TGF-β2通过基质金属蛋白酶通路影响胶质瘤干细胞的侵袭能力

目的： 研究TGF-β2对胶质瘤干细胞侵袭能力的影响及其可能机制。 方法： 收集2016年4月至2017年4月中国医科 大学附属第一医院神经外科手术切除的8例人多形性成胶质细胞瘤组织标本,通过胰蛋白酶消化法进行胶质瘤细胞原代培养,部 分胶质瘤细胞加入含有EGF、bFGF、B27的DEME/F12培养基中进行无血清培养获得悬浮生长的肿瘤细胞球,免疫荧光染色及分 化实验验证肿瘤球是否为胶质瘤干细胞。ELISA方法检测胶质瘤干细胞分泌TGF-β2的水平,转染TGF-β2 siRNA后应用Tran- swell方法检测TGF-β2对胶质瘤侵袭能力影响,Western blotting检测TGF-β2对胶质瘤干细胞中基质金属蛋白酶（matrix metallo- proteinase,MMP）表达影响。 结果： 通过免疫荧光染色及分化实验证明原代培养的悬浮生长肿瘤细胞球为胶质瘤干细胞,肿瘤 细胞球表达CD133,在含血清培养基中可以分化为神经元和胶质细胞。胶质瘤干细胞比原代培养的胶质瘤 TGF-β2 分泌水平 明显升高[(74.13±3.63) vs (46.13±2.61) pg/ml, P<0.05]。沉默 TGF-β2 可以降低胶质瘤干细胞侵袭细胞数[(105.71±8.69) vs (63.67±5.93)个,P<0.05],并抑制MMP-2和MMP-9表达（均P<0.05）。 结论： TGF-β2 通过 MMP-2 和 MMP-9 通路增强胶质瘤 干细胞的侵袭能力。     

蔬菜中有机磷农药多残留的测定

目的:应用气相色谱程序升温和不分流进样方式,测定蔬菜中多组分有机磷类农药残留量。方法:样品经液液萃取,硅胶柱净化,浓缩后由气相色谱法测定,进行准确度,精密度及线性试验。结果:5种有机磷类农药测定的精密度相对标准偏差RSD(%n=6)为078~8.6;检测限为2~4μg/kg;回收率74%~88%。结论:方法快速简便,回收率、精密度较好,符合检测要求,适合蔬菜类食品中多种有机磷农药测定。     

Yes相关蛋白对人脑胶质瘤干细胞增殖的促进作用

目的探讨Hippo信号传导通路下游转录共激活子Yes相关蛋白(YAP)在人脑胶质瘤干细胞中调控作用。方法利用FACS分选得到CD133-和CD133+细胞,利用PCR和Western blot法检测2组细胞间YAP表达的差异;利用小发夹RNA干扰CD133+细胞中YAP的表达,通过MTT法分析YAP干扰表达后人脑胶质瘤干细胞增殖情况。结果 YAP m RNA和蛋白在CD133+细胞中表达明显高于CD133-细胞;YAP干扰表达后CD133+细胞增殖能力减弱。结论 YAP参与人脑胶质瘤干细胞的功能调控,对人脑胶质瘤干细胞的增殖起到促进作用。     

锌转运体1基因在脑胶质瘤组织中的表达及其对U87细胞增殖、迁移和 侵袭能力的影响

目的： 检测锌转运体1(zinc transporter 1,ZnT1)基因在胶质瘤组织中的表达,初步探索ZnT1对U87细胞增殖、迁移和 侵袭能力的影响。 方法： 收集2015年10月至2017年1月中国医科大学附属第一医院神经外科收治的术前未接受过放化疗的 Ⅱ～Ⅲ期胶质瘤患者20例,采用Real-time PCR和Western blotting检测胶质瘤组织与瘤旁组织中ZnT1 mRNA和蛋白的含量。向 胶质瘤细胞系U87中分别转染ZnT1和si-ZnT1质粒,构建ZnT1过表达和低表达细胞系,MTT和Transwell实验分别检测ZnT1对 U87细胞增殖、侵袭和迁移的影响。 结果： ZnT1 mRNA和蛋白在胶质瘤组织中表达显著高于瘤旁组织（均P<0.05）。成功构建 ZnT1过表达和低表达U87细胞系。与空白和空质粒对照组相比,转染12 h后,ZnT1过表达U87细胞的增殖（0.54±0.01 vs 0.45± 0.04、0.43±0.03,P<0.01）、侵袭和迁移能力（均P<0.05）显著升高;而转染12 h后ZnT1低表达U87细胞的增殖（0.37±0.03 vs 0.45±0.01、0.44±0.03,P<0.01）、侵袭和迁移能力（均P<0.05）显著降低。 结论： ZnT1在胶质瘤组织中呈高表达,ZnT1可以促进 胶质瘤U87细胞的增殖、迁移和侵袭。     

