藻蓝蛋白联合全反式维甲酸诱导HeLa细胞凋亡的分子机制研究

目的 探讨全反式维甲酸和藻蓝蛋白联合用药对HeLa细胞生长的影响,并分析两者联合用药诱导细胞凋亡可能的分子机制。方法 MTT法检测全反式维甲酸和藻蓝蛋白单独及联合用药对HeLa细胞生长的影响,TUNEL法检测单独及联合用药HeLa细胞凋亡情况,免疫组化法检测Bcl-2基因的表达情况,Westren blot法检测Caspase-3的表达情况。结果 全反式维甲酸和藻蓝蛋白均具有抑制HeLa细胞生长的作用,当达到相同的抑制率时,联合藻蓝蛋白使用可以显著降低全反式维甲酸的使用剂量从而达到降低毒副作用的目的。2种药物联合用药处于中高抑制率时,2种药物为协同作用。两者联合用药可以显著下调Bcl-2和增加Caspase-3的表达水平从而引发细胞凋亡。结论 2种药物单独使用均能抑制HeLa细胞的生长,联合用药时该抑制作用更为显著。全反式维甲酸和藻蓝蛋白联合用药诱导HeLa细胞凋亡的分子机制可能是通过抑制bcl-2基因的表达、促进Caspase-3蛋白的表达,从而促进凋亡信号的转导最终导致细胞死亡的。 关键词：全反式维甲酸;藻蓝蛋白;HeLa细胞;凋亡;增殖抑制     

藻蓝蛋白/羧甲基壳聚糖纳米球的制备及其对人宫颈癌HeLa细胞增殖的抑制

目的：制备新型负载藻蓝蛋白（C-phycocyanin,C-PC）的羧甲基壳聚糖（carboxymethyl chitosan,CMC）纳米微球（nanoparticle,NP）,探讨藻蓝蛋白羧甲基壳聚糖纳米微球（C-PC/CMCNP）对人宫颈癌HeLa细胞生长的影响及其分子机制。 方法： 采用正交分析方法,以CMC和C-PC的质量比、CMC浓度、CaCl2浓度为考察因素,通过检测C-PC/CMCNP的粒径和CMC的包封率,优选制备C-PC/CMCNP的最佳条件,并制备C-PC/CMCNP。CCK-8法检测C-PC、CMC和C-PC/CMCNP对HeLa细胞增殖的影响,流式细胞术检测HeLa细胞凋亡情况,Westren blotting检测HeLa细胞中caspase-3蛋白的表达。 结果： CMC与C-PC的质量比为1 ∶2、CMC质量浓度为1 mg/ml,CaCl2质量浓度为1 mg/ml为最佳制备条件,最终制备的C-PC/CMCNP的平均粒径为（118.4±2.07）nm,并具有较高的包封率（63.2%）,其缓释12 h 的累积缓释率超过60%。C-PC、CMC和C-PC/CMCNP均能抑制HeLa细胞的增殖,诱导细胞凋亡,并促进caspase-3蛋白的表达,但C-PC/CMCNP的作用效果最为显著。 结论： 优化制备条件得到具有高效缓释性能的C-PC/CMCNP,其对HeLa细胞显著的抑制作用可能是通过促进caspase-3蛋白的表达进而诱导肿瘤细胞凋亡来实现的。     

藻蓝蛋白协同全反式维甲酸影响人宫颈癌HeLa细胞的增殖和凋亡

目的：探讨全反式维甲酸（all-transretinoic acid,ATRA）和钝顶螺旋藻藻蓝蛋白（C-phycocyanin,C-PC）联合用药对人宫颈癌HeLa细胞繁殖和凋亡的影响及其诱导细胞凋亡可能的分子机制。 方法： 实验分4组：对照组,C-PC组,ATRA组,C-PC+ATRA联合用药组。MTT法检测ATRA和C-PC单独及联合用药对HeLa细胞增殖的影响并计算它们的IC50,TUNEL法检测单独及联合用药后HeLa细胞凋亡情况,免疫组化法检测Bcl-2的表达,Westren blotting法检测Caspase-3的表达。 结果： ATRA和C-PC均具有抑制HeLa细胞增殖的作用,IC50分别为（0.158± 0.036）mmol/L和（192.75± 5.79）μg/L。采用不同浓度的ATRA分别联合40或80 μg/L C-PC处理HeLa细胞,ATRA的IC50分别为（0.095±0.007）mmol/L和（0.062±0004）mmol/L,明显低于ATRA单独用药时的IC50值;当达到相同的抑制率时,联合C-PC用药可以显著降低ATRA的使用剂量。与对照组相比,两种药物单独用药增加了HeLa细胞凋亡水平（IOD C-PC=63.12, IOD ATRA=59.98, P <0.05）;当两种药物联合用药时,凋亡水平增加更加显著（IOD=89.52, P <0.01）。两药联合使用后HeLa细胞显著下调Bcl-2和上调Caspase-3的表达水平（均 P <0.01）。 结论： ATRA和C-PC联合用药可抑制HeLa细胞增殖和诱导其凋亡,其分子机制可能是通过抑制Bcl-2表达、促进Caspase-3表达来实现的。