排序方式: 共有57条查询结果,搜索用时 15 毫秒
1.
107例静注海洛因成瘾者TT病毒感染状况 总被引:4,自引:0,他引:4
目的:调查贵州地区静注海洛因成瘾者TT病毒感染状况。方法:以公布的TTV第1读码区序列设计两对寡核苷酸引物,用套式聚合酶链反应(nPCR)检测107例静注海洛因成瘾者血清中TTVDNA,以62列正常人为对照。同时用酶联免疫法测丙肝病毒抗体(抗HCV),逆转录套式聚合酶链反应(RT-nPCR)测庚肝病毒核糖核酸(HGVRNA)。结果:正常人TTVDNA阳性率6.45%,海洛因成瘾者25.23%。两组相比,差异有显著意义(P<0.005)。成瘾者TTVDNA阳性率在男、女组间无差异,与注毒时间长短无相关(P>0.05)。27例TTVDNA阳性成瘾者中,11例为单纯TTV感染,16 重叠HCV或HGV感染,其中TTV、HCV、HGV三重感染8例,TTV重叠HCV5例,重叠GCV3例。结论:贵州地区静注海洛因成瘾者中有TTV感染存在,感染率高低与性别、注毒时间长短无关。TTV可以单独感染,但与HCV、HGV的重叠感染率较高。 相似文献
2.
乙型肝炎病毒S基因限制性片段长度多态性分型方法的建立及应用 总被引:10,自引:1,他引:10
目的 建立乙型肝炎病毒(HBV)S基因片段聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(RFLP)的基因分型方法并用于基因型与临床疾病谱关系的研究。 方法 比较GenBank中124株各基因型HBV全序列的S基因核苷酸序列及13株单独S基因序列,设计利用限制性内切酶Mbo Ⅰ、BsTN Ⅰ、BsmA Ⅰ、HpaⅡ酶切S基因片段鉴定HBV基因型(A-F)的方法。对贵州地区176份乙型肝炎患者血清进行基因分型并分析基因型与疾病谱的关系。直接测序2份B型和3份C型毒株的PCR扩增产物,以验证本酶切分型方法的正确性。 结果 测序结果证明本方法能够准确鉴定基因型。在176份标本中,B型100份(56.8%),C型76份(43.2%),未发现其他基因型。B型中无症状携带者(ASC)比例(40.0%)高于C型(15.8%),x2=12.16,P<0.005;慢性中度比例(14.0%)低于C型(31.6%),x2=7.88,P<0,005。 结论 本S基因片段PCR-RFLP基因分型方法简便、准确。贵州地区存在HBV B和C基因型。 相似文献
3.
乙型肝炎病毒前C区及基本核心启动子变异检测方法的比较研究 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 建立错配聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(mPCR-RFLP)检测乙型肝炎病毒(HBV)前C区A1896、基本核心启动子(BCP)T1762/A1764双变异的方法,与直接测序法比较,评估其应用价值.方法 利用错配PCR的原理扩增HBV前C区长194 bp、C启动子区长184 bp的基因片段,扩增产物分别经限制性内切酶Bsu36I、BclI酶切,琼脂糖凝胶电泳,根据酶切图谱多态性,建立检测HBV前C A1896、BCP T1762/A1764双变异的方法,对127份HBsAg、HBV DNA阳性的HBV感染者血清进行分析,酶切同时测序.2份标本用克隆测序以验证酶切鉴定变异株、野株混合感染的准确性.结果 127份血清中125(98.42%)份能用酶切、121(95.21%)份能用测序分析HBV前CA1896、BCP T1762/A1764状况.酶切与测序均成功的119份血清中,16份为前C区A1896变异株,34份为BCP T1762/A1764双变异株,21份为前C区A1896、BCP T1762/A1764联合变异株,48份为前C区G1896、BCP A1762/G1764野株,酶切与测序的结果完全一致.1份酶切鉴定为前C区A1896、G1896混合感染标本的5个克隆子中,1个为前C区A1896变异株,另外4个为前C区G1896野株;另1份酶切鉴定为单纯前C区A1896变异标本的5个克隆子均为前C区A1896变异株,酶切分析结果与克隆测序结果完全相符.结论 与测序法相比,本方法较简便、特异性强,能区分野毒株、变异株混合感染,适合较大样本分析,可用于流行病学调查及临床筛查. 相似文献
4.
目的研究乙型肝炎病毒(HBV)感染者基本核心启动子(BCP)变异情况。方法收集HBV感染者血清标本132份(HBV DNA均阳性),用半巢式聚合酶链反应扩增HBV C基因部分片段,产物纯化后直接测序,检测BCP T1762/A1764变异。用S基因错配聚合酶链反应(PCR RFLP)法确定HBV基因型。结果51例乙型肝炎e抗原(HBeAg)阳性患者BCP T1762/A1764双变异检出率为27.45%,81例HBeAg阴性患者BCP T1762/A1764双变异检出率为62.96%,两组比较,差异有高度显著性(χ2=15.79,P=0.00)。 BCP T1762/A1764双变异的HBV感染者B基因型检出率为33.85%,明显低于C基因型的检出率66.15%(χ2=24.25,P=0.00)。结论HBV感染者普遍存在BCP T1762/A1764双变异,以C基因型感染者多见。 相似文献
6.