胸腺素β4对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后血脑屏障的影响

目的：观察胸腺素β4对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后血脑屏障的影响,并探讨其作用机制。方法将72只SD大鼠随机分为假手术组、对照组、胸腺素β4组各24只。采用线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞局灶性脑缺血再灌注模型,再灌注24 h后,采用干湿重法测定缺血脑组织含水量,通过检测伊文蓝渗透到缺血侧脑组织的含量观察血脑屏障的通透性,应用RT-PCR法检测缺血脑组织紧密连接蛋白5（ Claudin-5）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9） mRNA表达。结果脑缺血再灌注损伤24 h后,与假手术组比较,对照组缺血侧脑含水量、伊文蓝含量、MMP-9 mRNA表达明显增加,Claudin-5 mRNA表达显著减少（ P均＜0．01）;与对照组比较,胸腺素β4组缺血侧脑组织含水量、缺血侧伊文蓝含量、MMP-9 mRNA明显降低,Claudin-5 mRNA表达明显升高（P均＜0．01）。结论胸腺素β4对大鼠脑缺血再灌注损伤后的血脑屏障具有保护作用,其作用机制可能是通过促进Claudin-5 mRNA表达和抑制MMP-9 mRNA表达实现的。     

表皮生长因子对胶质瘤干细胞增殖与侵袭的影响

目的研究表皮生长因子(EGF)对胶质瘤干细胞生物学行为影响。方法胰蛋白酶消化法进行胶质瘤细胞原代培养,然后将培养基更换为含有EGF、bFGF、B27的DEME/F12培养基,培养后获得悬浮生长的肿瘤球细胞。悬浮生长的肿瘤球进行免疫荧光及分化实验。CCK-8方法检测EGF对胶质瘤干细胞增殖能力影响。Transwell方法检测EGF对胶质瘤干细胞侵袭能力影响。Western blotting实验研究EGF对胶质瘤干细胞中金属基质蛋白酶(MMP)-2表达影响。结果悬浮生长肿瘤球为胶质瘤干细胞。EGF促进胶质瘤干细胞增殖和侵袭,同时提高胶质瘤干细胞MMP-2表达。结论 EGF促进胶质瘤干细胞的增殖和侵袭与调控MMP-2信号通路相关。     

刺芒柄花素抑制胶质瘤细胞的增殖和迁移

目的:探讨刺芒柄花素对胶质瘤细胞增殖和迁移作用。方法:通过MTT实验检测刺芒柄花素对胶质瘤细胞（U87和U251）增殖的影响。用流式细胞仪检测刺芒柄花素对U87细胞周期的作用。通过Western blot实验和Real time PCR实验检测刺芒柄花素对Cyclin D1的作用。Transwell实验检测刺芒柄花素对U87细胞迁移的影响。Western blot实验和Real time PCR实验检测刺芒柄花素对MMP2/9的作用。结果:10 μmol/L和20 μmol/L刺芒柄花素对细胞作用24 h 后对U87细胞增殖抑制率分别是（26.74±4.26）%和（34.74±2.40）%;对U251细胞增殖的抑制率分别为（10.14±9.80）%和（27.16±9.21）%。流式实验指出刺芒柄花素对U87细胞的G1-S期具有阻滞作用。Western blot和Real time PCR实验指出刺芒柄花素可以通过抑制Cyclin D1的表达来抑制U87细胞的增殖。接下来实验发现刺芒柄花素通过抑制MMP2/9来抑制U87细胞迁移。结论:刺芒柄花素可以通过抑制Cyclin D1和MMP2/9来抑制胶质瘤细胞的增殖和迁移。     

三维CT血管造影在前交通支动脉瘤诊治中的应用

目的探讨三维CT血管造影（3D—CTA）在前交通支动脉瘤的诊断与治疗中的临床意义。方法对85例手术治疗的前交通支动脉瘤进行回顾性研究,其中术前直接由数字减影血管造影（DSA）检查确诊并手术26例,术前直接由3D-CTA检查确诊并手术51例,8例术前同时行DSA＋3D-CTA检查并手术。67例术后复查3D．CTA,9例术后复查DSA。结果术前首先行3D—CTA检查的57例中,51例确诊并均经手术证实,6例3D-CTA检查结果阴性而补充DSA检查结果阳性。术前首先行DSA检查的28例中,26例确诊并均经手术证实,2例DSA检查结果阴性而补充3D-CTA检查结果阳性,所有动脉瘤均经显微手术夹闭,翼点入路73例,纵裂入路12例,疗效满意。结论3D-CTA可以作为前交通支动脉瘤的首选筛查手段,不但为手术入路的选择提供帮助,还可以作为术后常规复查手段。     

理化实验室分析质量的影响因素

实验室分析质量与多方面的因素有关,在进行一项分析测量时,任何一个环节发生了问题,就可能会影响测定结果的准确性,本文对影响实验室分析质量的可能因素进行分析,并提出应对措施。1样品对实验室分析质量的影响1·1样品的采集实验所用的样品是实验的根本,也是实验室分析质量控制的起始环节。样品的采集和保管是实验室质量管理中非常重要的一环,没有把好这一关,此后检验过程中所有的质量管理都将失去意义。因此,必须制订样品管理程序,对样品采集、运输、接收、检测、保存、处置进行控制。现场采样工作人员应尽可能用科学、统计学方法选择采样点,以保证采集的样品具有代表性和均匀性。所采集的样品必须注意其生产日期、批号等。1·2样品的运输实验室分析样品种类繁多,有液体、气体及固体等,从样品的采集到实验室,整个运输过程应对样品进行唯一性编号和明确样品状态标识,以免样品混淆。在运输过程中要确保样品包装的完整、防止污染。否则检测结果失去了准确性。1·3样品的送检样品的送检是指所采集的样品送到检验室和检验室对样品接收和检验这一过程。在通过计量认证的检验机构,样品不能直接送到检验室,而是送到收样室,再由收样室送到实验室,因此要注意这一过程的时间问题.避免因...