补肾方剂对去势大鼠骨代谢影响的实验研究

使用补肾方剂(补肾健骨胶囊)对切除卵巢的雌性成年大鼠进行了不同剂量的药物治疗，并与正常对照组、模型组和尼尔雌醇治疗组的大鼠进行了对比。统计学结果显示，补肾健骨腔囊治疗可有效改善卵巢切除大鼠骨质疏松症，各项骨检测指标明显好于模型组，差异有显著性和非常显著性(P＜0．05～0．001)。补肾健骨腔囊治疗后大鼠骨载荷、骨桡度、骨强度等生物力学指标明显好于模型组(P＜0．05～0．001)。说明补肾健骨胶囊治疗可明显的改善骨质疏松大鼠的骨质丢失状态，提高骨骼抵抗外力冲击的能力，有效的防治骨质琉松症，避免骨折的发生。     

红曲对去势大鼠血清激素水平、骨密度和骨生物力学影响

目的:研究红曲对去势大鼠血清激素水平、骨密度和骨生物力学影响,并探讨其作用机理.方法:取12周龄的雌性wistar大鼠40只,其中30只打开腹腔去除双侧卵巢,逐层缝合,另10只予以单纯打开腹腔不切除卵巢.将大鼠分为A组(模型组)、B组(红曲治疗组)、C组(阳性对照组)、D组(假手术组)四组,饲养12周后,分别予以生理盐水、红曲水提液、α-D3水溶液及生理盐水灌胃.灌胃12周后,活杀各组动物,以双能X线、骨密度测定仪测定骨密度.取血清用放免法测定血清中骨钙素、降钙素.通过三点弯曲试验,记录载荷--变形曲线,测定骨生物力学指标.结果:经过12周的红曲水提液灌胃治疗,明显提高了去势大鼠的血清激素水平、骨密度,并能改善去势大鼠的骨力学性能.结论:红曲可提高去势大鼠骨密度值,改善骨的生物力学性能.推测其作用可能是通过改变血清激素水平来实现的.     

九里香叶对去卵巢大鼠拟雌激素样作用的实验研究

目的探讨九里香叶对去卵巢大鼠的拟雌激素样作用。方法以2%戊巴比妥钠麻醉大鼠,切除大鼠双侧卵巢,对照大鼠切除卵巢旁同样大小的脂肪团。术后7天分组、给药。分为模型组:生理盐水(0.4 mg/kg/d);对照组:生理盐水(0.4 mg/kg/d);戊酸雌二醇组:0.4 m g/kg/d;九里香高剂量组:200 mg/kg/d;九里香中剂量组:100 mg/kg/d;九里香低剂量组:50 mg/kg/d。连续给药90天后,处死大鼠,测定子宫系数。放射免疫法测定血清雌二醇水平。结果给药第30天、60天、90天,与对照组比较,模型组大鼠体质量增幅较大,差异显著;与模型组比较,戊酸雌二醇组、九里香叶高剂量组大鼠体质量增幅较小,差异显著(P0.05)。与模型组比较,戊酸雌二醇组、九里香叶高剂量组大鼠子宫质量和子宫系数明显增加,差异显著(P0.05)。与模型组比较,戊酸雌二醇组、九里香叶高、中、低剂量组大鼠雌二醇明显增加,差异不显著(P0.05)。结论九里香叶具有一定的雌激素样作用。     

去卵巢对大鼠泪腺中IL-17A等炎症因子表达的影响

目的建立去卵巢大鼠模型,观察性激素水平改变对泪腺中IL-17A以及IL-1β、IL-6、TNF-α等炎症因子表达的影响。方法实验研究。健康雌性SD大鼠20只随机分为2组,实验组（10只）摘除大鼠双侧卵巢,对照组（10只）为未摘除卵巢的模拟手术组。术前及术后第1个月、第2个月、第3个月时2组均行泪液分泌试验（SIT）、角膜荧光染色检查进行眼表评估。于第3个月时放射免疫分析法分别检测2组大鼠血清雌二醇、睾酮含量,HE染色观察泪腺上皮细胞形态,免疫组化染色法、Western Blot法检测2组泪腺中IL-17A、IL-1β、IL-6、TNF-α的表达。2组性激素质量浓度比较、炎症因子A值表达比较均应用独立样本t检验。2组各时间点的SIT结果比较采用重复测量资料两因素方差分析。结果实验组大鼠去卵巢后第3个月时,体内雌二醇浓度低于对照组（t=-35.37,P<0.01）,睾酮浓度低于对照组（t=-12.13,P<0.01）。2组各时期SIT检查未见泪液分泌减少、均未见角膜荧光染色。HE染色见实验组泪腺腺泡萎缩,排列紊乱,胞质内酶原颗粒明显减少。泪腺IL-17A表达量2组比较实验组高于对照组（免疫组化法：t=7.56,P<0.01;Western Blot法：t=20.90,P<0.01）。余各因子表达量实验组也均高于对照组（免疫组化法：IL-1β：t=13.71,P<0.01;IL-6：t=13.92,P<0.01;TNF-α：t=6.11,P<0.01。Western Blot法：IL-1β：t=16.93,P<0.01;IL-6：t=12.46,P<0.01;TNF-α：t=14.47,P<0.01）。结论大鼠去卵巢3个月时性激素水平降低,未见明显眼表损害。但泪腺中炎症因子IL-17A、IL-1β、IL-6、TNF-α的表达增加。     

