IL-8/miR-182正反馈调控轴在非小细胞肺癌中的作用机制研究

目的 探讨白细胞介素-8(IL-8)和微小RNA-182(miR-182)在非小细胞肺癌（NSCLC）中的相互作用,及促进NSCLC细胞增殖和侵袭的机制。方法 选取NSCLC患者40例（NSCLC组）,收集其术前血清样本和术中切除的癌组织及癌旁组织样本。以40名体检健康者作为正常对照组。检测血清IL-8水平和癌组织、癌旁组织miR-182表达量。采用细胞学相关实验分析miR-182和IL-8对人NSCLC细胞株A549增殖和侵袭的影响、IL-8对miR-182的调节作用,以及miR-182影响IL-8表达的信号通路。结果 NSCLC组血清IL-8水平显著高于正常对照组（P<0.01）。NSCLC患者癌组织miR-182相对表达量显著高于癌旁组织（P<0.01）。IL-8通过miR-182促进A549细胞的增殖和侵袭。IL-8通过信号转导及转录激活因子3(STAT3)上调miR-182的表达。miR-182通过调节NF-κB信号通路上调IL-8的表达。结论 NSCLC患者IL-8和miR-182均呈高表达,且通过IL-8/STAT3/miR-182/NF-κB/IL-8正反馈...     

miR-93 通过靶向EphA4 激活ERK通路促进非小细胞肺癌细胞的增殖和迁移

目的：探讨miR-93/Eph受体A4（EphA4）分子轴通过细胞外调节蛋白激酶（extracellular regulated protein kinases,ERK）通路对非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）H460 和H1299 细胞增殖和迁移的影响。方法：用qPCR 检测H460 和H1299 细胞中miR-93 表达水平。分别在H460 细胞中转染miR-93 模拟物（mimics）和EphA4 过表达质粒、在H1299 细胞中转染miR-93 抑制剂（inhibitor）后,用MTT、Transwell 实验检测miR-93 对转染细胞增殖和迁移的影响。用双荧光素酶报告基因实验验证miR-93 与EphA4 之间的靶向调控关系。用Western blotting检测细胞中增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）、EphA4、ERK和p-ERK 蛋白的表达水平,用MTT、Transwell 实验检测同时过表达miR-93 和EphA4 对H460 细胞增殖和迁移的影响。结果：miR-93 在H1299 细胞中表达水平高于H460 细胞（P<0.01）。过表达miR-93 促进H460 细胞增殖和迁移（均P<0.01）,敲低miR-93 抑制H1299 细胞增殖和迁移（均P<0.01）。双荧光素酶报告基因实验证实miR-93靶向调控EphA4,过表达miR-93明显下调H460细胞中EphA4 mRNA和蛋白表达水平（均P<0.05）,过表达miR-93 通过靶向EphA4 并激活ERK通路促进H460 细胞的增殖和迁移（均P<0.01）。结论：miR-93 促进NSCLC细胞增殖和迁移,其机制可能与靶向调控EphA4 并激活ERK通路有关。