鼓槌石斛中毛兰素及鼓槌素对B16／h MDR—1细胞的药耐药性的作用

采用转染上人类MDR－1基因，对长春花碱及阿霉素具有交叉耐药性的鼠黑色素瘤细胞株对从鼓槌石斛中分得的二个氢芪类化合物毛兰素及鼓槌素的抗肿瘤多药耐药性进行研究。结果表明：二个化合物均能在一定程度上增加阿霉素在多药耐药细胞株中的积累，有进一步研究的价值。     

毛兰素通过MAPK途径抑制葡萄膜黑色素瘤增殖并诱导凋亡

目的研究毛兰素对葡萄膜黑色素瘤细胞株增殖和凋亡的影响,以及探索潜在的信号通路。方法采用MTT比色法检测毛兰素对MUM-2B和C918葡萄膜黑色素瘤细胞株增殖活力的影响,DAPI染色结合AnnexinV/PI双染后流式细胞分析检测葡萄膜黑色素瘤细胞凋亡率,免疫印迹分析细胞增殖相关蛋白如p21、MAPK及其磷酸化形式,凋亡相关蛋白Caspase-3和PARP等的表达量。结果毛兰素对C918、MUM-2B葡萄膜黑色素瘤细胞均存在不同程度的抑制作用。当浓度达到25μmol/L时,MUM-2B的抑制率达到(79.92±2.79)%,C918的抑制率在(84.60±0.81)%。DAPI染色可见细胞数量随毛兰素浓度增加而逐渐减少,而且存在细胞凋亡现象。随着毛兰素作用浓度的增大,G2/M期细胞的比例逐渐增加,早期和晚期凋亡细胞比例增加。在毛兰素处理后,p38 MAPK蛋白表达在MUM-2B中较为显著的下调,PARP总蛋白水平有显著下调(P0.05),p38 MAPK总蛋白有一定程度的下调,而p21、PARP活化形式(cl-PARP)和Caspase-3的活化形式(cl-Caspase3)显著上调(P0.05)。结论毛兰素能够有效抑制葡萄膜黑色素瘤细胞C918、MUM-2B、增殖,阻滞细胞周期,促进葡萄膜黑色素瘤细胞凋亡,且其作用效果呈现出一定范围内的剂量依赖性。其作用机制与上调p21表达,抑制p38 MAPK表达有关,后者可削弱MAPK信号通路活化,并可活化细胞凋亡途径关键蛋白Caspase-3诱导凋亡。     

反相高效液相色谱法测定18种石斛类生药中chrysotoxene，erianin及chrysotoxine的含量

采用反相ＨＰＬＣ法测定１８种石斛中ｃｈｒｙｓｏｔｏｘｅｎｅ，ｅｒｉａｎｉｎ及ｃｈｒｙｓｏｔｏｘｉｎｅ的含量。固定相ＯＤＳ－Ｃ＿（１８）２４ｃｍ×４．６ｍｍ，流动相甲醇－乙腈－水（６０：６０：１６５），检测波长２３７ｎｍ。三种成分的回收率分别为９８．０％，９６．１％及９５．２％。     

反相高效液相色谱法测定18种石斛类生药中chrysotoxene，erianin及chrysotoxine的含量

采用反相ＨＰＬＣ法测定１８种石斛中ｃｈｒｙｓｏｔｏｘｅｎｅ，ｅｒｉａｎｉｎ及ｃｈｒｙｓｏｔｏｘｉｎｅ的含量。固定相ＯＤＳ－Ｃ＿（１８）２４ｃｍ×４．６ｍｍ，流动相甲醇－乙腈－水（６０：６０：１６５），检测波长２３７ｎｍ。三种成分的回收率分别为９８．０％，９６．１％及９５．２％。     

鼓槌石斛及其化学成分的抗肿瘤活性作用

鼓槌石斛及其化学成分的抗肿瘤活性作用马国祥，徐国钧，徐珞珊，王佾先（中国药科大学生药学教研室，江苏省肿瘤研究所，南京２１０００９）关键词鼓槌石斛；毛兰素；毛兰菲；鼓槌菲；抗肿瘤活性中药石斛主要来源于兰科Ｏｒｃｈｉｄａｃｅａｅ石斛属Ｄｅｎｄｒｏｂｉｕｍ...     

