盆痛灵方对子宫内膜异位症大鼠神经生长因子及其受体表达的影响

目的:探讨盆痛灵方对子宫内膜异位症(EMs)大鼠异位内膜神经生长因子(NGF)及其受体酪氨酸激酶受体A(TrkA)和神经营养因子受体p75(p75NTR)表达的影响。方法:采用自体内膜移植法建立大鼠EMs模型。取造模成功的大鼠随机分为模型组、消炎痛组和盆痛灵低、中、高剂量组,每组10只;另设假手术组10只(仅切除单侧结扎段子宫)。消炎痛组大鼠给予3 mg·kg~(-1)·d~(-1)消炎痛混悬液,盆痛灵低、中、高剂量组大鼠分别给予10.2、20.4、40.8 g·kg~(-1)·d~(-1)盆痛灵方水煎液,各组均采用直肠给药方式,每日1次,连续4周;模型组和假手术组给予等体积0.9%NaCl溶液。末次给药后,采集各组大鼠的子宫内膜组织。PCR检测各组大鼠异位内膜NGF、p75NTR、TrkA的mRNA表达,Western blot和免疫组化法检测异位内膜NGF、p75NTR、TrkA蛋白表达。结果:①PCR检测显示,模型组大鼠内膜组织NGF、TrkA、p75NTR的mRNA表达较假手术组显著升高(P0.01);与模型组相比,消炎痛组和盆痛灵中、高剂量组NGF和TrkA的mRNA表达明显降低(P0.05,P0.01),消炎痛组和盆痛灵高剂量组p75NTR的mRNA表达亦明显降低(P0.01);与盆痛灵低剂量组相比,高剂量组大鼠的内膜组织NGF、TrkA、p75NTR的mRNA表达均显著降低(P0.01),中剂量组TrkA mRNA表达亦明显降低(P0.05);与盆痛灵中剂量组相比,高剂量组p75NTR mRNA表达明显降低(P0.01)。②Western blot检测显示,模型组大鼠内膜组织NGF、TrkA、p75NTR蛋白表达水平较假手术组显著升高(P0.01);与模型组相比,消炎痛组及盆痛灵高、中、低剂量组NGF、TrkA、p75NTR蛋白表达水平均明显降低(P0.01);与盆痛灵低剂量组相比,中、高剂量组大鼠子宫内膜NGF、TrkA、p75NTR蛋白表达水平均显著降低(P0.01);与盆痛灵中剂量组相比,高剂量组NGF、TrkA、p75NTR蛋白表达水平亦显著降低(P0.01)。③免疫组化检测显示,与假手术组相比,模型组NGF及其受体p75NTR、TrkA在异位内膜的腺上皮细胞与间质细胞胞浆呈高表达,仅少量表达于胞核;与模型组相比,消炎痛组及盆痛灵中、高剂量组NGF、p75NTR、TrkA的阳性表达明显减弱;与盆痛灵低剂量组相比,盆痛灵中、高剂量组NGF、p75NTR、TrkA的阳性表达明显减弱。结论:盆痛灵方可能通过降低异位内膜NGF及其受体p75NTR、TrkA的表达,对子宫内膜异位症起治疗作用,且其作用具有一定的剂量依赖性。     

茯苓酸改善多囊卵巢综合征大鼠胰岛素抵抗的作用及机制研究

目的 研究茯苓酸对多囊卵巢综合征（PCOS）大鼠胰岛素抵抗的改善作用及机制。方法 将126只雌性大鼠按随机数字表法分为空白组、PCOS组、茯苓酸低剂量组（8.33 mg/kg）、茯苓酸高剂量组（33.32 mg/kg）、炔雌醇环丙孕酮组（阳性对照组,0.34mg/kg）、重组大鼠高迁移率族蛋白B1蛋白（rHMGB1）组（8μg/kg）和茯苓酸高剂量+rHMGB1组（33.32 mg/kg茯苓酸+8μg/kg rHMGB1）,每组18只。除空白组外,其余各组大鼠均通过灌胃来曲唑混悬液的方式构建PCOS模型。建模成功后,每天给药1次,持续4周。给药结束后,检测大鼠空腹血糖、空腹胰岛素水平及胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）,检测大鼠血清中促卵泡素（FSH）、促黄体生成素（LH）、睾酮（T）水平及卵巢组织中白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,计算大鼠卵巢系数,观察大鼠卵巢组织病理变化,检测大鼠卵巢组织中HMGB1、晚期糖基化终产物受体（RAGE）、磷酸化核因子κB p65(p-NF-κB p65)蛋白表达情况。结果 与空白组比较,PCOS组大鼠卵巢组织病理损伤严重,...     

盆痛灵方对子宫内膜异位症模型大鼠镇痛作用机制的研究

目的?基于神经生长因子（NGF）调控p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）信号通路探讨盆痛灵方对子宫内膜异位症（EMs）模型大鼠的镇痛机制。方法?采用自体内膜移植法建立SD大鼠EMs疼痛模型，将模型大鼠按随机数字表法分为鞘内注射4组[对照组、NGF诱导剂组（NGF组）、NGF抑制剂组（鞘K组）、p38MAPK抑制剂组（鞘S组）]，每组15只；直肠给药5组（模型组、盆痛灵方低、中、高剂量组、西药组），每组15只；另设假手术组15只。采用机械刺痛法观察鞘内注射组的痛阈值变化，免疫组化染色法检测鞘内干预后模型大鼠内异灶NGF、磷酸化p38（p-p38）、瞬时受体电位辣椒素亚型Ⅰ（TRPV1）蛋白表达，并用蛋白免疫印迹（Western Blot）、反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测鞘内干预后内异灶及背根神经节（DRG）中NGF、p-p38、TRPV1蛋白及基因表达水平的变化以及盆痛灵方灌肠干预后p-p38蛋白及基因表达。结果?鞘内注射干预后，与对照组比较，NGF组痛阈值下降，鞘K、鞘S组痛阈值上升（P<0.01）；内异灶及DRG内NGF诱导剂组NGF、p38、TRPV1mRNA及蛋白表达均升高，内异灶内鞘K、鞘S组NGFmRNA及蛋白表达均下降（P<0.01），p-p38、TRPV1蛋白表达下降（P<0.01）；DRG内鞘K组NGF、p38mRNA及蛋白表达下降，鞘S组p38、TRPV1mRNA及蛋白表达下降（P<0.05）；及NGF、p-p38蛋白表达下降（P<0.01）。直肠给药干预后，与假手术组比较，模型组中p38 mRNA及蛋白表达增加；与模型组比较，西药组及盆痛灵高剂量组p38 mRNA及蛋白表达均降低（P<0.01），盆痛灵低、中剂量组p-p38蛋白表达下降（P<0.01）。结论?NGF-p38MAPK信号通路的激活降调TRPV1基因和蛋白的表达参与EMs疼痛的发生，盆痛灵方通过调控NGF-p38MAPK-TRPV1信号通路逆转EMs疼痛。