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切割MDR1 RNA的核酶(Ribozyme)对肝癌多药耐药细胞株BEL-7402/DOX化疗耐药性的逆转作用 总被引：1，自引：0，他引：1
为逆转肿瘤多药耐药基因(MDR1)产物P-gp蛋白所介导的肿瘤细胞对多种化疗药物的耐受性,设计合成了一种能切割MDR1 mRNA第196密码子GUC序列的锤头状核酶(Ribozlyme)并定向克隆于转录病毒载体pDOR-neo的BamH Ⅰ位点.经病毒包装细胞PA317包装后感染人肝癌多药耐药细胞株BEL-7402/DOX细胞,经G418筛选得到稳定的转化细胞株.Northem Blot杂交证实包装细胞PA317及转化的BEL-7402/DOX细胞中均有病毒的高表达,RT-PCR证实转化细胞中MDR1 mRNA与未转化细胞相比明显减少甚至不能扩增出来,流式细胞技术检测转化细胞P-gp的表达与非转化细胞的93.4～97.5%相比下降至8.2～14.6%.MTT法检测证实转化细胞对多种化疗药物重新产生较高的敏感性.结果表明,表达Ribozyme的逆转录病毒载体转化肝癌多药耐药细胞BEL-7402/DOX后能有效抑制MDR1的表达和翻译,使已产生耐药的肿瘤细胞的多药耐药表型发生逆转. 相似文献
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