毛兰素通过 JNK/c-Jun信号通路对 2型糖尿病大鼠肝脏损伤的保护作用机制研究

目的基于 c-Jun氨基末端激酶( JNK)/c-Jun信号通路对氧化应激反应的调控作用,研究毛兰素对 2型糖尿病大鼠肝脏损伤的保护作用。方法于 2021年 10月至 2022年 2月腹腔注射链脲佐菌素构建糖尿病大鼠模型,将造模成功大鼠分为模型组、毛兰素低剂量组( 10 mg/kg)、毛兰素高剂量组( 40 mg/kg)及罗格列酮组( 1.25 mg/kg)、毛兰素( 40 mg/kg)+JNK激活组(5 mg/ kg),每组 10只,另取正常饲养大鼠 10只作为对照组。连续给药,6周后,通过血糖仪和胰岛素放射免疫分析试剂盒检测空腹血糖( FBG)、空腹胰岛素( FINS)水平,计算胰岛素抵抗指数( HOMA-IR)及胰岛素敏感指数( ISI);天平称取大鼠体质量和肝质量,计算肝脏指数;试剂盒检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶( AST)、总超氧化物歧化酶( T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶( GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量; HE染色观察肝脏组织病理学变化; western blotting法检测肝脏组织中 JNK/c-Jun信号通路相关蛋白表达。结果与对照组相比,模型组肝脏指数［( 4.26±0.12)g/100 g比( 2.24±0.09)g/100 g］、 FBG［( 21.49±1.78)mmol/L比( 5.14±0.45)mmol/L］、 FINS［( 80.17±6.38)mmol/L比( 22.35±2.04)mmol/L］、 HOMA-IR［( 76.46±6.56)比( 5.11±1.12)］、 ALT［( 138.71±10.21)U/L比( 70.29±5.54)U/L］和 AST活性［( 77.21±5.08)U/L比( 40.38±3.27)U/L］、 MDA含量［( 13.45±1.34)nmol/mg prot比( 3.72±0.87)nmol/mg prot］、 JNK/c-Jun信号通路相关蛋白表达均明显升高( P<0.05),体质量、 ISI［( ?7.45±0.18)比( ?4.74±0.11)］、 SOD［( 100.79±11.22)U/mg prot比( 223.46±19.86)U/mg prot］和 GSH-Px活性［( 24.42±1.74)U/mg prot比(56.79±3.18)U/mg prot］明显降低( P<0.05),且肝脏组织病理损伤较为严重;与模型组相比,毛兰素低剂量组、毛兰素高剂量组和罗格列酮组肝脏指数、 FBG、FINS、HOMA-IR、ALT和 AST活性、 MDA含量、 JNK/c-Jun信号通路相关蛋白表达均明显降低( P<0.05),体质量、 ISI、SOD和 GSH-Px活性明显升高( P<0.05)减轻肝脏损伤程度;与毛兰素高剂量组相比,毛兰素低剂量组、毛兰素+JNK激活组肝脏指数、 FBG、FINS、HOMA-IR、ALT和 AST活性、 MDA含量、 JNK/c-Jun信号通路相关蛋白表达均明显升高(P<0.05)体质量、 ISI、SOD和 GSH-Px活性明显降低( P<0.05),肝脏损伤恢复缓慢。结论毛兰素可通过调控 JNK/c-Jun信号通路,抑制,JNK/c-Jun通路蛋白表达,从而缓解氧化应激反应,改善糖尿病大鼠肝脏损伤。     

毛兰素注射液在大鼠体内药动学研究

目的阐明毛兰素注射液在SD大鼠体内药动学规律。方法 SD大鼠分别单次和隔天、每隔一个半衰期一次多剂量静脉注射毛兰素注射液。采用高效液相色谱-质谱联用（HPLC-MS）测定大鼠静脉注射后不同时间大鼠血浆中毛兰素的血药浓度。结果大鼠单次静脉注射25,50,100mg·kg-1毛兰素注射液的主要药动学参数为：T1/2β分别为3.66,3.75,3.89h;AUC0-12分别为1453.0,3041.6,6731.6ng·mL-1·h;AUC0-∞分别为1462.0,3077.3,6788.7ng·mL-1·h;Vd分别为11.67,10.37,3.38L·kg-1;CL分别为0.049,0.089,0.024L·kg-1·h-1;MRT分别为0.18,0.28,0.21h;50mg·kg-1剂量的毛兰素注射液隔日给药5次其药动学参数与单次给药相近;而50mg·kg-1剂量的毛兰素注射液每隔一个半衰期一次给药5次的T1/2β为5.43h,AUC（S0）（0-t）为9800.8ng·mL-1·h。结论毛兰素注射液在大鼠体内的动力学过程与剂量相关,毛兰素注射液单剂量给药的体内药动学符合开放型二房室模型,T1/2β与给药剂量与关,表明毛兰素在大鼠体内的消除过程符合一级动力学规律。隔日多剂量给药的消除过程亦符合一级动力学规律;而每隔一个半衰期一次多剂量给予50mg·kg-1剂量的毛兰素其在大鼠体内则呈非线性消除。     

HPLC测定毛兰素乳液型注射液中毛兰素及有关物质含量

目的建立一种测定一类新药毛兰素乳液型注射液中毛兰素及有关物质鼓槌联苄含量的方法。方法采用AgilentXDBC18柱（4.6mm×250mm,5μm）,流动相为甲醇-乙腈-水（30∶30∶40）,检测波长：232nm;流速：1.0mL·min-1。结果毛兰素及有关物质鼓槌联苄达到完全分离;毛兰素在5.5625~89.0μg·mL-1内线性关系良好（Y=13504X＋2146.6,r=0.9999）,平均回收率100.8%;有关物质鼓槌联苄在9.292~46.462μg·mL-1内亦有良好线性关系（Y=14.0331X＋2.3886,r=0.9999）,平均回收率达99.8%。结论本法灵敏,准确,专属性强,可用于测定注射液中毛兰素的含量和有关物质的检查。