非缺血性心脏病猝死的分子生物学研究进展

猝死(sudden death)是一种突然、意外的自然死亡.死亡的原因十分复杂,按世界卫生组织(WHO)规定,发生在24 h之内突然、意外死亡才能定为猝死.猝死若是由心血管疾病引起的称为心脏性猝死(sudden cardiac death),它是猝死的第一大原因,仅在美国每年就有超过30万病例[1].虽然冠心病是心脏性猝死的最主要原因,但是非心肌缺血病例在解剖时经常会遇到.其中心律异常所致突然死亡占猝死的5%,这类疾病并没有发现心脏的结构异常,主要有长QT综合征(long QTsyndrome,LQTs)、心室预激惹和自发性心室纤维震颤(idiopathic ventricular fibrillation,IVP)或Brugadasyndrome及近年来报道的短QT综合征(short QTsyndrome,SQTs)等[2].另外,常见的心肌功能紊乱引起的猝死是由于心室肌肥厚、心舒张功能异常的心肌肥厚症(hypertrophic cardiomyopathy,HCM),导致心律不齐性右心室发育异常(arrhythmogenicright ventricular dysplasia,ARVD).本文主要就引起QT综合征患者猝死的最新分子医学研究进展进行综述.     

广东汉族群体Y染色体DYFl55S1基因座3′端多态性研究

【目的】揭示广东汉族人群Y染色体小卫星DYFl55S1基因座3′端多态性。【方法】采用．Amp-FLP和荧光MVR-PCR方法扩增，PCR产物用ABl377电泳或中性聚丙烯酰胺凝胶电泳-银染方法分析。【结果】155例无关男性个体的4型核心序列MVR图谱第l条DNA片段大小均为133bp。155例共检出有24种等位基因。有7个等位基因仅出现1次，频率最高的为9号等位基因，DNA条带数为连续的13个，频率为0．1355；基因多样性(h)为0．9226。155人中有3人表现为连续DNA谱带中有1个DNA条带的缺失(null repeat)，序列分析证明缺失的DNA条带位置对应于3型核心序列。【结论】揭示了DYFll55S1位点3′端多态性及其等位基因频率。为群体遗传学研究及法医学应用提供了基础资料。     

亲权鉴定判定标准可靠性的进一步确认

【目的】进一步确认我室确定的亲子鉴定判定标准的可靠性。【方法】分析本鉴定中心近几年亲子鉴定案例的结果，利用国内外群体相关基因频率资料对标准进行统计学分析并通过实践检验。【结果】利用15个常染色体STR位点分型作亲子鉴定时，判定被鉴定人之间是否具有亲生关系，对于双亲案，若符合孟德尔遗传规律，且亲权概率能够达到0．999以上，则认定被鉴定人之间具有亲生关系。若检测系统中有1个或2个位点出现矛盾，则分别增加检测位点至18个或24个，没有发现新的矛盾位点时，计算父权概率，超过0．999以上，则认定有亲生关系。只有在所检测位点中有3个或3个以上的STR位点违反孟德尔遗传规律时，才可以否定被检者之间具有亲生关系。对于单亲案，在不违反孟德尔遗传规律的前提下，只能下不排除亲生关系的结论，若有3个以上位点矛盾时，才下排除的结论。【结论】实验结果证明本中心制定和使用的判定亲权关系的标准是一个合理、可靠和实用的标准。     

亲权鉴定判定标准可靠性的进一步确认

[目的]进一步确认我室确定的亲子鉴定判定标准的可靠性.[方法]分析本鉴定中心近几年亲子鉴定案例的结果,利用国内外群体相关基因频率资料对标准进行统计学分析并通过实践检验.[结果]利用 15个常染色体 STR位点分型作亲子鉴定时,判定被鉴定人之间是否具有亲生关系,对于双亲案,若符合孟德尔遗传规律,且亲权概率能够达到 0.999以上,则认定被鉴定人之间具有亲生关系.若检测系统中有 1个或 2个位点出现矛盾,则分别增加检测位点至 18个或 24个,没有发现新的矛盾位点时,计算父权概率,超过 0.999以上,则认定有亲生关系.只有在所检测位点中有 3个或 3个以上的 STR位点违反孟德尔遗传规律时,才可以否定被检者之间具有亲生关系.对于单亲案,在不违反孟德尔遗传规律的前提下,只能下不排除亲生关系的结论,若有 3个以上位点矛盾时,才下排除的结论.[结论]实验结果证明本中心制定和使用的判定亲权关系的标准是一个合理、可靠和实用的标准.     

