祖师麻肠溶微丸对结扎坐骨神经所致痛觉敏感大鼠背根神经节P2X4受体及P38MAPK表达的影响

目的:观察灌胃给予祖师麻肠溶微丸对CCI大鼠的MWT以及背根神经节中P2X4和P38MAPK受体的影响,探究祖师麻肠溶微丸治疗坐骨神经痛的机制。方法:术后第8天按MWT值对位随机分配法分为7组:Control组、Sham组、Model组、Positive Drug组、HEPZ组、MEPZ组和LEPZ组,于术后第8天开始灌胃给药。给药14 d后灌注固定,取背根神经节,免疫组化观察P2X4和P38MAPK的表达情况。结果:Model组在第8、14和20天MWT明显降低(P0.01)。与Model组相比,其余各组第14天MWT值出现显著差异(P0.01),20 d以后差异持续存在(P0.01)。免疫组化P2X4在背根神经节中的表达情况,各组均与Model组有统计学差异(P0.01),P38MAPK的表达情况除Positive Drug组外,各组与Model组相比,有明显差异(P0.05)。结论:口服祖师麻肠溶微丸可明显改善CCI模型,提高MWT,且背根神经节中P2X4和P38MAPK受体表达下调,提示祖师麻肠溶微丸有治疗坐骨神经痛的作用,其止痛的效果与P2X4-P38MAPK通路有关。     

气滞血瘀证大鼠舌部基因表达谱变化初探

目的采用基因芯片技术研究气滞血瘀证模型大鼠舌部全基因表达谱的变化以及差异基因涉及的生物过程和通路,以期为研究血瘀证相关理论和药物治疗提供科学依据。方法采用高脂饲料复合慢性不可预知刺激复制气滞血瘀动物模型,利用基因芯片技术分析正常大鼠与模型大鼠舌中全基因表达谱的变化以及所涉及通路。结果气滞血瘀证大鼠与正常大鼠比较,结果显示差异表达基因有277个,其中上调基因68个,下调基因209个。GO和Pathway分析结果显示气滞血瘀证分别与炎症、脂代谢、免疫反应等生物过程以及补体与凝血级联通路、PPAR信号通路、细胞色素P450异物代谢通路等7条通路的改变有关。结论 CYP450以及补体与凝血级联通路、PPAR信号通路中的差异基因可能涉及血瘀证的发病机制,为血瘀证以及相关药物的研究提供依据。     

藏药宽筋藤对炎性疼痛大鼠血清中炎性细胞因子及脊髓中NMDA受体表达的影响

目的观察藏药宽筋藤水提物对炎性疼痛模型大鼠的镇痛作用,探究宽筋藤治疗炎性疼痛的作用机制。方法大鼠按照随机数字法分为5组:正常组、模型组、醋酸泼尼松组、宽筋藤水提物高剂量组、宽筋藤水提物低剂量组,大鼠右后足注射完全弗氏佐剂造模24 h后,灌胃给药12 d,观察炎性疼痛模型大鼠的50%机械缩足痛反应值、热缩足反应时间和患足足跖肿胀率。末次给药1 h后灌注固定,取血清,ELISA方法测定白细胞介素-1α(IL-1α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达情况;取脊髓做免疫组化观察患侧背角N-甲基-D-天冬安酸(NMDA)受体表达情况。结果模型组大鼠与正常组比较患足足跖部明显肿胀(P<0.01);宽筋藤水提物高剂量(2.4 g/kg)可明显降低大鼠足跖的肿胀程度,与各时间点模型组比较差异有统计学意义(P<0.01)。模型大鼠热缩足反应时间明显降低,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.01);宽筋藤水提物不同剂量在各时间点均可明显延长大鼠热缩足反应时间,明显降低患肢处痛觉敏感程度,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01)。模型大鼠50%机械缩足反应值与对照组比较明显降低(P<0.01),宽筋藤给药组连续给药12 d期间内持续产生镇痛效果,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.01)。与正常组比较,模型大鼠血清炎症细胞因子IL-1α、TNF-α、IL-6含量明显增高(P<0.01),IL-10含量明显降低(P<0.01);给药12 d后,宽筋藤水提物可明显降低模型大鼠血清IL-1α、TNF-α、IL-6含量并升高模型大鼠IL-10含量,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01)。与正常组比较,炎性疼痛模型大鼠损伤侧的脊髓背角中NMDA受体表达增加(P<0.01);与模型组比较,宽筋藤水提物低、高剂量可明显降低炎性疼痛模型大鼠患侧脊髓中NMDA受体表达(P<0.01)。结论宽筋藤水提物可有效降低炎性疼痛大鼠对于温度和机械刺激的高敏感性,其抗炎镇痛机制与其降低外周炎性因子的产生及抑制NMDA受体表达有关。     

