多种药物联合治疗糖尿病周围神经病变的观察

目的观察α-硫辛酸与甲钻胺联合应用治疗糖尿病周围神经病变的疗效。方法将84例糖尿病周围神经病变患者随机分为两组。治疗组应用α-硫辛酸、甲钻胺治疗,对照组应用甲钴胺、胰激肽原酶注射剂（怡开）治疗。结果治疗组总有效率为85．7％,对照组总有效率为69．0％（P〈0．05）;两组感觉运动神经传导速度比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论α-硫辛酸、甲钴胺治疗糖尿病周围神经病变优于甲钴胺、胰激肽原酶肠溶片治疗糖尿病周围神经病变。     

RNA干扰沉默DDX1基因的胶质瘤细胞系的建立

目的以短发夹核糖核酸(RNA)慢病毒载体建立DEAD-box解旋酶1(DDX1)基因稳定沉默的胶质母细胞瘤细胞株。方法针对DDX1基因设计2组短发夹RNA序列,退火形成的双链DNA与线性p LKO. 1-puro-e GFP质粒载体连接,构建慢病毒质粒载体,测序正确后进行慢病毒包装;将获得的重组慢病毒转染人胶质瘤U251细胞,转染细胞分为对照组和干扰组,对照组转染对照慢病毒(sh NC);干扰组转染慢病毒载体p LKO. 1-puro-e GFP-shRNA-DDX1(sh DDX1-1,sh DDX1-2)。用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达,进行嘌呤霉素抗性筛选;用实时定量聚合酶链式反应(PCR)、蛋白免疫印迹法检测转染后U251细胞中DDX1 mRNA及蛋白表达。结果测序证实成功构建对照组和靶向DDX1基因的RNA干扰(RNAi)慢病毒载体,病毒悬液滴度均> 3×10~8TU·m L^-1。荧光显微镜下观察显示,对照组和干扰组转染效率高于85%;嘌呤霉素筛选后,干扰组sh DDX1-1、sh DDX1-2中DDX1 mRNA的抑制率分别为85. 44%和71. 66%,DDX1蛋白表达水平分别下降了99. 1%和96. 7%,均较对照组(100%)显著降低(均P <0. 01)。结论成功构建沉默DDX 1基因的胶质瘤细胞系,为研究DDX1对胶质瘤生物学行为的影响提供细胞模型。     

肾上腺转移性肺腺癌四例临床病理学和分子特征分析

目的观察肾上腺转移性肺腺癌的临床病理学特征,并了解其驱动基因的变化。方法收集苏州大学附属第二医院病理科2015年12月至2018年9月诊断的4例肾上腺转移性肺腺癌临床病理学资料,采用HE染色、免疫组织化学及二代测序等方法观察组织学、免疫表型及分子病理学特征,并结合文献进行总结。结果4例患者男性3例,女性1例,年龄51~62岁(平均年龄58岁)。镜下观察:肿瘤细胞排列呈筛状、腺泡状、巢状及实性片状分布,细胞异型性显著,肿瘤组织坏死明显。免疫组织化学结果表明4例均不同程度表达肺组织标志物。二代测序检测结果示,有3例患者的原发肺癌和肾上腺转移癌之间的驱动基因变异存在差异。4例患者随访时间21~73个月(平均40个月),3例存活,1例死亡。结论肺癌转移至肾上腺的病例相对少见,易造成漏诊,确诊依赖HE形态及免疫组织化学诊断,并需与其他肾上腺肿瘤进行鉴别,原发肺癌和肾上腺转移癌的驱动基因变异存在差异,患者预后较差。     

导师制在助产士临床实践培训中的实施与效果

目的探讨一对一导师制在助产士临床实践培训中的应用效果。方法采用目的抽样法选取2016年9月—2017年9月在河南省某三级医院参加培训的54名助产士为研究对象,采用一对一导师制进行临床实践培训,经3个月培训后,比较助产士核心胜任力和一般自我效能感。结果培训后,助产士核心胜任力的总均分为(4.14±0.33)分,助产士一般自我效能感总分为(29.19±5.74)分,均高于培训前(P0.01)。结论对助产士采用一对一导师制临床实践培训,能有效提高其核心胜任力和自我效能感。     

天麻钩藤饮含药血清对MPP+诱导PC12细胞凋亡JNK通路的影响

目的:观察天麻钩藤饮含药血清对1-甲基-4-苯基-吡啶离子(1-methyl-4-phenyl pyridinium,MPP~+)诱导的PC12细胞凋亡的影响,并且探讨其是否通过c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路发挥神经保护作用。方法:将32只SD大鼠随机分为空白组、天麻钩藤饮低、中、高剂量组,每组8只。天麻钩藤饮按照5.7,11.4,22.8 g·kg-1灌胃,空白组灌胃等体积生理盐水,采血制备空白和含药血清。PC12细胞常规培养并分为空白组、模型组、天麻钩藤饮含药血清低、中、高剂量组,空白组和模型组加空白血清,其他3组加10%的天麻钩藤饮含药血清,孵育30 min后,模型组和含药血清组再加500μmol·L~(-1)MPP~+共孵育48 h后收集细胞,采用Cell Titer 96Aoueous MTS Reagent powder(MTS法)检测细胞存活率。后续实验分为5组,即:空白组,MPP~+组,MPP~++含药血清高剂量组,MPP~++SP600125组,MPP~++含药血清高剂量+SP600125组,采用Annexin VFITC/PI双染色法检测细胞凋亡,分光光度法检测细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活性,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测JNK,p-JNK,c-Jun,p-c-Jun蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组细胞活力明显降低(P0.05);与模型组比较,10%的天麻钩藤饮低、中、高剂量含药血清组细胞活力显著增加(P0.05)。后续试验中,与空白组比较,MPP~+组细胞凋亡率,Caspase-3活性,p-JNK和p-c-Jun蛋白表达明显升高(P0.05)。与MPP~+组比较,MPP~++含药血清高剂量组,MPP~++SP600125组均能够使细胞凋亡率,Caspase-3活性,p-JNK和p-c-Jun蛋白表达明显降低(P0.05),而MPP~++含药血清高剂量+SP600125组的作用明显高于MPP~++含药血清高剂量组(P0.05),但不高于MPP~++SP600125组。JNK和c-Jun蛋白表达无明显变化。结论:天麻钩藤饮含药血清对MPP~+诱导的PC12细胞的凋亡具有保护作用,其机制可能与JNK信号通路密切相关。     

