香菇C91-3 cDNA文库的构建及鉴定

目的 构建香菇C91-3 cDNA文库.方法 低速离心法收集香菇C91-3菌丝体发酵液中的菌丝,提取总RNA,巢式PCR扩增5SrRNA非转录间隔区2片段并测序鉴定.纯化mRNA,以mRNA为模板进行反转录反应;产物与pBlueScript II SK(+)载体连接,并转化E.coil DH10B,检测库容及插入片段.结果 香菇C91-3cDNA文库初始库容为7.2×106cfu,插入片段长度0.4～3.4kb,平均1.5kb.结论 成功构建香菇C91-3 cDNA文库,适合用于研究香菇蛋白的编码基因.     

利用焚烧富余处理能力腾退填埋场库容的研究——以南方某市为例

以南方某市为例,对利用生活垃圾焚烧富余处理能力腾退填埋场库容的问题进行了研究。经过对填埋场工程条件、环境污染防治条件、陈腐垃圾特性和焚烧厂主要技术条件的分析,认为利用焚烧富余能力掺烧陈腐垃圾腾退填埋场库容在技术上是可行的。根据填埋场相关数据和预计焚烧富余处理能力进行测算,预计可腾退的库容满足规模经济的要求,释放的库容可用于焚烧发电处理产生的飞灰固化物的填埋和生活垃圾应急填埋。初步测算对比说明利用焚烧富余能力腾退填埋场库容经济上也是可行的。     

包头市青山生活垃圾填埋场封场设计

针对早期建设、运行的包头市青山生活垃圾填埋场的实际填埋情况,以及包头市的气候特点,对垃圾填埋场库容的增容、边坡坡度、封场结构层及绿化进行了设计,并通过封场后的实际运行情况,证实了此封场方式适合寒冷及降雨量小的简易型垃圾填埋场。     

大鼠结肠cajal细胞库容性Ca^2＋内流检测的临床价值

目的:通过检测大鼠结肠cajat细胞中库容性Ca2+内流(capacitative Ca2+ entry,CCE),探讨导致大鼠结肠cajal细胞内Ca2+稳态失衡的信号途径,为治疗相关疾病提供新的思路.方法:荧光探针Fu-ra-2/AM标记细胞内游离Ca2+后,用荧光分光光度计检测乙二醇-双(2-氨基乙基醚)四乙酸(EGTA)耗竭胞内钙库后对分离的大鼠结肠cajal细胞Ca2+浓度([Ca2+])的影响.结果:在无Ca2+缓冲液中加入EGTA(10 mmol/L),细胞内[Ca2+]由静息时的(69.37±3.02)nmol/L升高至(272.52±5.21)nmol/L;继之,向细咆外液中引入1.5 mmol/L和3.0 mmol/L的氯化钙溶液,导致细胞内Ca2+进一步升高为(466.43±4.63)nmol/L和(977.43±3.27)nmol/L;且此升高效应对维拉帕米(5 μmol/L)不敏感,但可被2APB(20～100 μmol/L)抑制.结论:酶解法并结合密度离心法分离的大鼠结肠cajal细胞上存在胞内钙库耗竭激活的Ca2+内流.这对于研究钙通道活性改变、预防和控制因胃肠动力紊乱所致的消化系统疾病具有重要意义.     

库容性Ca~(2+)内流介导大鼠远端结肠平滑肌收缩

目的探讨库容性Ca2+内流(capac itative Ca2+entry,CCE)是否参与大鼠远端结肠平滑肌兴奋-收缩偶联过程。方法利用器官离体装置、张力换能器、Powerlab 4/25T数据采集分析系统测定远端结肠平滑肌的张力。结果毒胡萝卜素(thapsigargin,TG,10 nmol.L-1~1μmol.L-1)诱导结肠平滑肌条产生持续的张力性收缩,不同浓度TG所致的同步收缩反应张力不同。在无钙Krebs液(包含1 mmol.L-1EDTA)中使用TG将肌条培养35 m in后,再加入Ca2+2.5mmol.L-1,比未使用TG处理的肌条产生的收缩张力明显提高(99%±28%vs70%±8%)。且TG耗竭胞内钙库后再复钙所致的收缩效应,不受L型钙通道阻断剂verapam il影响,但可被SOC通道阻断剂La3+减弱。结论TG耗竭胞内钙库后再复钙诱导的大鼠远端结肠平滑肌收缩反应由CCE介导,提示CCE是提供大鼠远端结肠平滑肌收缩的激活信号Ca2+的来源之一,参与完成结肠平滑肌兴奋-收缩偶联过程。     

