敲低Txnip抑制高糖诱导的人肾小管细胞系凋亡

目的观察敲低Txnip对高糖诱导人肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法将体外培养人肾小管上皮细胞分为正常糖组、高糖组、高糖+质粒载体对照组及高糖+shRNA组。采用原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡;流式细胞术检测细胞ROS水平;Western blot检测caspase-3、cleaved caspase-3、BAX、BCL-2、P38 MAPK、P-P38 MAPK及细胞色素c的表达。结果与正常糖组相比,高糖组肾小管上皮细胞ROS产生和细胞凋亡明显增加(P0.01),cleaved caspase-3和P-P38 MAPK表达增高,BAX/BCL-2比率明显升高以及细胞色素c易位(P0.05)。敲低Txnip能够显著抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡和ROS产生,下调cleaved caspase-3、和P-P38MAPK的表达,减少BAX/BCL-2比率和细胞色素c易位(P0.05)。结论敲低Txnip能够抑制高糖诱导的人肾小管上皮细胞凋亡可能是通过减少ROS产生,保护线粒体功能,抑制P38MAPK信号通路激活而实现的。     

糖尿病大鼠肾脏组织中XBP-1 s和ADRP的表达

目的：探索糖尿病大鼠肾脏拼接型X盒子结合蛋白1(spliced X-box binding protein-1, XBP-1s)和脂肪分化相关蛋白( adipose differentiation related protein, ADRP)在糖尿病大鼠肾脏组织中的表达及二者表达的相关性。方法腹腔注射STZ成功构建糖尿病大鼠模型,正常喂养2个月后,采用免疫组化和Western blot技术检测大鼠肾脏组织中XBP-1s和ADRP的表达。结果 XBP-1s和ADRP表达均定位于肾小管上皮细胞,对照大鼠相比,糖尿病大鼠肾小管上皮细胞中XBP-1s和ADRP表达均显著增高,分别升高2.017倍和1.544倍,差异有统计学意义(t=2．648、2．741,P<0．05)。进一步行相关性分析显示：大鼠肾脏组织中XBP-1s表达增强往往伴随着ADRP的表达增强(相关系数为0．723,P<0．05)。结论 XBP-1s表达升高可能是导致糖尿病大鼠肾脏组织中ADRP上调的因素之一。     

糖尿病肾病大鼠肾小管上皮细胞转化与肝细胞生长因子的表达

目的 探讨糖尿病肾病时肾小管上皮细胞转化的现象以及肝细胞生长因子（HGF）在其中可能发挥的作用。方法 腹腔注射链脲佐菌素诱发大鼠糖尿病模型，采用免疫组化检测角蛋白18（CKl8）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、HGF的表达；流式细胞术检测α-SMA、HGF的表达；原位杂交检测HGFmRNA的表达；Western印迹检测肝细胞生长因子受体（c-met）的表达。结果 糖尿病组较对照组CK18的表达降低，α-SMA的表达上升，HGF、c-met、HGFmRNA在8周时表达上升，之后其表达逐渐减少。结论糖 尿病时，肾小管上皮细胞亦可发生表型转化，转化为肌成纤维细胞。     

MAPK信号转导途径在糖尿病肾病发病中的作用

糖尿病状态下多种因素的作用激活MAPKs4,促进肾脏细胞肥大 ,ECM积聚 ,导致肾小球硬化和肾小管间质纤维化。应用MAPKs阻断剂可对抗上述作用 ,为临床治疗糖尿病肾病提供一条新的思路。     

氯沙坦抑制转录因子GADDl53/CHOP的激活在糖尿病大鼠肾脏中的保护作用

目的探讨血管紧张素Ⅱ受体1拮抗剂氯沙坦对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及转录因子GADDl53/CHOP表达的影响。方法单侧肾切除大鼠腹腔注射链脲佐菌素诱发糖尿病,每日灌胃给予氯沙坦(40 mg.kg-1)共8周。应用免疫组织化学检测细胞增殖核抗原(Proliferating cell nuclear anti-gen,PCNA)、GRP78和转录因子GADDl53/CHOP的表达与定位,TUNEL染色检测细胞凋亡部位,流式细胞术检测细胞凋亡程度,并对GRP78、GADDl53/CHOP表达水平进行半定量分析,同时观察尿蛋白、BUN、Scr、Ucr等反应肾功能的相关指标。结果建模8周,糖尿病组大鼠较对照组肾小球、肾小管凋亡细胞数明显增多,GRP78、GADDl53/CHOP表达增强。氯沙坦治疗组较糖尿病组凋亡细胞数减少,GRP78表达减弱,明显抑制GADDl53/CHOP的表达。3组间PCNA阳性细胞数无差异。结论氯沙坦部分通过影响内质网应激中GADDl53/CHOP凋亡途径减少肾脏细胞凋亡,从而发挥肾脏保护作用。     

