重组人角质细胞生长因子-2基因的克隆和表达

目的：克隆人KGF-2基因，并在大肠杆菌中进行表达。方法：通过PCR扩增，从人胎肝cDNA文库中获得编码人KGF-2的cDNA，并将其分别克隆入pBV220，pLEX和pGEX4T-1质粒中，研究其在不同表达质粒和大肠杆菌中的表达情况。结果：克隆得到的KGF-2cDNA经测序证明与文献报道的序列一致。将其克隆于pBV220质粒中，在E．coli JM109中表达量相对最高，约占茵体总蛋白的4％；克隆于pLEX质粒中，在E．coli G1724中的表达量约占全茵总蛋白的5％；克隆于pGEX4T-1中，在E．coli JM109中的表达量可占到全茵总蛋白的20％。结论：采用GST融合蛋白表达质粒pGEX4T-1对KGF-2进行表达，较pBV220和pLEX具有明显优势，能实现对KGF-2的高效表达，为进一步的功能研究奠定了基础。     

重组人血管生成素的生物学功能研究

为深入了解血管生成素的生物学作用，探讨其在免疫、造血、血管新生和神经方面可能的生物学功能，我们选择了多种细胞和组织进行实验分析ANG研究。结果表明：其对ECV304和COS7细胞具有促增殖作用，并可观察到明显的促ECV304细胞贴壁的作用；Ang具有明显地促KG—1a增殖的作用，其具体的分子机制有待于进一步的深入研究；Ang对造血干细胞形成集落没有作用，同时发现亦不存在与GM—CSF的协同作用；Ang缺乏直接对鸡胚背根神经节的作用，但可能对胶质细胞的生长有一定的影响。     

体外胰岛素样生长因子结合蛋白-1对人血管内皮细胞生长的抑制作用

目的 观察胰岛素样生长因子结合蛋白-1对人血管内皮细胞的影响及其对胰岛素样生长因子的调节作用。方法 MTT比色法观察IGFBP-1及与IGF-1预混后对脐静脉内皮细胞(ECV304细胞株)生长影响。结果 IGFBP-1对内皮细胞ECV304的生长具有抑制作用且与剂量成正比；预混后各组IGF-1促细胞生长作用明显被抑制。结论 IGFBP-1既可以直接也可以通过调节IGF-1抑制血管内皮细胞生长。     

抗细菌核心糖脂域McAb对LPS体外诱导细胞释放TNF－α和IL－6及其mRNA表达的影响

用细胞因子活性检测，Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ方法，在体外研究了抗细菌核心糖脂域ＭｃＡｂ（ＥＬ１、ＥＬ３和３Ｈ４）对ＬＰＳ诱导人外周血单核细胞（ｈＰＢＭＣ）释放ＴＮＦ－α和ＩＬ－６及其ｍＲＮＡ表达水平的影响。结果表明，ＥＬ１、ＥＬ３和３Ｈ４在体外有抑制ＬＰＳ诱导细胞释放ＴＮＦ－α和ＩＬ－６的作用；Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ结果证实，这３株ＭｃＡｂ能分别降低细胞ＴＮＦ－α和ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达的水平；提示抗细菌核心糖脂域ＭｃＡｂ可能通过与ＬＰＳ的结合而中和ＬＰＳ，从而降低或阻碍了效应细胞炎性细胞因子ｍＲＮＡ的表达，达到降低相应细胞因子的作用。     

白细胞介素－6含量变化在急性肺损伤发病中的作用

白细胞介素－６含量变化在急性肺损伤发病中的作用刘林英孙滨彭善云吕宝璋实验观察了内毒素急性肺损伤大鼠血清和支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中白细胞介素－６（ＩＬ－６）含量的变化，以探讨急性呼吸窘迫综合征（ＡＲＤＳ）的发病机制。健康雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠４４只...     

IL-2基因转导对人乳腺癌细胞MHC抗原及细胞膜糖蛋白表达的调控作用

ＩＬ┐２基因转导对人乳腺癌细胞ＭＨＣ抗原及细胞膜糖蛋白表达的调控作用于晓唐佩弦张明伟彭善云黄碧莲侯春梅毛宁为探讨细胞因子基因转导对于肿瘤细胞膜ＭＨＣ抗原及细胞膜糖蛋白表达调控的影响及其对肿瘤细胞产生免疫修饰的可能机制，我们采用脂质体介导的方法将含人Ｉ...     

与内皮抑制素相互作用的蛋白及其抑制血管生成作用的分子机制

目的:探讨与内皮抑制素相互作用的蛋白,阐明其抑制血管生成作用的分子机制。方法:实验于2002-01/2004-12在解放军总医院呼吸科实验室、军事医学科学院放射医学和生物工程研究所实验室完成。应用酵母双杂交系统3,以内皮抑制素为诱饵,筛选人肝cDNA文库,寻找与之相互作用的蛋白。再利用一对一酵母回复性杂交、β-GAL实验和生物信息学分析技术筛除假阳性克隆。结果:成功构建稳定表达内皮抑制素基因的载体;酵母双杂交共获得281个克隆,经验证,6个为阳性克隆,测序发现其中一个克隆为未知序列;FASTCAT试验发现阳性克隆中4个克隆可明显的与内皮抑制素相互作用。结论:6个阳性克隆表达的蛋白可能能与内皮抑制素相互作用,并不同程度的参与了内皮抑制素调节的血管生成过程。     

断节前纤维后大鼠交感节后神经元递质的组化观察

在探讨交感神经递质可塑性的初步工作中我们已观察到断节前纤维后大鼠颈上节节后神经元及其轴突末梢内儿茶酚胺(CA)荧光数量及分布的改变。本工作是在同样条件下,观察节后神经元内乙酰胆硷酯酶(ACHE)活性变化,结合CA荧光的改变以分析探讨在体的交感神经元在失去传入神经支配后由肾上腺能向胆硷能转化的可能性。     

用HBcAg直接包被ELISA竞争法检测血清中抗-HBc

用HBcAg直接包被ELISA竞争法检测血清中抗HBc,省时又经济;与抗体包被法结果一致.     

胶质细胞源性神经营养因子基因的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达

目的：分离胶质细胞源性神经营养因子（ｇｌｉａｌ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ,ＧＤＮＦ）基因,并在Ｅ．ｃｏｌｉ中获得表达。方法：从人多形性成胶质细胞瘤细胞株ＢＴ３２５ 中提取总ＲＮＡ ,利用ＲＴ－ＰＣＲ技术分离ＧＤＮＦ基因,构建表达载体ｐＢＶ－ＧＤＮＦ,转化大肠杆菌,温控诱导ＧＤＮＦ的表达。结果与结论：分离得到的人ＧＤＮＦ基因,在大肠杆菌中得到高效表达,表达产物占全菌总蛋白的２４．７％ ,初步纯化后纯度达９０％ 以上。