凉血通瘀方干预高血压大鼠急性脑出血模型对脑组织中差异miRNA表达的影响＊

目的 研究凉血通瘀方对高血压大鼠急性脑出血模型脑组织miRNA表达的影响，对差异表达的miRNA靶基因进行分析，探索凉血通瘀方可能的药效机制。方法 将自发性高血压大鼠随机分成对照组（B）和实验组（C）。适应性饲养一周后，C组灌胃凉血通瘀方，B组灌胃等体积生理盐水，连续5天，每天1次。构建脑出血模型后收集脑组织，借助全转录组测序技术获得miRNA表达量，与miRBase数据库比对获取已知miRNA，使用miRDeep2预测新miRNA。差异分析软件为DESeq2，筛选阈值为|log₂FC| ≥1 并且P <0.05。对显著差异表达的miRNA进行靶基因预测，对靶基因进行GO功能、KEGG通路富集和PPI网络分析。结果 实验组和对照组对比，共发现21个显著差异表达的miRNA，上调有9个，下调有12个，共预测得到1243个有统计学意义的靶基因。GO富集分析发现，生物过程中突触囊泡分泌的调节、神经递质分泌的调节和神经递质运输的调节占前三位，神经元投射终点、全膜、质膜区域和细胞投射则是主要的细胞成分。分子功能分别为小GTPase绑定、底物特异性跨膜转运蛋白活性和离子跨膜转运体活性。通路分析结果显示，靶基因在癌证通路、pI3K-Akt信号通路、人类乳头瘤病毒感染、神经活性配体-受体相互作用和MAPK通路等分布广泛。采用STRING网站和Cytoscape软件，根据MCC算法筛选出ADRA2C、CASR、CCL28、CCR1、DRD2、GNAT3、GRM2、DYNC1LI1、GABBR1、GNAI1等核心靶基因。结论 凉血通瘀方对脑出血急性期鼠脑组织内miRNA的表达有重要影响；显著差异表达miRNAs可能通过靶向核心基因调控凉血通瘀方干预急性脑出血的病理过程及预后。     

火针疗法联合祛疣方治疗多发性跖疣的疗效观察及对患者免疫功能的影响

目的 观察火针疗法联合祛疣方治疗多发性跖疣的临床疗效和对患者免疫功能的影响。方法 选取2018年6月-2020年10月在山东省威海市妇幼保健院、威海市立医院就诊的127例多发性跖疣患者，按照就诊先后顺序随机分为治疗69例和对照组58例。治疗组采用火针疗法联合祛疣方治疗，对照组采用液氮冷冻治疗，比较两组临床疗效及复发率，分别在治疗前及治疗结束后，应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清中白介素-2( IL-2) 、白介素-4( IL-4) 和γ干扰素( INF-γ) 的水平，并与36例健康人组比较。结果 （1）两组治疗后临床疗效及复发率比较，治疗组优于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。（2）两组细胞因子测定结果比较，治疗组治疗后 IL-2、4和INF-γ水平较治疗前明显上升,差异均有统计学意义(P＜0.05)；对照组治疗后较治疗前水平略有上升(P＜0.05)；两组治疗后比较，治疗组 IL-2、4和INF-γ水平明显优于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论 火针疗法联合祛疣方治疗多发性跖疣疗效显著，提高机体免疫功能，减少复发。     

清肝泻肺方治疗肝火犯肺增加流感病毒易感性的作用研究

本实验采用慢性拘束应激诱导的H1N1流感病毒易感的小鼠模型,模拟临床上情志郁结、肝火犯肺,研究清肝泻肺方(黛蛤散合黄芩泻白散)治疗流感病毒性肺炎的作用。小鼠感染流感病毒后观察21天内的生存和发病情况,并于感染后的第6天取部分小鼠肺脏检测病毒性肺炎和磷脂过氧化等指标。实验结果显示,清肝泻肺方能够缓解慢性拘束应激负荷H1N1流感病毒引起的小鼠生存率和健康率下降,抑制小鼠肺部流感病毒的复制、炎症因子的产生,降低磷脂过氧化水平,改善小鼠肺炎症状。利用中药网络药理学技术构建的清肝泻肺方活性化合物-作用靶点网络,结果显示,该网络包含171个单体化合物和260个靶点,涉及氧化应激、炎症和免疫等相关信号通路。以上结果表明,清肝泻肺方治疗流感病毒性肺炎的作用机制可能与其调控氧化应激有关。实验方案经暨南大学动物实验伦理委员会批准,所有程序均严格按照动物使用和护理的伦理原则进行。     