祖师麻片对牛Ⅱ型胶原诱导大鼠关节炎的药效学研究

目的探究祖师麻片对牛Ⅱ型胶原诱发大鼠关节炎的药效学作用。方法采用牛Ⅱ型胶原诱导的关节炎(collagen-induced anhritis,CIA)动物模型,来观察祖师麻片对CIA模型大鼠的关节炎指数(arthritis index,AI),血清中环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、风湿因子(rheumatoid factor,RF)、免疫球蛋白G(immunoglobulin G,Ig G)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、前列腺素-2(prostaglandin E-2,PGE-2)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-a,TNF-α)的含量,膝关节番红O-固绿染色,镜下观察关节软骨的一般形态,并对膝关节软骨进行Mankin’ s评分。结果与模型组比较,祖师麻片剂量组大鼠AI评分显著降低(P 0.01);血清中CTGF、Ig G、RF、COX-2、IL-6、PGE-2、TNF-α含量显著降低(P 0.05或P 0.01);软骨细胞数量稍有减少,染色丢失较少,潮线基本完整,Mankin’ s评分评分显著降低(P 0.01)。结论祖师麻片对Ⅱ型胶原诱导的类风湿关节炎有显著改善作用,其机制可能与抗炎、免疫调节作用有关。     

静宁颗粒对治疗小儿注意缺陷多动障碍的作用机制研究＊

目的 观察静宁颗粒对注意力缺陷多动障碍（attention deficit hyperactivity disorder，ADHD）模型大鼠行为学及脑内多巴胺能神经的影响，研究静宁颗粒对小儿注意力缺陷多动障碍的治疗作用，探讨静宁颗粒对ADHD模型大鼠的行为学影响的生物学机制，为治疗小儿注意力缺陷多动障碍开发安全长效的中药制剂。方法 采用自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rats，SHR）作为ADHD的模型大鼠，采用静宁颗粒（20.25 g·kg^-1、10.125 g·kg^-1、5.062 5 g·kg^-1）、盐酸哌甲酯缓释片（6.75 mg·kg^-1）和小儿黄龙颗粒（0.937 5 g·kg^-1）连续给药17 d进行治疗，另设正常对照组，常规饲养。以大鼠自由行动的移动距离、移动速率、敞箱中心区域活动累计时间、身体拉长累计时间等行为学指标，评价药物的药效；采用PCR、Western Blot法测定大鼠大脑前额叶、纹状体部位DRD1、DRD2基因及受体表达水平。结果 与正常对照组比较，模型大鼠移动距离、移动速率、敞箱中心区域累计活动时间、身体拉长累计时间明显升高（P ＜ 0.05，P ＜ 0.01）；与模型组比较，静宁颗粒连续给药17 d后，各剂量可显著降低移动距离、移动速率、敞箱中心区域累计活动时间、身体拉长累计时间（P ＜ 0.05，P ＜ 0.01），改善ADHD模型大鼠多动及焦虑的症状；并可升高ADHD模型大鼠大脑前额叶皮质、纹状体部位DRD1、DRD2蛋白表达量（P ＜ 0.05，P ＜ 0.01）。结论 静宁颗粒减少ADHD模型大鼠的自主活动，改善ADHD模型大鼠的注意定势转移能力的缺陷，其作用机制可能与升高ADHD模型大鼠大脑前额叶、纹状体部位DRD1、DRD2 mRNA及受体表达水平有关。     