特立帕肽对老年去卵巢大鼠血管钙化的影响

目的：观察特立帕肽对老年去卵巢大鼠血管钙化的影响,并探讨其发挥作用的分子机制。方法用30只10个月龄SD大鼠,随机分为3组院假手术组、去卵巢组及特立帕肽治疗组。特立帕肽治疗组给予20μg/kg特立帕肽皮下注射,隔天1次,持续12周。术前及给药期间收集大鼠血清,给药结束后观察子宫的组织学变化。酶联免疫吸附法(ELISA)检测血中未羧化基质羧基谷氨酸蛋白(uc-MGP)的量及雌激素的变化;原子分光光度计测量血管总钙含量;Von Kossa染色观察动脉钙化;免疫组化法观察血管uc-MGP的表达;荧光实时定量PCR扩增MGP mRNA,观察其在胸主动脉的表达水平。结果血清中uc-MGP含量去卵巢组最高,特立帕肽治疗组其次,假手术组最低(P<0.05)。去卵巢组及特立帕肽治疗组雌激素水平明显下降(P<0.05)。去卵巢组血管总钙含量明显高于假手术组(P<0.01),特立帕肽治疗组明显低于去卵巢组(P<0.01)。血管未羧化MGP表达出现在血管钙化周围区域,钙化严重组表达较多。特立帕肽治疗组阳性较少表达。去卵巢组表达量最低,假手术组MGP mRNA表达量最高,特立帕肽治疗组表达量介于两者之间,差异有统计学意义(P<0.01)。结论特立帕肽对绝经后血管钙化有改善作用,可能是通过调节MGP的基因表达及活性发挥作用。     

维生素K2对老年去卵巢大鼠血管钙化的影响

目的在老年去卵巢大鼠模型上探讨维生素K2对血管钙化的影响。方法 36只10个月龄雌性SD大鼠,随机分为假手术组、去卵巢组、去卵巢+维生素K2组。去卵巢手术后3周,去卵巢+维生素K2组给予维生素K2灌胃30 mg/kg,每周5次,持续12周。各组大鼠在术前及药物干预后每3周留取血清及尿液,18周后处死大鼠,HE染色观察子宫、血管组织变化,酶联免疫吸附法检测血清和尿液基质Gla蛋白(MGP)含量及雌激素水平变化,荧光实时定量PCR检测胸主动脉MGP mRNA的表达,免疫组织化学法观察血管未羧化MGP(ucMGP)的表达,Von Kossa染色观察动脉钙化,原子分光光度计测定血管总钙含量。结果去卵巢后大鼠子宫和血管组织切片呈现明显不同,血中雌激素水平下降,表明去卵巢大鼠模型构建成功。去卵巢前各组大鼠血清及尿液中MGP含量无明显差异(P>0.05);去卵巢后,假手术组MGP含量无明显变化,去卵巢组MGP含量下降,去卵巢+维生素K2组MGP含量先下降后上升。去卵巢+维生素K2组血管中MGP mRNA表达量较假手术组高(P<0.01),较去卵巢组低(P<0.01)。血管ucMGP表达出现在血管钙化周围区域,去卵巢+维生素K2组未见明显ucMGP的表达。去卵巢+维生素K2组血管总钙含量明显低于去卵巢组(P<0.01),高于假手术组(P<0.05)。结论 MGP在绝经后血管钙化的发病中有重要作用,维生素K2可能通过调节MGP羧化及基因表达抑制血管钙化。     

