乳腺癌中MAGE-A9和MAGE-A11基因的表达及表达机制的研究

【】 目的：探讨黑色素瘤抗原MAGE-A9和MAGE-A11在乳腺正常组织、乳腺良性病变、乳腺癌组织中的表达以及甲基化酶抑制剂5-氮杂-２"-脱氧胞苷(5-aza-CdR)和组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)对MAGE-A9和MAGE-A11基因表达的影响。方法：应用RT-PCR检测60例乳腺正常组织、60例乳腺良性病变及60例乳腺癌组织中MAGE-A9和MAGE-A11 mRNA的表达,分析其与乳腺癌患者临床病理学特征的关系。乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231经5-aza-CdR 和 TSA 单独或联合作用后,应用RT-PCR法检测细胞中 MAGE-A9和MAGE-A11 mRNA 表达的变化。结果：乳腺癌组织中MAGE-A9 mRNA阳性表达率为45%(27/60),MAGE-A11 mRNA阳性表达率为66.7%(40/60),而乳腺正常组织及良性病变中均未发现MAGE-A9和MAGE-A11 mRNA的表达。 MAGE-A9和MAGE-A11 mRNA的表达与乳腺癌患者的年龄、病理类型、临床分期、肿瘤大小、淋巴转移、瘤栓及孕激素受体的表达均无明显关系(P ＞0.05),与人表皮生长因子受体2(HER-2)和雌激素受体(ER)的表达有关(P＜0.05)。未经药物处理的MCF-7、MDA-MB-231细胞未见MAGE-A9和MAGE-A11 mRNA表达。单用5-aza-CdR后可见MAGE-A9和MAGE-A11基因重新表达,联合应用5-aza-CdR和TSA使MAGE-A9和MAGE-A11基因表达进一步增加(P＜0.05)。TSA单独作用对基因表达没有影响(P＞0.05)。结论：乳腺癌组织中MAGE-A9和MAGE-A11 mRNA的表达与ER 和HER-2的表达有关,5-aza-CdR单用或联合应用TSA可诱导不表达MAGE-A9和MAGE-A11 mRNA的细胞重新表达,说明DNA的去甲基化和组蛋白乙酰化是调控人类肿瘤细胞MAGE的表达的重要机制。     

贝那普利对糖尿病大鼠肾组织环氧合酶2及环氧合酶源性前列腺素表达的干预

前列腺素代谢异常与肾小球高滤过密切相关,环氧合酶(COX)是前列腺素合成的关键限速酶,有同工酶COX-1和COX-2.糖尿病肾病(DN)时肾脏COX-2的表达增多,而COX-1无明显变化[1].血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)增多及肾脏氧化应激状态均可诱导COX-2大量产生,而应用抗氧化剂可以抑制COX-2表达[2,3].探讨AngⅡ、氧化应激和COX-2的关系以及ACEI类药物是否能通过抑制AngⅡ及氧化应激从而进一步抑制肾组织COX-2表达.可能为临床治疗DN提供新的理论依据.     

MAGE-C1在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨黑色素瘤相关抗原-C1（melanoma-associated antigen-C1, MAGE-C1）在乳腺癌组织中的表达及其与患者临 床病理特征和预后的关系。方法：选取2008年1月至2008年12月河北医科大学第四医院乳腺中心行手术切除的乳腺癌、正常 乳腺组织及良性乳腺病变组织各60例， 用RT-PCR和免疫组织化学染色法分别检测3种组织中MAGE-C1 mRNA和蛋白的表达 水平，分析MAGE-C1表达与乳腺癌患者临床病理特征及预后的关系。用DNA甲基化酶抑制剂5-氮杂-2''-脱氧胞苷（5-Aza-CdR） 和组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A（TSA）干预乳腺癌MDA-MB-231和MCF-7细胞，RT-PCR法检测药物干预前后细胞中 MAGE-C1 mRNA表达的变化。结果：乳腺癌组织中MAGE-C1 mRNA及蛋白表达阳性率分别为43.3%（26/60）和38.3%（23/60）， 乳腺正常组织及良性病变组织中均未发现MAGE-C1 mRNA 和蛋白的表达。MAGE-C1表达与乳腺癌患者的组织学分级相关 （χ2 =6.233，P<0.05）。MAGE-C1 表达阳性的患者 ，其无复发生存率低于 MAGE-C1 表达阴性的患者（χ2=4.213，P<0.05）。 MAGE-C1表达（HR=3.980，P<0.05）和临床分期（HR=3.637，P<0.05）是影响乳腺癌患者预后的独立危险因素。单独或联合应用 5-Aza-CdR和TSA对乳腺癌细胞中MAGE-C1的表达均无影响（P>0.05）。结论：MAGE-C1是肿瘤特异性抗原，其表达与乳腺癌 患者的不良预后密切相关。     

