FBXW7基因点突变对结直肠癌HCT-116细胞的增殖、迁移、侵袭和抗 凋亡能力的影响

目的： 探讨FBXW7基因点突变对结直肠癌细胞株HCT-116增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。 方法： 通过构建FBXW7 基因野生型及突变型过表达的重组载体,并将其转染HCT-116细胞,应用Western blotting检测转染后FBXW7蛋白表达情况。 CCK-8检测细胞增殖能力,平板细胞克隆形成实验(HTCA)检测肿瘤细胞克隆形成能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,划痕及 Transwell细胞迁移实验检测细胞迁移和侵袭能力。 结果： 转染野生型FBXW7基因的HCT-116细胞中FBXW7蛋白表达水平高 于对照组（转染突变型FBXW7基因的HCT-116细胞）、阴性对照组（转染空质粒载体pEZ-M90的HCT-116细胞）及空白对照组（未 进行任何特殊处理的HCT-116细胞） （均P<0.05）。转染野生型FBXW7的HCT-116细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力相较 于其余各组均显著下降（均P<0.05）,且细胞凋亡率显著升高（P<0.05）。 结论： FBXW7基因点突变可使其蛋白表达水平降低,从 而促进结直肠癌HCT-116细胞的增殖、迁移和侵袭,并抑制其凋亡。     

腹腔镜下低位直肠癌经肛外翻拖出切除的自然腔道取标本手术操作技巧探讨

目的 探讨腹腔镜下低位直肠癌经肛外翻拖出切除的自然腔道取标本手术(NOSES)操作技巧。方法 选择2017年1月至2021年12月于四川省肿瘤医院行腹腔镜下经肛外翻拖出切除的NOSES的低位直肠癌患者67例,分析其手术时间、术中出血、术后并发症、住院时间及肿瘤复发、转移等情况。结果 本组67例患者均顺利完成手术,无一例中转开腹。其中,3例患者同时行单侧侧方淋巴结清扫,43例(64.2%)术中行预防性回肠造瘘。手术时间为200～590 min,平均为320.1 min;术中出血量为5～300 ml,平均为64.3 ml。无一例发生腹腔污染。术后平均21.9 h(1～88 h)经肛门或造瘘口排气。术后发生吻合口漏1例,尿潴留3例,不全性肠梗阻5例,均行保守治疗后痊愈。术后平均住院时间为10.6 d(7～26 d)。术后随访至2022年6月,发现盆腔复发1例,出现远处转移5例。结论 腹腔镜下经肛外翻拖出切除的NOSES具有创伤小、恢复快、疗效好等优点。只要术前严格把控适应证,恪守无菌和无瘤原则,掌握关键操作技巧,可以有效地避免腹腔污染,降低肿瘤医源性扩散风险。     

AGEs通过JAK2/STAT3信号通路诱导结肠癌SW480细胞增殖、侵袭及上皮间质转化

目的 观察糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)对结肠癌SW480细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移及上皮间质转化的影响,并探讨其相关机制.方法 将结肠癌SW480细胞分为对照组、AGEs组(200 μg/mL AGEs)、AGEs(200 μg/mL)+AG490(50 μmol/L)组,CCK-8检测细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞周期、凋亡,Transwell实验检测细胞体外侵袭能力,划痕实验检测细胞体外迁移能力.不同浓度(0、50、100、200 μg/mL) AGEs和200 μg/mL AGEs、50 μmol/L AG490单独处理及二者联合处理SW480细胞后,Western blot检测上皮间质转化相关分子标志物E-cadherin、N-cadherin、Vimentin及JAK2/STAT3信号通路相关分子的变化.结果 与对照组比较,AGEs能明显促进结肠癌SW480细胞的增殖,减少G1/S期阻滞,抑制凋亡,增强体外的侵袭、迁移能力(P＜0.05).与AGEs组比较,AGEs+ AG490组结肠癌SW480细胞增殖减少,G1/S期阻滞增加,凋亡增加,侵袭、迁移能力降低,差异有统计学意义(P＜0.05).Western blot检测结果显示,AGEs处理结肠癌SW480细胞后E-cadherin表达降低,N-cadherin、Vimentin、p-STAT3、p-JAK2表达升高,而AG490可逆转AGEs对结肠癌SW480细胞的作用.结论 AGEs能够通过JAK2/STAT3信号通路促进结肠癌SW480细胞的增殖,抑制凋亡,增强侵袭、迁移能力,促进上皮间质转化.     