SREBP-1和SREBP-2在Ⅰ型糖尿病大鼠肾脏中的表达

目的:探讨糖尿病大鼠肾脏脂质沉积和固醇调节元件结合蛋白-1和-2（SREBP-1, SREBP-2）的表达。方法:以Wistar大鼠建立链脲佐菌素Ⅰ型糖尿病模型,测定肾组织甘油三酯和胆固醇含量,采用油红O染色检测脂质沉积的定位;用免疫组织化学和Western blotting检测SREBP-1、SREBP-2蛋白的表达;SREBP-1 mRNA测定采用原位杂交技术。结果:成功构建了Ⅰ型糖尿病大鼠模型,甘油三酯含量在1、2、4、8周均出现了明显升高,而肾脏胆固醇含量没有明显变化。油红O检测发现糖尿病大鼠肾脏近曲小管上皮细胞内出现明显脂滴,而肾小球内未见有脂滴染色。免疫组织化学检测发现,SREBP-1定位于糖尿病大鼠肾脏近曲小管上皮细胞胞浆,肾小球内未见有棕黄色颗粒。Western blotting进一步检测了SREBP-1蛋白的表达,结果发现糖尿病大鼠肾组织在4个时点均呈高表达,相似地,SREBP-1 mRNA的检测应用原位杂交技术,结果证实其定位于肾小管上皮细胞胞浆,而肾小球内未见着色。与正常对照组相比,糖尿病组大鼠肾脏SREBP-1 mRNA表达明显升高,差异显著。结论:Ⅰ型糖尿病大鼠肾小管上皮细胞SREBP-1 mRNA和蛋白表达升高可能参与了肾脏代谢异常。     

白细胞介素-1β在人肾小管上皮细胞转分化中的作用及Janus激酶2抑制剂AG490的影响

目的 探讨Janus激酶2抑制剂AG490对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响. 方法 将体外培养人肾近曲小管上皮细胞株(HKCs)分为空白对照组、IL-1β(5 ng/ml)刺激组及AG490干预组(IL-1β 5 ng/ml+AG490 10 μmol/L).分别于处理后24、48、72 h收集细胞,采用免疫细胞化学染色和蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测细胞角蛋白-18(CK-18)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达. 结果 正常肾小管上皮细胞内其自身标志物CK-18高表达(1.25±0.08),而α-SMA表达很少(0.17±0.01).IL-1β刺激组随刺激时间延长CK-18表达逐渐减少(24 h:0.69±0.04,48 h:0.52±0.03,72 h:0.30±0.01),而α-SMA蛋白合成逐渐增加(24 h:0.56±0.04,48 h:1.05±0.07,72 h:1.43±0.07),与空白对照组比较差异均有统计学意义(均P＜0.05).AG490干预能使CK-18的表达逐渐恢复(24 h:1.07±0.07,48 h:0.93±0.06,72 h:0.83±0.06),并减弱IL-1β对肾小管上皮细胞α-SMA蛋白的诱导作用(24 h:0.33±0.01,48 h:0.52±0.01,72 h:0.61±0.04),且作用显著(均P＜0.05).免疫细胞化学染色观察结果与其一致. 结论 炎症因子IL-1β通过降低肾小管上皮细胞CK-18表达,上调α-SMA表达,促使肾小管上皮细胞转分化为肌成纤维细胞;Janus激酶2抑制剂AG490能部分阻断IL-1β对肾小管上皮细胞的促转分化作用.     

大龄儿童先天性髋脱位术后功能锻炼

大龄儿童先天性髋脱位一直是骨科治疗的难点,原因之一就是手术后的髋关节功能障碍。术后早期的正确的功能锻炼则能最大限度地避免这一并发症的发生。1　临　床　资　料1.1　术后功能锻炼:本组共16例,20髋。年龄8～12岁,平均10.5岁。女性13例,男性3例。左髋12例,右髋8例。?..     

卵巢上皮性癌P53和c—erbB—2的表达及其临床意义

目的：探讨卵巢上皮性癌（简称卵巢癌）Ｐ５３和ｃ－ｅｒｂＢ－２表达的临床意义。方法：用免疫组织化学法检测Ｐ５３和ｅ－ｅｒｂＢ－２,结合临床病理及肿瘤的生物学行为进行分析。结果：Ｐ５３在高分化卵巢癌中的表达频率显著低于中,低分化癌,Ｐ５３表达阳性组的卵巢癌对化疗不敏感,其预后亦明显劣于阴性卵巢癌。卵巢癌的ｃ－ｅｒＢ－２表达与临床期别,组织学类型和分级,残余瘤大小,化疗疗效和预后均无显著相关性,结论：Ｐ     

自噬与糖尿病肾病关系的研究进展

糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)作为糖尿病最常见并发症之一,发病机制复杂,严重危及糖尿病患者的生命健康。研究发现自噬与DN的发生存在一定的关联性;然而,相关基础研究仅处于认识阶段,仍需进一步深入探讨。因此,对DN发病机制及有效治疗方法的研究已经成为代谢性疾病领域的重要研究课题。近年来,随着糖尿病发病率在全