改良的小鼠白血病病毒定性和定量方法的建立

病毒的定性和定量方法是研究小鼠白血病病毒(MuLV)的重要手段。其中常用的方法有三类:①细胞分析:包括XO合胞形成试验,细胞原位杂交;②病毒分析:包括电镜观察病毒颗粒、分离和探测病毒核酸和蛋白;③转化分析:检测病毒对新生乳鼠的致白血病活性。其中XO合胞形成试验具有操作简便,特异性强的特点,是分析MuLV常用的方法。     

STUDY ON MOLECULAR BIOLOGY OF SRS LEUKEMIA VIRUS ISOLATED IN CHINA AND INHIBITORY EFFECT OF ANTISENSE OLIGODEOXYNUCLEOTIDES

This paper reviews the significant study on SRS leukemia virus (SRSV) in recent years in China. A series of results about the proteins, nucleic acids and function, CDNA libraries, molecular cloning of SRSV, and inhibitory effect of antisense oligodeoxynucleotides on SRSV are reported. It has proved that SRSV is useful to study the vival etiology and pathogenesis of human leukemial.     

小鼠L6565白血病克隆细胞株的建立及其生物学特性

目的建立Ｌ６５６５白血病克隆细胞株,为白血病的生物学、病毒学和实验治疗学提供体外研究模型。方法有限稀释法建成克隆细胞,从生长情况、染色体、形态、超微结构、Ｘ－Ｃ检测、癌基因表达及分化标志等方面了解其生物学特性。结果Ｌ６５６５细胞生长旺盛,形态大小不一,染色体条数从３８到１４４条不等,众数为４２条,有标记染色体Ａ、Ｂ、Ｍ。超微结构细胞内核仁清楚,细胞器丰富,核占３／４左右,细胞内有Ａ型和Ｃ型病毒颗粒,Ｘ－Ｃ检测阳性,ｃｍｙｃ、ｃｆｏｓ癌基因高表达,分化标志ＣＤ４和ＣＤ８阴性。结论我们成功地建立了含有致白血病病毒的Ｌ６５６５克隆细胞株,该细胞性质属于淋巴干细胞性白血病细胞。     

肝卵圆细胞的起源、标志物、调控和应用前景

 肝脏在机体内发挥着重要作用,包括糖和脂质代谢,血浆蛋白的合成和对内外源性毒物的解毒作用等。目前肝脏的慢性疾病是导致人类死亡的重要原因。肝脏依靠肝细胞的自我更新和肝卵圆细胞的增殖分化两大途径参与肝损伤的修复。然而,我们对肝卵圆细胞的起源、特异性标志物、信号通路的调控等方面依然尚未完全阐明。最近一些研究通过运用新的分离技术和基因系谱追踪技术对肝卵圆细胞的起源和生物学功能有新的发现。本文较详尽地对以上内容进行了综述。     

SRS淋巴瘤的SAC-ⅡB2克隆细胞株的生物学和诱导分化研究

目的和方法 :ＳＲＳ腹水瘤来源于本室建立的Ｌ6565病毒性白血病的胸腺悬液 ,移植成功率 1 0 0 %。继而应用ＳＲＳ腹水瘤细胞在体外建成ＳＲＳ - 82细胞系。许菡等对ＳＲＳ - 82细胞采用有限稀释法 ,经过培养建立了ＳＡＣ -ⅡＢ2克隆细胞株。经用抗淋巴细胞血清和多种单克隆抗体检测证明ＳＲＣ -ⅡＢ2为无Ｔ ,Ｂ细胞表面标记的淋巴干细胞。Ｘ -Ｃ生物学检测阳性 ,超薄切片在电镜下观察到Ａ型和Ｃ型病毒颗粒。 2× 1 0 6 个克隆细胞注射昆明种或ＳＷ - 1系小鼠腹腔或皮下 ,可发生腹水瘤或实体瘤。结果 :应用细胞诱导分化剂维甲酸 (ＲＡ)的研究…     

载脂蛋白E基因敲除小鼠钟基因、凋亡相关基因及动脉粥样硬化相关基因表达节律的改变

目的急性心肌梗死是动脉粥样硬化的终末病变,发病具有昼夜节律——早晨高发,这提示昼夜节律生物钟参与了这一病理过程。因此我们检测了动脉粥样硬化发展过程中生物钟基因、凋亡相关基因以及动脉粥样硬化相关基因的表达变化。方法应用载脂蛋白E基因敲除(载脂蛋白E-/-)小鼠建立动     

干扰SULT2B1对小鼠H22肝癌细胞增殖抑制作用的实验研究

目的研究羟基类固醇硫酸基转移酶SULT2B1对小鼠H22肝癌细胞增殖能力的影响及作用机制。方法用不同MOI值(50,100)的SULT2B1慢病毒干扰载体感染H22细胞,CCK-8法检测干扰SULT2B1对H22细胞增殖能力的影响,采用Real-time PCR和Western blot检测增殖相关基因BCL2和MYC的mRNA及蛋白表达水平。结果与对照组相比,干扰SULT2B1显著抑制H22细胞在不同时间点的增殖能力(MOI=100)(P<0.05)。不同MOI值(50,100)感染显著抑制H22细胞中SULT2B1基因的表达,并降低BCL2与MYC的mRNA及蛋白水平(P<0.05),但不同MOI值间各项指标的差异不明显(P>0.05)。结论干扰SULT2B1可抑制H22细胞的体外增殖能力,其作用主要与下调BCL2和MYC基因的表达水平有关。     

逆转录病毒介导的反义C-MYC的抗小鼠L6565白血病作用

目的和方法 :Ｌ6565白血病是我国特有的Ｔ -Ｓ -Ｚ淋巴瘤 /白血病系统中的实验系统的瘤株之一 ,经检测ｃ -ｍｙｃ基因高表达。本文针对ｃ-ｍｙｃ基因构建一个含有小鼠反义ｃ -ｍｙｃ基因片段的逆转录表达载体ｐＧＡＭ ,用磷酸钙沉淀法将ｐＧＡＭ导入表达包装细胞ＰＡ31 7,经筛选获得病毒效价 5× 1 0 5ｃｆｕ/ｍＬ的病毒包装细胞 ,利用ｐＧＡＭ病毒成功的感染了Ｌ6565细胞 ,得到了Ｇ41 8抗性细胞Ｌ6565-ａｓ ,经ＰＣＲ分析病毒载体序列稳定地整合到ＰＡ31 7和Ｌ6565-ａｓ中 ,能够长期表达。结果 :Ｌ6565-ａｓ和对照细胞光镜下形态均为圆形或…     

血管内皮生长因子及受体对肿瘤的抑制作用及基因治疗研究进展

血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）是一种特异性的、与血管形成有关的主要调节因子。血管的发生和生长在胚胎发育、创伤修复生理过程中或炎症、视网膜病和肿瘤的快速生长及转移等病理过程都起着重要作用。因此抑制血管生成已成为抗肿瘤治疗的一个新策略［１－３］，我们可以利用ＶＥＧＥ的反义核酸和中和抗体，或通过屏蔽ＶＥＧＦ受体等方法来抑制肿瘤的生长和转移。１ＶＥＧＦ的结构和功能ＶＥＧＦ是１９８９年Ｄａｖｉｄ等［４］首先从牛垂体滤泡星状细胞培养液中分高纯化出来的，并证明是由两个相同的多肽链通过二、硫键构成的同源二聚体糖蛋…