黑顺片炮制过程中6种酯型生物碱的变化规律研究

研究黑顺片炮制过程中6种酯型生物碱的变化规律及特征图谱,为黑顺片的炮制原理研究奠定基础.采用Phenomenex Gemini C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-40 mmol·L-1醋酸铵(浓氨调pH 10.0)梯度洗脱,流速0.8 mL·min-,检测波长235 nm,进样量10 ～ 20 μL,测定6种酯型生物碱含量的变化以及建立炮制过程的特征图谱.随着炮制过程的进行,双酯型生物碱含量降低,单酯型生物碱变化规律不明显,各炮制过程环节的7种附子“状态”特征图谱差异明显.特征图谱中共标记13个峰,除6种已知单双酯型生物碱外,其余7个峰峰面积变化趋势与双酯型生物碱的变化趋势一致.该方法准确可靠,重复性好,可为揭示黑顺片炮制过程中指标成分的变化规律以及阐明炮制原理提供参考.     

基于AHP-熵权法优选黑顺片炮制工艺及生物碱类成分动态变化研究

目的 采用主观评价层次分析法（analytic hierarchy process，AHP）-熵权法优选黑顺片炮制工艺，探究炮制过程中生物碱类成分动态变化规律。方法 采用外观性状、水溶性浸出物、苯甲酰新乌头原碱含量、苯甲酰乌头原碱含量、苯甲酰次乌头原碱含量、双酯型生物碱总量作为评价指标，基于单因素考察结果，以煮制时间、水漂次数、蒸制时间、干燥温度为主要因素建立正交实验，通过AHP-熵权法优选黑顺片最佳炮制工艺参数。采用HPLC法对各炮制环节的附子进行含量测定，分析比较6种酯型生物碱的含量变化。结果 在质量分数20%以上的胆巴溶液中浸泡能达到防腐的目的，且浸泡20d以上附子的质量相对稳定。黑顺片炮制的最佳工艺条件为煮制时间8min，水漂次数4次，蒸制时间3h，干燥温度60℃；炮制过程中双酯型生物碱总量逐渐降低，泡胆和漂洗过程单酯型生物碱含量降低，煮制和蒸制过程单酯型生物碱含量升高。结论 实验优化所得的黑顺片炮制工艺合理、稳定、可行，炮制过程中各环节对酯型生物碱类成分均有不同程度的影响，可为进一步探讨黑顺片的现代炮制方法提供参考。     

采用傅里叶变换红外光谱和HPLC法分析附子炮制品黑顺片和白附片差异

目的 基于成分分析探讨黑顺片和白附片的差异。方法 基于傅里叶红外光谱（fourier transforms infrared,FTIR）和HPLC,结合化学计量学方法,对黑顺片和白附片的整体化学成分进行研究,并通过独立样本t检验对其有效和毒性成分含量进行比较分析。结果 FTIR结合正交偏最小二乘法判别分析（orthogonalpartialleastsquares-discriminationanalysis,OPLS-DA）结果显示,白附片和黑顺片整体化学成分差异明显,饮片类型的差异高于产地差异;HPLC的聚类分析（hierarchical clustering analysis,HCA）、主成分分析（principal component analysis,PCA）、OPLS-DA和相似度分析（similarity analysis,SA）均能将黑顺片、白附片区分为2类,表明2种饮片的成分差异较大;含量测定结果显示,黑顺片的单酯型生物碱量显著高于白附片,具有统计学意义（P<0.01）,而双酯型生物碱含量差异不显著,无统计学意义。结论 白附片和黑顺片化学成分差异较大,临床上应区...     

不同产地黑顺片醇提物对斑马鱼毒性和心率的影响

目的探讨不同产地黑顺片(四川江油、四川布拖、云南)对斑马鱼毒性和心率作用差异。方法将发育正常的胚胎期斑马鱼暴露在含有不同浓度的黑顺片提取物溶液中,分别在24、48、72、96 hpf阶段测定斑马鱼的心率、畸形率以及存活率等指标。结果不同产地黑顺片醇提物在一定浓度下,可使斑马鱼心率加快,出现畸形,存活率降低;其中以江油产黑顺片毒性最小,对心率的影响也较弱。结论生物学评价显示不同产地黑顺片醇提物对斑马鱼毒性和心率作用具有显著差异,其作用强弱与产地具有一定相关性,云南产地黑顺片毒性最大,江油产区最为温和,为黑顺片的临床应用提供一定的参考。     

炮附片HPLC特征图谱及炮制前后比较研究＊

目的 建立炮附片HPLC特征图谱，分析炮附片炮制前后物质基础差异。方法 AgilentExtend-C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)；乙腈（A）-40 mM乙酸铵缓冲液(氨水调PH为10.5)（B），梯度洗脱，检测波长为240 nm，柱温为30℃，进样量为20 μL。结果 建立了炮附片HPLC特征图谱。生附子经炮制成为黑顺片后，11个峰的峰面积显著减小，3种单酯型生物碱含量降低，3种双酯型生物碱基本检测不到。黑顺片经砂炒制成炮附片后，3种单酯型生物碱含量进一步降低，且无新成分峰出现。结论 生附子经炮制成为炮附片后，可使生附子的成分发生量变和质变。炮附片与黑顺片特征图谱基本一致，含量略有差别。     

基于“三步”理念的附片(黑顺片)分级的思路与实践

目的:根据中药饮片相关法规质量要求和传统分级经验,结合现代检测技术,提出一种创新性的饮片分级理念,并选择附片(黑顺片)为模型进行了实践.方法:选择不同产地黑顺片样品20批按照“三步”分级理念原则进行分级.第1步以性状、检查、含量测定等药典规定指标,确定统货级;第2步以大小(片长、片宽)和颜色(外部颜色E* ab、内部颜色E* ab)等外观指标,确定一级;第3步以道地性及更高级检查项为指标,确定优级.结果:运用该分级研究思路与方法,20批样品中除去3批不符要求者,划分为3个等级:2批为优级;7批为一级;8批为统货级.结论:提出的中药饮片分级的思路与方法可划分黑顺片等级,为附子其他饮片品种分级提供科学支撑,为中药饮片分级思路、技术方法提供借鉴.     

基于指纹图谱和化学计量法评价不同产地黑顺片的质量

目的基于指纹图谱和化学计量学对3个主产区(四川江油、四川布拖和云南)的35批黑顺片进行质量评价。方法采用HPLC建立黑顺片的指纹图谱和多组分含量的测定方法,色谱条件为AlltimaTMC18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);柱温:20℃;以乙腈-四氢呋喃(25∶15)为流动相A,0.1 mol·L^-1乙酸铵溶液为流动相B,梯度洗脱;检测波长:235 nm。根据指纹图谱确定黑顺片的共有峰,分别采用相似度评价、聚类分析和主成分分析对不同产地样品进行系统比较和评价。结果35批不同产地黑顺片样品指纹图谱的相似度均>0.900。35批样品可聚为3类,11批江油产样品聚为一类,布拖和10批云南产样品聚为一类,2批云南产样品聚为一类。2个主成分因子的累计方差贡献率为92.586%。结论四川江油产黑顺片与四川布拖、云南产存在一定差异性,可为黑顺片的质量评价提供参考。