南京地区血小板固定捐献者HLA和HPA基因资料库的建立及库容评估分析

目的 探讨南京地区血小板固定捐献者HLA-A、-B和HPA-1～6w、10w、15、21w基因多态性分布特点并进行血小板固定捐献者基因资料库库容评估分析。方法 采用荧光定量PCR法对南京地区1059例血小板固定捐献者血液样本进行HLA-A、-B位点和HPA-1～6w、10w、15、21w基因分型,计算等位基因频率、HLA单体型频率、HPA组合型频率,并以此为数据基础,评估库容水平。结果 1059例血小板固定捐献者中共检出HLA-A位点等位基因15个,频率较高的有A^*02、A^*11、A^*24、A^*33、A^*30;检出HLA-B位点等位基因29个,频率较高的有B^*15、B^*40、B^*13、B^*46、B^*51、B^*58;观察到HLA-A-B单体型共269种,频率>0.01的有22种,其中频率最高的为A^*02-B^*     

合肥地区HPA、HLA高分辨基因型血小板供者库的建立及库容分析

目的 建立合肥地区HPA、HLA高分辨已知基因型血小板供者资料库,并分析合适的库容水平,为免疫性血小板输注无效患者提供数据基础。方法 采用多重荧光PCR方法对1 157名合肥地区无偿献血者进行HPA-1～6,-10,-15,-21基因分型并计算其频率;采用PCR-SSO方法对合肥地区1 115名无偿献血者进行HLA-A,-B高分辨基因分型,使用最大期望值计算HLA-A,-B高分辨基因频率和单体型频率。结果 根据对合肥地区人群HPA、HLA高分辨基因多态性分析,建立合肥地区血小板供者资料库,在1 157份已知HPA-1～6,-10,-15,-21基因型供者库中,约有91%的患者可以找到HPA基因型全匹配供者;1 115份已知HLA-A,-B高分辨基因型血小板供者库中,找到至少1例相同供者的概率约为60%。结论 建立了适合合肥地区人群HPA、HLA已知基因型血小板供者资料库,经分析合肥地区血小板供者库基本满足免疫性血小板输注无效患者找到适配的血小板需求。     

电转化技术在噬菌体抗体库构建中的应用

目的 :探讨电转化技术在构建噬菌体抗体库中的应用价值。方法 :用国产电转化仪将重组噬菌粒p3 -V2转化入E.COLIXL1-Blue中。结果 :应用电转化技术构建噬菌体抗体库库容为 :3.9×107单个scFv重组子 ,其转化效率为 :107～108 转化子/μg ,本实验最佳条件为场强 (7.5kv/cm) ,电容 (21.0μF) ,细菌浓度 (XL1 -Blue :4.0×1010/ml) ,外源DNA量 (p3 -V2:0.6μg)。结论 :经优化电转化条件 ,所得库容符合建库要求     

阜阳市生活垃圾填埋场最低标高设计

介绍了阜阳市垃圾填埋场场址水文地质条件,并以此合理确定垃圾填埋场场址和最低标高,扩大库区库容,延长使用年限。对淮北平原的垃圾填埋场库区最低标高的确定具有一定的通用性。     

库容性钙内流通道调节剂的研究进展

库容性钙内流（CCE）通道是目前研究较热门的一种离子通道,其开放与关闭由内质网/肌浆网中Ca²⁺贮量来调控。它广泛存在于兴奋性和非兴奋性细胞中,参与多种形式的细胞活动,如肌肉收缩、神经递质释放、突触适应、细胞分化和死亡等,具有重要的生理学意义。开发和研制特异性CCE通道调节剂,不仅可促进实验研究的深入,而且可能为临床治疗相关疾病提供新的思路。