循环肿瘤细胞的体外培养与应用

循环肿瘤细胞（circulating tumor cells, CTCs）是原发灶或转移灶中的癌细胞播散到循环系统所形成,在肿瘤早期诊断、转移复发监控、疗效评价中都有重要价值,尤其可成为转移干预的重要靶点。CTCs体外培养可为转移干预药物的筛选提供模型以及提高CTCs表型分析的精度。但目前CTCs的体外培养难度较大,成为制约该领域研究的瓶颈。未来本领域研究的首要任务是鉴别出真正导致转移的CTC亚群的分子特征,进而以之构建转移干预药物的体外筛选平台,从而提高转移干预的疗效。本文对CTCs的提取,培养方法,以及体外研究进展进行了系统综述,以期推动该领域的进展。     

非小细胞肺癌循环肿瘤细胞表达规律及其与“伏邪”致病关系的研究

目的明确非小细胞肺癌患者外周血中循环肿瘤细胞(CTC)的表达规律,探讨其与"伏邪"致病的关系。方法共纳入69例病例,采用微流控芯片方法捕获并检测外周血中CTC,分析其与临床分期、吸烟状态、病理类型的关系。结果 169例患者中,CTC阳性率达97.10%(每2 ml外周血中的CTC≥1个)。2Ⅰ-Ⅱ期与Ⅲ期、Ⅲ期与Ⅳ期之间CTC计数差异无统计学意义(P0.05);Ⅰ-Ⅱ期与Ⅳ期比较,CTC计数差异有统计学意义(P0.05);Ⅰ-Ⅲa期与Ⅲb-Ⅳ期比较,CTC计数差异有统计学意义(P0.05)。3相关分析结果显示,CTC水平与临床分期(Ⅰ-Ⅲa与Ⅲb-Ⅳ期)呈负相关(r_s=-0.253,P=0.036),与吸烟状态呈正相关(r_s=0.475,P0.001),与病理类型(r_s=0.05,P=0.681)、年龄(r=-0.099,P=0.416)未发现明显相关。结论 CTC与肺癌临床分期呈负相关,与吸烟状态呈正相关;CTC有望成为非小细胞肺癌术后的疗效预测和预后判断指标;CTC在体内的分布和致病特点具有与中医"伏邪"相似的特性,可为完善肺癌术后患者的中医药治疗策略提供新的思路。     

金复康“扶助正气、清透伏毒”预防肺癌转移的细胞学机制研究

目的 观察金复康冻干粉(JFK)对非小细胞肺癌(NSCLC)患者的“伏毒”——循环肿瘤细胞(CTC)的清除作用,并验证金复康干预CTC预防转移的假说。方法 从肺癌患者外周血中富集并培养CTC细胞系,然后以金复康干预CTC细胞,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞增殖,并检测克隆形成,以流式细胞术和激光共聚焦技术检测细胞凋亡与周期。结果 金复康能够显著以时间和浓度依赖性抑制CTC细胞增殖(P0.05);金复康可剂量依赖性显著抑制CTC细胞克隆形成(P0.05);金复康能够有效诱导CTC细胞发生凋亡(P0.01);高浓度组的金复康能够显著将CTC细胞增殖阻滞在S期(P0.05)。结论 金复康对NSCLC患者体内CTC具有显著的抑制作用,干预CTC可能是JFK防治NSCLC复发与转移的机制。     

肺癌循环肿瘤细胞的临床意义

转移是导致肺癌患者死亡的首因,而循环肿瘤细胞（Circulating tumor cells,CTCs）在形成远处转移过程中起关键作用。近年研究显示,CTCs可能成为肺癌诊疗的新兴标志物及治疗新靶点,本文从诊断与临床分期、转移与复发、个体化治疗与预后等方面阐述肺癌CTCs的临床意义,以期为肺癌治疗提供新策略。     

用于循环肿瘤细胞捕获的鱼骨型微流控芯片的模拟仿真与优化

目的通过对鱼骨型微流控芯片进行模拟仿真与优化,实现癌症患者外周血中循环肿瘤细胞的高效捕获。方法用Fluent 15.0软件对细胞在微流控芯片中的流动进行建模仿真,通过MATLAB编程统计芯片在不同结构参数(鱼骨宽度、鱼骨间隙、鱼骨高度、通道高度)、液体流动方向与流速等条件(共计250个条件)下所有细胞可被捕获的位置数目,预测细胞捕获效率,并进行实验验证。结果在鱼骨宽度75μm、间隙125μm、深度70μm、通道深度30μm、流体正向且流速1 m L/h的条件下,鱼骨芯片可以达到最高的细胞捕获效率。结论通过计算流体动力学方法对在不同芯片中的细胞捕获进行模拟,利用MATLAB建立捕获效率的统计模型并进行优化,快速筛选出可获得细胞高效捕获的参数组合,并通过实验,对优化的芯片参数进行验证,实现了循环肿瘤细胞的高效捕获。     

人非小细胞肺癌循环肿瘤细胞系的建立及意义—肺癌转移病因“伏毒”的本质研究

转移防控效率不高导致肺癌患者死亡率居高不下,由于对远处转移发生的“种子”—循环肿瘤细胞认识不足而不能实施精准干预是重要原因。课题组成功建立首例人非小细胞肺癌循环肿瘤细胞系—CTCTJH- 01,确定了其表型特征和生物学特征,并以此为基础构建肺癌转移研究的特异性研究平台,将提高肺癌转 移的转化研究水平,促进肺癌转移防治瓶颈的突破,同时丰富了肺癌转移核心病机“正虚伏毒”的内涵。