基于SFV RNA复制子核酸疫苗pIRSFV-HN的构建及其体内外抑瘤作用

目的：构建基于塞姆利基森林病毒（Semliki forest virus，SFV）RNA复制子和新城疫病毒HN基因的核酸疫苗pIRSFV-HN，并探讨其体内外的抑瘤作用。方法：基于SFV RNA复制子和新城疫病毒HN基因构建核酸疫苗pIRSFV-HN，pIRSFV-HN转染人结肠癌细胞HCT-116，以Western blotting检测转染后HCT-116细胞HN的表达水平，以AO／EB双荧光染色检测肿瘤细胞的凋亡，以MTT法检测疫苗对HCT-116细胞增殖的抑制。构建C57BL／6小鼠右后肢皮下荷H22腹水瘤细胞模型，瘤体内注射pIRSFV-HN（共3次），检测该小鼠血清IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ水平和特异性CTL活性。结果：成功构建基于SFV RNA复制子和新城疫病毒HN基因的核酸疫苗pIRSFV-HN。结肠癌细胞HCT-116被疫苗转染后可有效表达HN蛋白，对照细胞则无表达；转染后HCT-116细胞出现凋亡的征象；该细胞的增殖受到明显抑制，最大抑制率达55．34％。移植瘤体内注射疫苗后，荷瘤小鼠血清IL-2、IFN-1水平显著升高（P〈0．05），其CTL活性也显著升高（P〈0．01）。结论：基于SFV RNA复制子和新城疫病毒HN基因的核酸疫苗pIRSFV-HN在体外可有效地抑制肿瘤细胞；在体内可促使免疫趋向Th1优势，提高其抑瘤免疫水平。