腹腔镜外翻拖出式经括约肌间切除联合改良Bacon术在低位直肠癌超低位保肛中的应用（附6例报道）

［摘要］　目的　探讨腹腔镜外翻拖出式经括约肌间切除（ISR）联合改良Bacon术在低位直肠癌超低位保肛中的应用。方法　回顾性分析2023年3月至12月四川省肿瘤医院大肠外科采用外翻拖出式ISR联合改良Bacon术进行腹腔镜根治性切除、超低位保肛的6例低位直肠癌患者的临床资料,探讨近期临床效果,总结手术技巧。结果　6例患者均顺利完成手术,手术时间200～320 min,平均256.7 min;术中失血量20～100 mL,平均48.3 mL。术后1例患者出现外置肠段脱垂,行再次手术切除;2例患者出现外置肠段系膜局部缺血,行保守治疗后好转。所有患者均顺利恢复,术后6～11 d出院,平均术后住院时间8.2 d。所有患者均于术后21 d施行二期外置肠段切除和肛门成形术,术后3～6 d好转出院,平均术后住院时间4.3 d。随访至2024年3月,所有患者无肿瘤复发或转移,二期术后3个月Wexner肛门失禁评分1～5分,平均3.2分,肛门控便功能满意。结论　腹腔镜外翻拖出式ISR联合改良Bacon术有助于实现肿瘤远端的精准切除,能极大降低经肛切除的操作难度,而且避免了预防性肠造口,术后肛门功能满意,有望成为低位直肠癌行超低位保肛手术的新选择。     

腹腔镜下结直肠癌NOSES术中保留左结肠动脉的中远期疗效观察

目的 观察腹腔镜下结直肠癌经自然腔道取标本手术(NOSES)中保留左结肠动脉(LCA)的中远期临床疗效。方法 回顾性分析2016年7月至2021年12月于四川省肿瘤医院行NOSES的155例直肠、乙状结肠癌患者的临床资料,根据术中是否保留LCA将其分为保留LCA组(80例)和不保留LCA组(75例),比较两组术后复发、转移及中远期生存情况。结果 保留LCA组随访4～65个月,不保留LCA组随访7～71个月。在随访期间发生局部复发或远处转移保留LCA组4例(5.1%),不保留LCA组7例(9.5%)。两组无病生存期(DFS)比较差异无统计学意义(P>0.05)。进一步以TNM分期进行分层分析,两组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者的DFS比较差异亦无统计学意义(P>0.05)。保留LCA组死亡2例(2.5%),不保留LCA组死亡2例(2.7%),两组总生存期(OS)比较差异无统计学意义(P>0.05)。以TNM分期进行分层分析,两组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者的OS比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 腹腔镜结直肠癌NOSES中严格遵守肿瘤外科手术原则,在保留LCA的同时彻底清扫肠系膜...     

缺氧诱导因子1 -α参与结直肠癌细胞上皮间质转化及DNA同源重组修复的机制

目的:研究氯化钴(CoCl2)模拟的细胞体外缺氧微环境对结直肠癌细胞株SW480及Caco-2上皮间质转化及DNA同源重组修复的影响并探究其机制.方法:应用不同浓度的氯化钴(CoCl2)处理SW480及Caco2细胞72 h后,CCK8法检测细胞增殖能力,划痕及Transwell试验检测细胞的迁移及侵袭能力,流式细胞术(FCM)检测细胞周期及凋亡情况,RT-PCR及Western blotting实验检测细胞内相关基因mRNA及蛋白水平的变化情况.结果:CCK-8实验提示细胞在缺氧后增殖能力明显增加(P＜0.05);划痕试验及Transwell侵袭实验提示细胞在缺氧条件下迁移及侵袭能力明显增强(P＜0.05);流式细胞术提示细胞在缺氧后被阻滞在S期(P＜0.05),凋亡率明显下降(P＜0.05);RT-PCR试验表明缺氧后细胞内缺氧诱导因子1-α(hypoxia inducible factor 1 alpha,HIF-1α)及RAD51的mRNA水平上调(P＜0.05);Western blotting实验表明在缺氧环境下细胞内HIF-1α表达上调(P＜0.05),上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition)相关蛋白:钙黏附蛋白E(E-cadherin)表达下调,波形蛋白(vimentin)及转录抑制因子(snail)表达上调(P＜0.05),DNA同源重组相关蛋白BRCA1及RAD51表达上调(P＜0.05),PI3K/AKT(磷脂酰肌醇-3-羟激酶)信号通路下游关键信号分子AKT1及共济失调毛细血管扩张症突变基因(ataxia-telangiectasia mutant gene)的编码产物ATM激酶磷酸化水平显著上调(P＜0.05).结论:慢性缺氧环境可促进结直肠癌细胞SW480及Caco-2的增殖、迁移和侵袭能力,抑制凋亡,其机制可能与HIF-1 α/PI3 K-AKT、HIF1-α/ATM信号通路介导EMT及DNA同源重组修复过程有关.