食管和胃双原发癌组织CDH1基因甲基化的表达及意义

目的 研究同一个体食管和胃双原发癌组织中CDH1基因启动子区CpG岛甲基化变化及其临床意义.方法 应用甲基化特异性PCR法,检测18例食管和胃双原发癌患者癌组织及癌旁组织中CDH1基因甲基化的表达.结果 2007年1月至2009年9月河北医科大学第四医院经内镜确诊18例双原发癌患者,食管鳞状细胞癌及癌旁组织CDH1基因甲基化阳性率分别为66.7%和33.3%,二者间差异有统计学意义(χ2=4.167,P=0.031);胃腺癌及癌旁组织CDH1基因甲基化阳性率分别为77.8%和44.4%,二者间差异无统计学意义(χ2=1.786,P=0.180).同一患者的食管癌和胃癌组织CDH1基因甲基化阳性率差异无统计学意义(P=0.500).18例双原发癌中,16例两种癌组织同时出现该基因甲基化一致性改变,一致性变化发生率为88.9%(一致阳性率为66.7%,一致阴性率为22.2%),统计学分析二者呈显著相关性(P=0.005).结论 双原发癌食管癌和胃癌存在较高的CDH1基因甲基化一致性变化,提示二者可能具有相似的发病因素和分子机制.

Abstract：

Objective To study the changes of CDH1 gene promoter CpG island methylation and its clinical significance in patients with esophagus and stomach double primary carcinoma(ESDC).Methods The expression of CDH1 gene methylation in cancerous tissues and adjacent cancerous tissues in 18 cases of ESDC were detected using methylation-specific PCR method. Results Eighteen patients were endoscopically diagnosed as ESDC between Jan. 2007 and Sep. 2009 in the 4th Hospital Affiliated to Hebei Medical University. The positive methylation of CDH1 gene in tissues of esophageal squamous cell carcinoma (ESCC)and adjacent cancer were 66.7% and 33. 3%, respectively, with significant difference (χ2= 4. 167, P = 0. 031). Whereas the positive methylation of CDH1 gene in tissues of gastric carcinoma (GA) and adjacent cancer were 77.8% and 44.4%, respectively, without statistical difference (χ2=1.786, P= 0. 180). There was no significant difference (P=0. 500) in positive rate of CDH1 gene methylation between ESCC tissues and GA tissues in same individual with ESDC. For 18 patients with ESDC, consistent change of CDH1 methylation in tissues of two kinds of cancers was found in 16 patients with a total agreement of 88.9 % (positive agreement of 66.7 % and negative agreement of 22. 2%). Statistical analysis showed a significant correlation between two groups (P = 0. 005). Conclusion In patients with ESDC, there is a high consistency of CDH1 methylation change, between ESCC and GA,which suggests that two kinds of cancer may have similar risk factors and molecular mechanisms.     

MAGE-A9和MAGE-A11基因在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨黑素瘤抗原MAGE-A9和MAGE-A11 在乳腺正常组织、乳腺良性病变、乳腺癌组织中的表达以及甲基化酶抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷 (5-Aza-2’-deoxycytidine, 5-Aza-CdR)和组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A（TSA）对MAGE-A9和MAGE-A11 基因表达的影响。方法：应用RT-PCR和免疫组化方法检测60例乳腺正常组织、60例乳腺良性病变及60例乳腺癌组织（标本均取自河北医科大学第四医院乳腺中心2007年11月至2008年5月乳腺手术治疗患者）中MAGE-A9和MAGE-A11 mRNA及其蛋白的表达,分析其与乳腺癌患者临床病理学特征的关系。RT-PCR检测乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231经5-Aza-CdR 和 TSA 单独或联合作用后MAGE-A9和MAGE-A11 mRNA 表达量的变化。结果：乳腺癌组织中MAGE-A9 mRNA和蛋白阳性表达率分别为45%（27/60）和43.3%（26/60）,MAGE-A11 mRNA和蛋白阳性表达率分别为66.7%（40/60）和63.3%（38/60）,而乳腺正常组织及良性病变组织中均未发现MAGE-A9、MAGE-A11 mRNA及其蛋白的表达。 MAGE-A9、MAGE-A11 mRNA和蛋白的表达与乳腺癌患者的年龄、病理类型、临床分期、肿瘤大小、淋巴转移、瘤栓及孕激素受体的表达均无明显关系（P>0.05）,但与人表皮生长因子受体2（HER-2）和雌激素受体（ER）的表达有关（P<0.05）。未经药物处理的MCF-7、MDA-MB-231细胞未见MAGE-A9和MAGE-A11 mRNA表达;单用5-Aza-CdR处理后可见MAGE-A9和MAGE-A11 基因重新表达,联合应用5-Aza-CdR和TSA处理可使MAGE-A9、MAGE-A11基因的表达量进一步增加（P<0.05）;而TSA单独处理对基因表达没有影响（P>0.05）。结论：乳腺癌组织中MAGE-A9和MAGE-A11 的表达与ER 和HER-2的表达有关,5-Aza-CdR单用或联合应用TSA可诱导和增强MAGE-A9和MAGE-A11 mRNA的重新表达,说明DNA的去甲基化和组蛋白乙酰化可能是调控人类肿瘤细胞MAGE表达的重要机制。