免疫球蛋白降解酶IdeS在大肠杆菌中的表达、纯化及功能鉴定

病原链球菌为逃避宿主的免疫反应,分泌一种可特异地裂解免疫球蛋白G的降解酶(immunoglobulin G-degrading enzyme of Streptococcus pyogenes, IdeS)。IdeS既可作为工具酶用于IgG的指纹分析,又可用于治疗与自身免疫反应相关的疾病。本研究基于质粒pCold构建了两种重组IdeS的表达载体,并在大肠杆菌Shuffle T7中进行异源表达,经亲和色谱纯化后检测其蛋白活性。结果表明N-端含有His6-标签的重组IdeS产量为4 mg·L^-1,其与抗体IgG1以1∶200 (m/m)在37℃反应30 min即可完全酶解。而N-端含有His6-标签且C-端含有硅胶亲和标签(SiBP)的重组IdeS产量为1.5 mg·L^-1,其与抗体IgG1以1∶20 (m/m)在37℃反应30 min才可反应完全。C-端融合肽对于IdeS产量与活性都有较大的影响,使其活性降低,不利于后续应用于药物研发。上述结果表明,本系统所表达的N-端含有His6-标签的IdeS重组蛋白具有较高的活性,完全能满足抗体类药物研发...     

刘月婵治疗小儿遗尿症经验介绍

正文：小儿遗尿症是指 5 岁以上的小儿不能自主控制排尿，经常睡后自遗，醒后方觉的一种病证[1]。该病按病因可分为原发性遗尿症和继发性遗尿症，是儿童时期较为常见的疾病，随着年龄增长和身体机能的完善，部分患儿病情可以逐渐缓解，但仍有部分患儿遗尿会延续到成人，严重影响其身心健康。小儿遗尿症病因尚不清楚，现代医学认为可能与患儿排尿机能发育迟缓、睡眠觉醒障碍、抗利尿激素分泌异常，以及遗传因素、精神因素等有关。目前，现代医学治疗小儿遗尿症的方法主要为药物治疗和行为治疗，药物治疗采用抗利尿激素和抗胆碱能药物，但存在不良反应大、易复发等弊端[2]；行为治疗则是采用膀胱功能锻炼，患儿依从性差。古今许多医家认为遗尿是由于各种因素导致肺脾肾功能失常，引起水液代谢、固摄障碍所致[3]。中医药治疗小儿遗尿症有独特的优势，不但能减缓患儿的病情，还能调理其体质[4]。刘月婵主任医师是全国第五批、第六批老中医学术继承工作指导老师，从医四十余年，在诊治小儿疾病方面积累了丰富经验，巧用内外兼治之法，往往效如桴鼓。现将刘月婵主任诊治小儿遗尿症的临床经验介绍如下。……     

汕头大学医学院“医者之心”（HEART）医学人文教育模式与实践——以“医学生公益种子培育计划”为视角

目的  医学人文教育是医学生教育的必然要求，然而长期以来存在重理论、轻实践的弊端，导致医学生在医学人文教育的培养方面受限。汕头大学医学院发展出基于“医者之心”（HEART）社会实践课程及其课程外可选修的扩展性内容，并取得了一定成效。在“医者之心”（HEART）课程中，作为该课程的扩展性选修内容，汕头大学医学院学生参加“广东省医学生公益种子培育计划”，开展医疗公益实践活动。方法  对875名参与公益种子活动的医学生进行完成医疗公益实践活动后的问卷调查，并以描述性分析、对比分析等方式进行分析。结果  医学生对实践性医学教育模式有较大的认同感，并在活动中提升社会责任感和医德感知水平，同时服务到社区居民。结论  基于“医者之心”（HEART）教育模式与教育理念，通过医疗公益服务学习来进行医学人文教育，取得一定成效。     

内镜逆行胰胆管造影治疗前服用抗凝药物患者出血原因分析与护理

通过对7例内镜逆行胰胆管造影治疗前服用抗凝药物术后发生出血患者的出血原因进行回顾性分析，总结高危人群行内镜逆行胰胆管造影治疗的护理要点。术前做好常规检查，尤其是对血红蛋白、凝血功能、血小板的检测，术前停用抗凝药；术中尽可能减少出血风险较大的操作；术后加强生命体征的监测，对患者的引流液、呕吐物、大便颜色的观察，可以及时发现，及时处理，以减轻术后因出血导致的严重后果。     

