槲皮素对H2O2诱导人RPE细胞氧化应激损伤的保护作用

目的：探讨槲皮素对H2 O2诱导的人视网膜色素上皮细胞( retina pigment epithelium,RPE)氧化应激损伤的保护作用及可能机制。
　　方法：RPE细胞传代培养,分为阴性对照组：以正常培养液培养;氧化损伤组：100μmol/L的H2 O2作用12h;槲皮素低浓度组：100μmol/L 槲皮素孵育24h 后,加入 H2 O2作用12 h;槲皮素高浓度组：500μmol/L槲皮素孵育24 h后,加入H2 O2作用12h。 MTT比色法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率, Hochest33258染色观察凋亡细胞形态,比色法检测细胞中过氧化氢酶( catalase,CAT)、超氧化物歧化酶( superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶( glutathione peroxidase,GSH-Px)活性。
　　结果：槲皮素能明显抑制H2 O2诱导的RPE细胞活力的下降,用不同浓度槲皮素处理后,RPE细胞活性分别提高到79.67%±4.98%和83.00%±3.60%,与氧化损伤组(48.93%±3.39%)比较,差异具有统计学意义(P<0.05);经不同浓度槲皮素处理后, RPE细胞凋亡率分别下降至23.23%±3.29%和16.23%±1.94%,与氧化损伤组(38.03%±4.76%)比较,差异具有统计学意义(P<0.05);此外,槲皮素还能增加细胞中CAT、SOD、GSH-Px活性,与氧化损伤组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。
　　结论：槲皮素通过改善细胞中抗氧化酶活性有效抑制了H2 O2对RPE细胞的损伤,从而为其用于治疗RPE细胞损伤提供可靠的实验±据。     

激光共焦显微镜与角膜组织刮片检查在真菌性角膜炎中应用的比较

目的:对比分析激光共焦显微镜检查与角膜组织刮片检查在真菌性角膜炎诊断中的应用.方法:选择2016-05/08来我院治疗的拟诊为真菌性角膜炎患者77例77眼,同时行激光共焦显微镜检查及角膜组织刮片检查,观察图像特点,对比分析两种方法真菌检出率情况.结果:所有患者中,激光共焦显微镜检出阳性66眼,阴性11眼,检出率为86%;角膜组织刮片检查确诊阳性51眼,阴性26眼,检出率为66%,两者比较差异具有统计学意义(P<0.05).结论:激光角膜共焦显微镜检查的安全性和敏感性相对较高,如果能将激光角膜共焦显微镜检查与角膜组织刮片检查联合应用于临床,对提高真菌性角膜炎患者的诊断率具有重要意义.     

银杏内酯B对H2O2诱导人视网膜色素上皮细胞氧化损伤的保护作用

目的　探讨银杏内酯Ｂ对体外培养的人视网膜色素上皮（ｒｅｔｉｎａｌｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ,ＲＰＥ）细胞氧化损伤的保护作用及可能机制。方法　ＲＰＥ细胞传代培养２４ｈ后,随机分为阴性对照组、氧化损伤组、银杏内酯Ｂ低浓度组（１ｍｏｌ?Ｌ－１）和银杏内酯Ｂ高浓度组（１０ｍｏｌ?Ｌ－１）,银杏内酯Ｂ预处理２４ｈ后,加入１００μｍｏｌ?Ｌ－１Ｈ２Ｏ２继续孵育１２ｈ,ＭＴＴ比色法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Ｈｏｃｈｅｓｔ３３２５８染色观察凋亡细胞形态,比色法检测凋亡相关因子Ｃａｓｐａｓｅ-３及Ｃａｓｐａｓｅ-９的表达。结果　银杏内酯Ｂ能明显抑制Ｈ２Ｏ２诱导的ＲＰＥ细胞活力的下降,ＭＴＴ结果显示银杏内酯Ｂ低浓度组和银杏内酯Ｂ高浓度组细胞活性分别为（５３．３７±２．５３）％和（６９．５７±３．１７）％,与氧化损伤组的（３１．３３±２．４１）％比较,差异均具有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）;流式细胞计数结果显示银杏内酯Ｂ低浓度组和银杏内酯Ｂ高浓度组细胞凋亡率分别下降至（２７．５３±３．３４）％和（１３．３０±２．２５）％,与氧化损伤组的（４８．１３±２．６８）％比较,差异均具有统计学意义（均为Ｐ＜０．０１）。此外,银杏内酯Ｂ还可以减少Ｈ２Ｏ２所致ＲＰＥ细胞内Ｃａｓｐａｓｅ-３及Ｃａｓｐａｓｅ-９的表达。结论　银杏内酯Ｂ通过抑制Ｃａｓｐａｓｅ-３及Ｃａｓｐａｓｅ-９的表达有效抑制了Ｈ２Ｏ２对ＲＰＥ细胞的损伤,从而为其用于治疗ＲＰＥ细胞损伤提供可靠的实验依据。