物的敏感性.应用免疫组化法检测MDR-1基因产物PgP的表达.结果:HepG2/DOX与HepG2在形态上染色体数目和结构均有差异.细胞可在EOX浓度为0.1μg/ml培养基内生长,但生长速度减慢.DOX、顺铂(CDDP)、丝裂霉素(MMC)、氟脲嘧啶(5-FU)、氨甲喋吟(MTX)对HepG2、HepG2/DOX细胞的IC50值(μg/ml)分别为(0.070和1.161)、(0.214和1.317)、(0.162和0.498)、(0.313和1683)、(0.007和0.217).HepG2/DOX细胞PgP表达增高.在无DOX培养基内生长5周后,DOX对HepG2/BOX的IC50值(μg/ml)为0.684.结论:HepG2/DOX有多药耐药的特点,其耐药性与Pgp的表达增高及倍增时间延长有关.     

改良袖套法建立异种心脏颈部移植模型

目的:采用改良Heron袖套法建立小鼠→大鼠异种心脏颈部移植模型.方法:选择NIH小鼠和Wistar大鼠分别作为供体和受体.用聚乙烯套管将小鼠升主动脉与大鼠右颈总动脉端端套入吻合,同法将小鼠肺动脉与大鼠右颈外静脉端端套入吻合,以建立小鼠→大鼠颈部异位心脏移植模型.结果:进行移植手术30次,成功率93.3%.移植后心脏平均存活时间2.13±0.8天.结论:改良袖套法操作简单、迅速、稳定、便于观察,是较理想的动物模型.     

脾脏大小对免疫性血小板减少症患者脾切除术后短期疗效的影响

目的探讨脾脏大小对免疫性血小板减少症(ITP)患者脾切除术后短期疗效的影响。方法选取2013年4月～2017年10月期我院行脾切除术治疗的67例ITP患者,根据患者脾脏体积指数分为正常组(<600cm~3)与脾大组(> 600cm~3),对两组患者的短期起效率(30d起效率)的比较采用χ~2检验。结果 67例患者中,28例脾脏大小正常,39例脾脏增大。脾大组短期起效率76.92%高于正常组短期起效率53.57%,差异有统计学意义(P <0.05)。结论脾切除术是一种治疗ITP安全、有效的治疗方法。脾脏大小是一项能有效预测ITP患者脾切除短期疗效的指标。     

胰腺癌肝转移患者多学科综合治疗临床分析

目的 对胰腺癌肝转移患者的临床特征及不同治疗模式分析,探讨不同治疗模式对患者生存预后的影响。方法 回顾性分析2009年1月至2012年1月重庆医科大学附属第一医院64例胰腺癌肝转移患者的临床资料,对其临床特征和治疗模式分别用Kaplan-Meier法及Cox模型进行单因素及多因素分析。结果 64例患者总的中位生存时间（median survival time, MST）为4月,6月、1年及2年生存率（overall survival, OS）分别为39.1%、21.9%和7.8%。单因素分析显示,年龄、疼痛、厌食、CA19-9水平、ALT和GGT水平、手术、介入化疗栓塞/介入化疗、积极治疗及多学科综合治疗是预后影响因素。多因素分析示：肝外转移、疼痛、CA19-9、积极治疗、手术、介入化疗栓塞/介入化疗及多学科综合治疗与生存预后密切相关。结论 对胰腺癌肝转移患者,疼痛、CA19-9≥1 000 u/ml及合并肝外转移提示预后不良。积极治疗、手术、介入化疗栓塞/介入化疗及多学科综合治疗可明显提高患者生活质量,延长生存时间。