自拟补气养阴通络方联合手法按摩治疗糖尿病周围神经病变效果观察

目的：探究自拟补气养阴通络方联合手法按摩对糖尿病周围神经病变患者中医证候积分及震动感觉阈值的影响。方法：选取2018年5月至2019年5月收治的糖尿病周围神经病变患者86例，根据治疗方案不同分为对照组和观察组，各43例。对照组给予西医治疗，观察组于对照组基础上加用自拟补气养阴通络方联合手法按摩治疗。对比两组临床疗效，不良反应发生情况，治疗前后中医证候积分、糖尿病周围神经病变评分、震动感觉阈值，血清神经生长因子（NGF）、脑源性神经营养因子（BDNF）水平。结果：观察组治疗总有效率高于对照组（P＜0.05）；治疗后观察组中医证候积分、糖尿病周围神经病变评分均低于对照组（P＜0.05）；治疗后观察组左侧下肢、右侧下肢震动感觉阈值评分均低于对照组（P＜0.05）；治疗后观察组血清NGF、BDNF水平均高于对照组（P＜0.05）；两组不良反应发生率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：采用自拟补气养阴通络方联合手法按摩治疗糖尿病周围神经病变患者，可调节神经递质，改善患者症状，促进神经传导功能恢复，且安全性高。     

第553例 重度贫血—反复上腹痛—全身骨痛—爆发痛—皮肤痛觉过敏

本文报道1例青少年女性患者, 重度贫血, 诊断纯红细胞再生障碍性贫血(PRCA)3年, 糖皮质激素及环孢素治疗有效, 但因消化道不良反应多次减量或停药, 贫血反复复发。环孢素加量后1个月出现全身多发骨痛, 伴夜间爆发痛、皮肤痛觉过敏, 非甾体类抗炎药、阿片类止痛药均无效, 诊断为钙调磷酸酶抑制剂相关疼痛综合征, 停用钙调磷酸酶抑制剂改为西罗莫司治疗PRCA后贫血纠正, 加用苯磺酸氨氯地平口服后患者疼痛快速缓解。     

抗心磷脂抗体、抗β_(2)糖蛋白Ⅰ抗体与不明原因胚胎反复种植失败相关性分析

目的探讨抗心磷脂抗体(ACA-IgM;ACA-IgG)、抗β_(2)糖蛋白Ⅰ抗体(A-β_(2)GPI-IgM;A-β_(2)GPI-IgG)与不明原因胚胎反复种植失败的相关性。方法回顾性分析北部战区总医院2019年1—12月收治的不明原因胚胎反复种植失败的218例患者(B组)和接受胚胎移植且临床确定妊娠的321例孕妇(A组)的临床资料。记录两组研究对象的一般资料,并比较ACAIgM、ACA-IgG、A-β_(2)GPI-IgM、A-β_(2)GPI-IgG阳性率。结果A组ACA-IgM、ACA-IgG、A-β_(2)GPI-IgM、A-β_(2)GPI-IgG阳性率分别为3.11%(10/321)、4.67%(15/321)、1.87%(6/321)、1.56%(5/321),B组分别为6.88%(15/218)、8.25%(18/218)、3.66%(8/218)、3.21%(7/218)。两组ACA-IgM、ACA-IgG、A-β_(2)GPI-IgM、A-β_(2)GPI-IgG阳性率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论抗心磷脂抗体、抗β_(2)糖蛋白Ⅰ抗体与不明原因胚胎反复种植失败无明显相关性。     

Calm1基因敲除小鼠脑蛋白质组学特点及临床意义

目的探究钙调蛋白Calm1基因表达改变对小鼠脑组织蛋白表达谱的影响,挖掘与Calm1有密切靶向关系的功能蛋白及信号通路,并分析Calm1在神经系统疾病中的临床意义。方法PCR产物法初步鉴定小鼠基因型。提取野生型(WT,A组)、Calm1敲除杂合型(HE,B组)、Calm1敲除纯和型(HO,C组)小鼠脑组织的总蛋白,利用TMT标记蛋白质定量技术筛选出差异蛋白质(DEPs),再利用生物信息学技术对DEPs进行注释、富集和分析。结果C-A组脑组织中共鉴别出54个DEPs,其中23个上调,31个下调;C-B组鉴别出35个DEPs,其中19个上调,16个下调。GO分析显示,C-A组及其上调和下调的DEPs分别显著富集到多巴胺生物合成过程、蛋白质折叠和三羧酸代谢过程等条目。C-B组及其上调和下调的DEPs分别显著富集到线粒体内膜、突触结构组成、ATP代谢过程等条目。KEGG分析显示,C-A组及其上调和下调的DEPs分别显著富集到多巴胺能突触、坏死性凋亡、柠檬酸(TCA)循环等通路。C-B组及其上调和下调的DEPs分别显著富到神经退行性变途径-多种疾病、肌萎缩侧索硬化症、帕金森病等通路。STRING分析发现C-A组DEPs“Hsp90ab1”、C-B组DEPs“Cox4i1”关联度最高。结论Calm1敲除后显著改变脑组织中蛋白质表达特征并影响多条与神经退行性疾病关系密切的信号通路,这表明钙调蛋白异常表达在神经系统疾病的发病中起到重要作用。