成釉细胞瘤肿瘤细胞巢周边及中心区细胞增殖和分化的研究

目的　研究成釉细胞瘤肿瘤细胞巢周边及中心区细胞增殖和分化的特点。方法　选取43例成釉细胞瘤 ,包括滤泡型 15例、丛状型 2 0例和棘皮瘤型 8例。应用免疫组化SP方法检测标本组织中增殖细胞核抗原 (proliferatingcellnuclearantigen ,PCNA)、Ki 6 7、CK10&13和CK19蛋白的表达。结果　PCNA在肿瘤细胞巢周边区的增殖指数 (5 12± 2 76 ) %显著高于中心区 (1 36± 1 0 2 ) % ,P <0 0 0 1;Ki 6 7在肿瘤细胞巢周边区的增殖指数 (3 6 3± 1 80 ) %显著高于中心区 (1 2 6± 0 96 ) % ,P <0 0 0 1;PCNA和Ki 6 7的增殖指数有显著相关关系 (P <0 0 1) ;CK10&13和CK19在成釉细胞瘤中心区细胞表达显著高于周边区 (P <0 0 1)。结论　成釉细胞瘤肿瘤细胞巢周边区为增殖细胞区 ,周边区和中心区细胞的分化程度不同。     

腺淋巴瘤上皮成分的免疫组织化学研究

本文采用免疫组织化学方法（ABC法）对抗糜蛋白酶（α1-Antichymotrypsin／α10-ACT）、抗胰蛋白酶（α1-Antitrypsin／α-AT）、乳铁蛋白（Lactoferrin／LF）、癌胚抗原（Carcinoembryonicantigen／CEA）和转铁蛋白（Transferrin／TF）在22例腺淋巴瘤上皮成份中的分布进行了检测。结果发现，腺淋巴瘤上皮成份的两层细胞具有不同的染色特征。α1-ACT、α-AT、LF、CEA主要分布于腔细胞；TF则主要分布于基底细胞。提示，腔细胞与基底细胞不仅形态、结构不同，功能分化上亦存在差异。此外，腺淋巴瘤上皮成份与正常腮腺腺泡细胞和间管细胞对五种标记蛋白的表达具有相似性。     

义齿塑料基托热压灌注成型新工艺—颜色稳定性的比较研究

目的：分析比较成型后的基托塑料可能发生的变色。方法：对不同粉、液比例灌注成型的基托塑料和常规模压成型的基托塑料，用分光测色仪观察颜色稳定性。结果：粉、液以２∶１体积比灌注成型的义齿基托，表面平整光滑，色调、饱和度与常规模压成型的义齿基托相同，而其表面可抛光性优于常规法。结论：２种方法成型的义齿基托对紫外线的敏感性无显著性差异。     

口底、舌部皮样囊肿和畸胎样囊肿(综述)

口腔内皮样囊肿和畸胎样囊肿,常发生于口底。舌部较少见。New和Erich报告1495例皮样囊肿中,103冽(6.9%)发生于头颈部,其中25%发生于口底。现就有关临床病理方面的问题,综述如后。     

人牙龈和牙周韧带成纤维细胞体外矿化能力的比较研究

目的：研究人牙龈和牙周韧带成纤维细胞体外矿化能力的差异。方法：用组织块法培养同一患者的牙龈和牙周韧带成纤维细胞，取第4-8代细胞用矿化培养液长期培养，倒置显微镜下观察矿化情况，von Kos-sa染色显示钙盐沉积，生化法测定各组碱性磷酸酶活性，扫描电镜及X线能谱法分析矿化结节中钙磷比例。结果：倒置显微镜下观察牙周韧带成纤维细胞可呈复层生长，形成肉眼可见的白色结节，von Kossa染色显示结节内有钙盐沉积，碱性磷酸酶活性测定表明随着矿化培养时间的延长牙周韧带成纤维细胞组ALP活性比牙龈成纤维细胞组增高明显，扫描电镜下表明结节处电子反射增强，X射线能谱分析显示钙化结节内的钙磷比例与矿化组织相似；牙龈成纤维细胞及对照组体外不能形成钙化结节。结论：人牙龈和牙周韧带成纤维细胞体外矿化能力不同。