祖师麻片对CCI模型大鼠脊髓背角P2X_4受体及p38 MAPK表达的影响

目的:研究祖师麻片对慢性挤压神经损伤(CCI)模型大鼠的镇痛作用及机制。方法:采用CCI诱导大鼠坐骨神经损伤,结扎手术完成第8天按痛反应时间(TWT)值随机分为7组(n=12),即对照组、假手术组、模型组、布洛芬组及祖师麻片高、中、低剂量(0.432、0.216、0.108 g·kg~(-1))组,灌胃给药,每天1次,共给药14次。造模后第20天,测定CCI大鼠患肢(即右后足)的TWT值及50%机械缩足反射阈值(50%MWT)。造模第21天灌注取材,取脊髓段L_(4～6),利用免疫组化法观察大鼠脊髓背角P2X_4和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)的表达情况。结果:与模型组比较,祖师麻片各剂量组在给药后各时间点可显著延长模型大鼠患侧的TWT(P0.01);可提高模型大鼠患侧的50%MWT值(P0.01);且明显抑制P2X_4受体和p38 MAPK在脊髓背角中的表达(P0.05)。结论:祖师麻片有明显的镇痛作用,能有效降低CCI诱导坐骨神经损伤所致的痛觉敏化,可减轻结扎坐骨神经所致痛觉敏感大鼠患肢对温度刺激、机械刺激的敏感性,其作用机制与其抑制脊髓背角P2X_4/p38 MAPK通路有关。     

乌头对寒、热痹证大鼠痛觉敏感干预作用的药效学及作用机制研究

目的 通过温热药乌头对寒、热痹证的干预作用,以确定其对寒痹、热痹作用的差异。方法 本实验采用完全弗式佐剂致大鼠足跖关节炎症,在此基础上叠加致病因素风寒湿、风热湿复制寒痹、热痹证模型。造模前随机分为9组,分别是对照组、布洛芬组、模型组、热痹证组、寒痹证组、/     

祖师麻肠溶制剂对佐剂性关节炎大鼠的抗炎与镇痛作用研究

目的探讨祖师麻肠溶制剂对佐剂性关节炎大鼠的抗炎与镇痛作用。方法右后肢足跖皮内注射弗氏完全佐剂制备佐剂性关节炎大鼠模型。将大鼠分为对照组、模型组、泼尼松组,及中药低、中、高剂量组,每组12只。泼尼松组灌胃以泼尼松3.2 mg/kg,中药低、中、高剂量组分别灌胃以祖师麻肠溶制剂0.396、0.792、1.584 g/kg,对照组、模型组灌胃以等体积的7.5%CMC-Na溶液。各组均连续干预12 d,于造模后第7 d、第12 d计算大鼠足跖肿胀率、50%机械缩足反射阈值(MWT)、热缩足反射阈值(TWT);末次给药24 h后ELISA法测定大鼠血清白介素-6(IL-6)、前列腺素E2(PGE2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,HE染色观察大鼠膝关节和踝关节病理学改变。结果 (1)与对照组比较,模型组大鼠足跖肿胀率升高(P0.01),50%MWT、TWT降低(P0.01),血清IL-6、PGE_2、TNF-α水平升高(P0.01)。(2)与模型组比较,泼尼松组和中药低、中、高剂量组大鼠足跖肿胀率降低(P0.01),50%MWT、TWT升高(P0.01),血清IL-6、PGE_2、TNF-α水平降低(P0.01)。(3)泼尼松组与中药各剂量组比较、中药各剂量组组间比较,上述指标差异无统计学意义(P0.05)。结论祖师麻肠溶制剂具有明显的抗炎、镇痛作用,可明显改善佐剂性关节炎大鼠膝关节及踝关节病理损伤。