不同治疗时间的脉冲电磁场对去势大鼠股骨生物力学性能的影响

目的通过采用不同治疗时间的脉冲电磁场（PEMFs）干预去势大鼠骨质疏松模型，观察各组大鼠的股骨生物力学性能的变化，以探索PEMFs治疗骨质疏松的最适治疗时间。方法按随机分组原则用密闭信封法将雌性3个月龄SD大鼠50只分为5组：假手术对照组10只，卵巢切除对照组10只，卵巢切除Ⅰ组10只，卵巢切除Ⅱ组10只，卵巢切除Ⅲ组10只。除假手术对照组以外，对所有动物按文献方法去势造模。卵巢切除Ⅰ组、卵巢切除Ⅱ组和卵巢切除Ⅲ组大鼠每天在强度为3．8mT，频率为8Hz的电磁场环境中分别照射20，40，60min，共30d。假手术对照组和卵巢切除对照组不干预。各组动物均在满30d后，行股动脉放血处死，取右侧股骨作生物力学性能测定。结果卵巢切除对照组大鼠的股骨结构力学指标（包括最大位移、最大载荷及最大能量吸收）和材料力学指标（包括最大应力、最大应变及弹性模量）显著低于其它4组大鼠（P〈0．05或P〈0．01），而假手术对照组、卵巢切除Ⅰ组、卵巢切除Ⅱ组及卵巢切除Ⅲ组4组大鼠的股骨生物力学指标之间的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论PEMFs能阻止大鼠在卵巢切除后的股骨生物力学性能下降，对去势大鼠的骨质疏松症有肯定的预防作用。在磁场强度（3．8mT）和脉冲频率（8Hz）相同的前提下3种治疗时间的PEMFs均能使卵巢切除大鼠股骨生物力学性能维持在接近正常的水平，但3种治疗时间之间的差异无统计学意义，说明每日用PEMFs对去势大鼠治疗20—60min，对其骨生物力学性能的维持效果相同。     

长期口服雌激素对去卵巢大鼠海马结构内β-淀粉样前体蛋白及其mRNA表达的影响

目的 观察长期口服复方尼尔雌醇和小剂量17β-雌二醇补充治疗对去卵巢大鼠海马结构内β-淀粉样前体蛋白（β-APP）及其mRNA表达的影响。方法 7月龄SD大鼠按体重随机分成5组：正常对照组、假手术组（SHAM）、去卵巢组（OVX）、17β-雌二醇预防干预组（OVX／ERT）和复方尼尔雌醇预防干预组（OVX／NL）连续观察。5组均在去卵巢后35w处死。用免疫组织化学方法（SABC法）显示大鼠海马结构内β-APP，原位杂交方法显示β-APP mRNA。细胞计数及图像分析观察β-APP及其mRNA的变化。结果 OVX组海马结构内各亚区β-APP阳性神经元数量和平均光密度均高于正常组、SHAM组、OVX／ERT组、OVX／NL组（P〈0．05），而β-APP mRNA阳性神经元数量和平均光密度在5组之间均无显著性差异。结论 长期雌激素缺乏导致了大鼠海马结构内β-APP含量的增加，长期口服复方尼尔雌醇和小剂量17β-雌二醇补充治疗可减少β-APP的含量，且二者效果相当。促进β-APP分解、减少β-APP的含量，进而减少Aβ的沉着可能是雌激素神经保护的重要机制之一。     

补肾中药组方对去卵巢大鼠骨微结构的影响

目的研究补肾中药组方对去卵巢大鼠骨微结构的影响。方法通过卵巢摘除建立骨质疏松模型,研究不同剂量的补肾中药对去卵巢大鼠骨微结构的影响。结果光镜下观察高剂量补肾中药组方能改善去卵巢大鼠的骨小梁的分布、排列、之间的连接、厚度及间隙等组织学表现。组织计量学表明高、中剂量中药组能提高骨小梁TBV%和MTT(与OVX组比较P<0.05),这种功能与尼尔雌醇作用相当(P>0.05),低剂量中药组能提高骨小梁TBV%(与OVX组比较P<0.05)。结论补肾中药具有改善去势大鼠骨微结构的功能。     

Treatment with phytoestrogen alpha-zearalanol might protect neurons of hippocampus in ovariectomized rats

Although neuroprotective effects of estrogen on postmenopausal women have been recognized, an associated increased incidence of uterine and breast tumors has jeopardized the clinical use of estrogen. This study was designed to evaluate the neuroprotective effects of a novel phytoestrogen α-zearalanol (α-ZAL), on ovariectomized (OVX) rats. Adult Wistar rats were ovariectomized or sham-operated and treatment with equivalent doses of 17β-estradiol or α-ZAL for 5 wk. Uteruses have been weighted and stained by hematoxylin and eosin for morphology analysis. The expression of synaptophysin and parvalbumin in hippocampus were evaluated by immunohistochemistry assays. Our experiments indicated that the synaptophysin and paravalbuminpositive areas were significantly decreased in the OVX group compared to the sham group, α-ZAL or 17β-estradiol administration can reverse the effects. Although α-ZAL and 17β-estradiol treatments reconciled uterus weight loss which was induced by ovariectomy, the effect of α-ZAL was less than 17β-estradiol. This result suggests that α-ZAL may effectively abate neurons loss in the hippocampus while slightly promoting weight gain of the uterus. Yi-Long Dong and Yun Yue contributed equally to this work.