选HCV2b基因型的NS5B区序更合成引的,以RT-PCR从慢性丙肝病人血清中扩增一段401bp的cDNA片断作目的基因,插入pTD-T7的多克隆位点,构建了重组质粒pTD-HCV-NS5B。应用ECORI BamHI双切出克隆HCV基因,酶切片断的分子量与预期相符。用载体序列特异的通用引物进行测序分析证实pTD-HCV-NS5B中克隆基因是HCV2b的NS6B6序列,且为正方向插入。 相似文献
7.
贵州存在戊型病毒性肝炎 总被引:1,自引:1,他引:0
对180例病毒性肝炎患者进行了血清抗-HEV的检测,并对急性肝炎进行了病原学分型研究。抗-HEV总阳性率为11.11%(20/180)。亚急性重型肝炎患者血清抗-HEV阳性率最高达33.33%(2/16),急性肝炎和慢性活动性肝炎血清抗-HEV的阳性率分别为11.13%(17/154)与7.14%(1/14)。17例抗-HEV阳性的急性肝炎患者血清学上无甲、乙、丙、丁肝炎病毒、CMV和EBV感染标志。戊型肝炎在急性肝炎中的比例为11.03%。结果提示贵州存在有戊型肝炎。 相似文献
8.
HCV主要经血传播,供血者作抗一HCV筛查前(筛前),本地区血液病患者有较高的HCV感染率[1]。为了解筛查后(筛后)血液病患者HCV感染状况,我们采用第二代EllSA和套式peR相结合的方法对92例血液病患者进行了HCV感染率检测,并探讨有关问题。1资料和方法1.至病例选择:1996年8月至1997年8月我院血液病房住院的血液病患者92例,男45例,女47例,年龄14-78岁,平均扬.8岁。其中急性白血病(AL)四例,慢性白血病(CL)6例,骨髓增生异常综合征(MDS)6例,淋巴瘤6例,多发性骨髓瘤5例,恶性组织细胞病(恶组应例,骨髓纤维化2例… 相似文献
9.
HBV耐拉米夫定多聚酶基因变异检测方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 建立一种简便,准确,实用的乙型肝炎病毒(HBV)耐拉米夫定多聚酶基因变异检测方法。方法 根据已公布的HBVDNA序列,在HBV多聚酶基因区设计并合成了两对寡核苷酸引物,其中一只为错配引物;应用巢式错配聚合酶链反应特异性扩增含有HBV多聚酶基因YMDD基序的片段,扩增产物用限制性内切酶(NdeⅠ)酶切,琼脂糖凝胶电泳,观察酶切后的目的片段限制性片段长度多态性(RFLP)图谱,部分标本进行DNA测序,结果 (1)所建立的巢式错配PCR-RFLP方法操作简便,快速,从DNA提取到酶切后电泳分析仅需要11小时;灵敏度高,可以检测到10^3copies/ml的HBVDNA;特异性强,结果准确,经DNA测序证实,(2)应用该方法对20例长期服用拉米夫定的慢性乙型肝炎患者的系列血清进行了检测,发现YMDD变异者(45%)9例,YMDD野毒株者(55%)11例,表明该方法可有效地鉴别HBVYMDD野毒株与变异株,结论 本实验所建立的巢式错配PCR-RFLP方法简单,敏感,特异,适合于一般实验室应用及大规模的人群调查。 相似文献
10.
贵州地区不同人群TTV核酸检测及部分核苷酸序列分析 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 了解贵州地区TTV感染状况,分析TTV贵州株的基因特点。方法 以公布的TTV第1读码区序列设计两对寡核苷酸引物,用套式聚合酶链反应法(nested—PCR)检测贵州地区不同人群血清中TTV核酸(TTV DNA),并对3份TTV DNA阳性血清的PcR产物,用直接测序法测定核苷酸序列。结果 62例正常人,37例志愿献血员,50例血液透析患者,107例静脉药瘾者及139例肝病患者血清中TTV DNA阳性率分别为6.45%(4/62),8.1%(3/37),26.0%(13/50),25.23%(27/107)和16.55%(23/139)。在肝病组中,重型肝炎、肝硬化、肝癌患者的TTV DNA阳性率分别为35.71%(5/14),14.15%(15/106)和15.79(3/19)。测定的282个核苷酸中,3株贵州株的同源性均高于99%,与日本株N22相比,同源性都为98%。结论 贵州存在TTV感染,血透患者中有较高的TTV感染率,TTV可能是重型肝炎的病原因子,3株贵州株可能为同一基因型。 相似文献