岩大戟内酯B对人乳腺癌Bcap37细胞凋亡的影响

目的:探讨岩大戟内酯B(jolkinolide B)诱导人乳腺癌Bcap37细胞凋亡及其可能机制。方法:分别应用MTT和AnnexinV-FITC/PI双染法检测jolkinolide B对Bcap37细胞的生长抑制率和细胞凋亡率;用流式细胞仪检测线粒体膜电位和细胞内游离Ca2+浓度的变化;RT-PCR检测jolkinolide B对Bcap37细胞caspase-3mRNA表达的影响。结果:jolkinolide B可显著抑制Bcap37细胞的增殖,呈剂量和时间效应关系;随jolkinolide B剂量增加,细胞凋亡率明显增加;线粒体膜电位下降,并伴有细胞内游离钙浓度增加,与对照组相比差异显著(P<0.01),同时caspase-3mRNA表达水平明显增高。结论:jolkinolide B可通过提高细胞游离Ca2+水平,激活内源性线粒体信号转导途径而诱导Bcap37细胞凋亡。     

D2-40、C-erbB-2、p53在大肠癌中的表达及意义

目的 探讨D2-40阳性表达的淋巴管密度(LVD)、C-erbB-2和p53蛋白在大肠癌组织中的表达情况及其生物学意义.方法 采用高通量组织芯片技术及免疫组化SP法检测115例大肠腺癌组织(腺癌组)、19例大肠腺瘤组织(腺瘤组)和12例正常大肠黏膜组织(正常组)中D2-40阳性表达的LVD、C-erbB-2和p53蛋白的表达.结果 腺癌组中,D2-40阳性表达的LVD、C-erbB-2和p53蛋白的阳性表达率均明显高于腺瘤组和正常组[(24.16±8.43 vs.16.78±5.29和12.54±4.62)、(15.65％ vs.10.53％和0)和(63.48％ vs.21.05％和16.67％)](P＜0.05).D2-40阳性表达的LVD、C-erbB-2和p53蛋白在大肠腺癌中的表达与其分化程度、浸润程度、Dukes分期及淋巴结转移有关.结论 D2-40、C-erbB-2和p53蛋白过表达在大肠癌的发生、发展中起重要作用,可为大肠癌的早期诊断、治疗及预后的判断提供了参考依据.     

二冬颗粒对糖尿病大鼠脂代谢紊乱的改善与防治作用的实验研究

目的通过观察二冬颗粒对糖尿病大鼠脂代谢紊乱血清载脂蛋白（Apo）、胰岛素敏感指数（ISI）等影响,来探讨二冬颗粒改善与防治糖尿病脂代谢紊乱的作用机理。方法通过腹腔注射小剂量的链脲佐菌素（STZ）,用高脂和高热量饲料喂养的方法建立糖尿病脂代谢紊乱大鼠模型,并将造模成功的30只大鼠随机分为二冬颗粒组、盐酸二甲双胍组（Mfm）和模型对照组,然后连续给药8周,另外10只正常大鼠作为正常对照组,检测其有关的生化指标。结果与正常组相比,模型组大鼠血清载脂蛋白AI（ApoAI）含量及胰岛素敏感指数（ISI）均降低,血清载脂蛋白B（ApoB）、空腹血清胰岛素（FINS）含量升高,差异均具有显著性（P〈0.05或P〈0.01）。而给二冬颗粒药物后均有明显改善。结论二冬颗粒可在一定程度上能改善和防治糖尿病脂代谢紊乱。     

荧光素酶基因标记乳腺癌细胞系鉴定

目的 利用三阴性人乳腺癌MDA-MB-231细胞,对稳定表达荧光素酶的细胞系MDA-MB-231-Luc进行功能评价及鉴定.方法 构建荧光素酶的HIV慢病毒载体,体外感染乳腺癌MDA-MB-231细胞,经嘌呤霉素筛选后得到稳定表达的细胞系,采用MTT法,利用Transwell侵袭模型,应用伤口愈合细胞划痕实验评价细胞增殖、侵袭和转移能力.结果 利用慢病毒转染的MDA-MB-231细胞能稳定表达荧光素酶,与亲本细胞相比,细胞的增殖、侵袭、迁移能力无显著影响(P>0.05).结论 慢病毒感染乳腺癌细胞能稳定表达荧光素酶,对MDA-MB-231细胞的增殖、侵袭、转移能力无明显影响,为后续的小动物活体成像实验提供细胞模型.     

中药对巨噬细胞功能影响的若干研究进展

巨噬细胞是机体免疫系统的重要细胞成份,具有吞噬、杀伤、递呈抗原、分泌生物活性物质、调控局部组织微环境以及抑制肿瘤等多种功能,构成了机体非特异防御的基础。近年来,随着中药抗肿瘤研究热潮的掀起．中药对巨噬细胞功能的影响也越来越受到广泛的关注。