冬凌草甲素对白血病NB4细胞的生长抑制作用

目的：探讨冬凌草甲素对急性白血病NB4细胞的生长抑制作用。方法：以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的NB4细胞，MTT法检测细胞生长抑制率，应用Hoechst 33258荧光染色法观察药物作用后细胞形态学的变化。结果：冬凌草甲素可显著抑制NB4细胞的生长并诱导细胞发生凋亡，并呈现出明显的量-效与时-效关系，在Hoechst染色图片上可见细胞核染色质浓缩及核碎裂等典型的凋亡改变：结论：冬凌草甲素能抑制NB4细胞的生长及诱导细胞凋亡，具有显著的体外抗白血病作用，这为冬凌草甲素进一步应用于临床治疗白血病提供了有力的试验依据。     

干扰素α对Raji细胞的生长抑制作用及其作用机制

目的：探讨干扰素α对白血病Raji细胞的生长抑制作用及其作用机制。方法：以不同浓度的干扰素α作用于体外培养的Raji细胞，MTT法检测细胞生长抑制率，应用流式细胞仪及hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡，FRAP-PCR-ELISA法检测细胞凋亡前后的端粒酶活性。结果：干扰素α可显著的降低Raji细胞端粒酶活性，抑制细胞的生长及诱导细胞发生凋亡。并呈现出明显的量-效与时-效关系。结论：干扰素α能抑制Raji细胞的生长并诱导细胞发生调亡，降低细胞端粒酶活性可能是其重要作用机制之一。     

混合DNA样品池应用的研究

将个体ＤＮＡ提取出来后，按一定方式进行混合，构成混合ＤＮＡ样品池，这种混合ＤＮＡ样品可用于病因未明的遗传性及遗传倾向十分明显疾病的研究。此方法比通常的连锁分析省时、省力。在肿瘤相关基因或遗任基因的研究中以混合ＤＮＡ样品用比较基因组杂交法对些结果也显示它的实用性。另外，混合ＤＮＡ样品也可用在医学的个体认定、基固定变的检测及短串联重复序列的鉴定，是一个值得研究和推广的方法。     

脂质体介导的基因转染效率与肺癌细胞的增殖特性的关系

目的：简化粘附性LAK（A－LAK）细胞的制备方法并观察其与苯乙酸（PA）的协同抗瘤作用。方法：采用苯丙氨酸甲酯（PME）处理肝癌患者外周血单个核细胞（PBMC）而制备A－LAK细胞;观察人肝癌SMMC7721细胞株经PA处理后增殖能力的变化;并用经PA预处理的SMMC7721培养上清液作用于A－LAK细胞,观察A－LAK增殖能力与杀伤活性的变化。结果：采用PME制备的A－LAK细胞,其增殖能力显著高于非粘附性LAK细胞（NA－LAK）和常规LAK细胞;肿瘤细胞经PA作用后,生长明显受 到抑制;肿瘤细胞的培养上清液可明显抑制A－LAK的增殖与杀伤活性,而经苯乙酸预处理的上清液则抑制作用减弱。结论：采用PME可 简便快速地制备A－LAK,而苯乙酸可与A－LAK协同发挥抗瘤作用。     

自杀基因疗法联合化疗对癌胚抗原表达型肺肿瘤的杀伤作用

目的：探讨阳离子脂质体介导E.coli cd/HSV-1tk融合自杀基因联合长春瑞滨对癌胚抗原阳性肺癌的体内杀伤作用。方法：裸鼠皮下接种肺癌细胞SPCA－1后第5、9、13天,腹腔注射阳离子脂质体／pE-CEAcd-tk复合物,于第6－15天连续腹腔注射5－氟胞嘧碇＋丙氧鸟苷前体药物进行自杀基因治疗。于第5、13天给予长春瑞滨进行联合治疗。结果：阳离子脂质体介导融合自杀基因联合长春瑞滨使小鼠皮下的肿瘤结节的生长受到显著抑制,其平均瘤体体积显著小于单独自杀基因或化疗治疗组的平均瘤体体积（P＜0．01）。结论：阳离子脂质体介导E.coli cd/HSV-1tk融合基因联合长春瑞滨化疗在体内在有效抑制肺瘤的生长,为癌胚抗原阳性肺癌的治疗提供了1条新的途径。     

家族性精神分裂症的定量性状与1号染色体的连锁分析

目的 探讨家族性精神分裂症的定量性状位点与1号染色体的分子遗传学关系。方法 在32个家族性精神分裂症家系中，选择以下量表对精神分裂症患者的性状进行定量，包括：阳性和阴性综合征量有、功能全面评定量表、病前分裂样和分裂型特质量表、病前社会适应量表，结合1号染色体上29个DNA多态标记位点的扫描数据，进行数量性状的遗传分析。结果 精神分裂症的阴性症状在147.64cM位置得到最大Trad H-E Lod值为1.73、最大EH H－E Lod值为1.65，此区域与质量性状连锁分析在1q21-23的峰值区域重叠。结论 提示精神分裂症阴性症状在1q21-23可能有独立的数量性状位点。