我国登革2型病毒43株包膜E蛋白基因的特征

对我国1987年流行的登革2型病毒43株包膜E蛋白基因的核苷酸序列进行了分析。结果表明登革2型病毒43株包膜E蛋白基因核苷酸序列含1485个核苷酸，编码495个氨基酸，并就其核苷酸序列及其相应的氨基酸序列与其它的登革2型病毒株进行了比较，发现核苷酸序列与我国1985年分离的登革2型病毒04株，新几内亚C株（NGC），牙买加株1409（JAM）和马来西亚当地流行株M1（登革出血热）、血2（登革休克综合征）、M3（登革热）同源性分别是95.8%、94.6%、97.5%、925%、92.7%和939%，氨基酸序列的同源性分别是94.3%、94.3%、96.0%、93.7%、93.7%和91.5%，推断出的氨基酸序列显示出12个保守的半胱氨酸残基和两个潜在的糖基化位点，分别位于Asn-67和Asn-153位。     

长链PCR技术研究进展

长链PCR(longPCR)技术是将传统DNA聚合酶与具有 3′ 5′核酸外切酶活性的DNA聚合酶混合 ,利用前者较强的延伸能力和后者的校正功能 ,通过优化反应液组成及热循环条件 ,能够扩增出长达 4 0kb的特异产物 ,在病毒基因组研究及基因检测等方面显示出很好的应用前景。本文就长链PCR技术的原理、反应条件的优化及技术应用进行了综述     

用标记分析法检测我国海南省登革2型病毒抗原性变化

我们试用标记分析法,用3种单克隆抗体(黄病毒科特异性、登革病毒属特异性和登革病毒2型型特异性单克隆抗体)研究了我国海南省1985～1987年3年内流行的登革2型病毒8个流行株的抗原性变化,并与标准株新几内亚B株进行了比较。发现6株与标准株类似,2株显示出明显的差异。标记分析法为病毒抗原分析提供了一个简便、快速的方法,可用来监测一个地区病毒株群的变化及新株的传入。     

应用长链RT-PCR法扩增我国登革2、4型病毒株全长cDNA

目的：采用长链RT-PCR技术扩增登革2型及4型病毒基因组全长cDNA，为构建登革病毒全长cDNA克隆、表达，深入阐明致病机理及探索新型疫苗奠定基础。方法：根据已测定的登革2、4型病毒全基因组序列，设计上下游引物。从感染登革病毒的乳鼠脑中提取病毒基因组RNA，采用长链RT-PCR技术进行扩增。为检验扩增产物的特异性，以PCR产物为模板扩增覆盖基因组的10个片段。将含有复杂二级结构的5′非编码区扩增片段，在377A型自动测序仪进行序列分析。结果：扩增出登革2、4型病毒基因组全长近11kb cDNA分子，非编码区测序结果表明扩增产物为登革2、4型病毒所特有。结论：利用长链RT-PCR首次成功扩增出登革病毒全长cDNA分子。     

登革2型病毒全长cDNA克隆定点诱变的OL-PCR方法

目的 对带有登革2型病毒（DEN-2）全长cDNA的质粒pDVWS501上E62、E203位点进行定点诱变。方法 设计4对点诱变引物,运用OL-PCR（overlapPCR)法,扩增出分别在E62或E203位带有点突变的2条DNA片段,克隆至T载体,获T-TB62、T-TB203两个克隆,将T-TB62用ClaⅠ和SphⅠ分别酶切,T-TB203用SphⅠ NheⅠ酶切后,用T4连接酶分别连接至pDVWS501,获重组质粒TB62和TB203。对TB62和TB203进行序列测定。结果 成功得到分别在E62、E203位带有点突变的TB62、TB203克隆。结论 OL-PCR法是具有较高突变效率的定点诱变方法。     

纯化 Sindbis 病毒抗原性的观察

利用聚乙二醇(PEG)沉淀法结合蔗糖密度梯度速率区带离心(DGC)对Sindbis(SIN)病毒进行浓缩提纯。经纯化后病毒的感染性及血凝活性明显增强。应用纯化抗原可提高补体结合、血凝抑制及酶联免疫吸附等试验的特异性和敏感性。     

高液压瘢痕注射器的研制

我国青壮年中瘢痕疙瘩的发病率相当高,单纯手术切除甚易复发。为适应广大瘢痕疙瘩患者注射治疗的需要,我们研制出一种省时、省力、造价低廉的高液压瘢痕注射器,其性能优良,完全可以取代国外专用于瘢痕内药物注射的无针头注射器(DERMO-JET)。原理和结构本注射器分两部分:前部是针筒,由外向内依次为不锈钢套管,钢化玻璃针芯,可伸缩的由医用硅胶合成的两层活塞,带刻度和剂量微调的金属     

登革热减毒活疫苗研究进展

登革病毒 (ＤｅｎｇｕｅＶｉｒｕｓ,ＤＶ)感染引起的疾病是最重要的虫媒病毒病之一。自 1978年以来我国南方每隔几年就暴发一次。 1999年 8月在福州市城乡结合部发生登革热流行 ,患者达 10 0 0多人〔1〕。南亚、东南亚均是登革热高发区。登革病毒为有包膜的单股、正链ＲＮＡ病毒。基因组长 10～ 11ｋｂ,编码 3种结构蛋白 (Ｃ、ＰｒＭ、Ｅ)和 7种非结构蛋白 (ＮＳ1、ＮＳ2ａ、ＮＳ2ｂ、ＮＳ3、ＮＳ4ａ、ＮＳ4ｂ、ＮＳ5 )。自然界存在的登革病毒有 4个血清型 (1～ 4) ,每型均可引起患者出现多种症状 ,从较温和的登革热 (ＤＦ)到严重的致死性的…     

高液压瘢痕注射器的研制

高液压瘢痕注射器的研制刘文阁杨佩英我国青壮年中瘢痕疙瘩的发病率相当高，单纯手术切除甚易复发［１］。为适应广大瘢痕疙瘩患者注射治疗的需要，我们研制出一种省时、省力、造价低廉的高液压瘢痕注射器，其性能优良，完全可以取代国外专用于瘢痕内药物注射的无针头注射...     

登革病毒的感染及复制研究进展

登革病毒属于黄病毒科黄病毒属,是具包膜的单股正链RNA虫媒病毒。其包膜蛋白E与细胞受体的结合介导病毒进入细胞,随后在感染细胞浆内复制。随着对非结构蛋白的深入研究,发现NS1、NS2A、NS3、NS4A及NS5蛋白均参与了病毒复制合体的形成,在成熟病毒颗粒的最终形成过程中,需要NS2B／NS3蛋白酶对C蛋白前体的切割及缩主细胞的糖基转移酶对prM、E蛋白糖侧链的正确加工。本文综述了登革病毒受体、病毒的复制及装配过程等方面的最新研究进展。