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目的:探讨慢病毒介导的N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅳa (N-acetylglucosaminyltransferase Ⅳa,GnTⅣa)表达下调对小鼠肝癌Hca-F细胞体外增殖及侵袭能力的影响。方法:针对GnTⅣa的编码基因Mgat4a,构建含shRNA干扰序列的慢病毒表达载体pll3.7/Mgat4a-shRNA并包装慢病毒颗粒,感染Hca-F细胞。RT-PCR 及流式细胞术分别检测Mgat4a-shRNA重组慢病毒感染对Hca-F细胞Mgat4a mRNA及GnTⅣa表达的影响,CCK-8法和Transwell侵袭实验分别检测Mgat4a-shRNA重组慢病毒感染在体外对Hca-F细胞增殖和侵袭能力的影响。结果:慢病毒能够高效感染小鼠肝癌细胞Hca-F,Mgat4a-shRNA组感染效率达72%。与Hca-F细胞和Mock-shRNA组相比,Mgat4a-shRNA组细胞内Mgat4amRNA\[(0.53±0.2) vs(2.97±02)、(2.90±0.1);均P<0.05\]和GnTⅣa\[(47.80±2.25)vs(394.61±5.27)、(378.61±4.38);均P<0.05\]表达显著降低;增殖能力\[细胞增殖抑制率:(46.9±0.02)%vs (0.82±0.03)%、 0,P<0.01\]和体外侵袭能力\[穿过滤膜的细胞数:(18±3)vs (42±4)、(38±3)个,均P<0.05\]显著下降。结论:慢病毒介导shRNA下调GnTⅣa的表达能够抑制小鼠肝癌细胞 Hca-F的增殖及体外侵袭。 相似文献
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